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《人细胞差异表达基因cDNA消减杂交体系的建立》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、ro...;364生物化学与生物物理进展PgBiochemBioPhys199623(4),:,eths;annstuteesaMod19803273Ti(IitofBioPh笋iAcademin,ae,ona.eL”WRMl代刁RMMmsoJCetlJBiochmSinica,Being100101,China).ijBets,;12:i叩h邓Mhed198557srae一AbttRaPidseryteeniqueter.midhbyfil顾学范,陈瑞冠,齐家仪生物化学与生物物理进展,:striPsshortensrunningtim
2、efromZ一4hto1985;59(5).noutoernreutonan,mo,Gmn,iekleHPn:u40一50miwithlwigidSeurCuaS段hI阮lmN0edsol,.-.ProgandAbsetsICES-EH()93ndefjord(NorusinglargeaountoeeetroeuertarantraLPSamfldbffIlsoway):IntatioeilofElectPhoresisS又ieties,.ernnalCounrosimPlifiesoperationandsavesmaterials
3、Being:1993125..,eoaretaepH4.mPdwihPH89dPAGE8,:no1994;2郭尧君生物化学与生物物理进展21(3)65aserreutonnaeen.iiidProti:,,PAGEhhighsolldrewsATElectrOI〕stheoryteehniquesand儿horesl..seeratonerresuseaneoanebiochiandelinicalappliearionsNewYork:OxfordPiVygodltbbtidbyemcal.一Universty,:usneatoets
4、eriP198152一53igPH55hdPAGEwihmidy~.,1;:郭尧君生物化学与生物物理进展99118(1)犯teehniquebyfilterstriPsforalkalinesamPle..,:RighettiPGGianazzaEJChromatr1987;157243眼.seParat一ons,,KeywordsanodePAGEeathodePAGE·NewRaPidSidryTeehniqueUsedinAnodeemse一reenue.midythiqana,PAGEdCthodPAGEGuoYaojunYu人
5、细胞差异表达基因cDNA消减杂交体系的建立关黎伯锉吴吴,,(中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021)摘要为克隆肺腺癌分化相关基因,采用诱导分化与消减杂交相结合的策略,建立了全反式维甲酸.一(RA)诱导前后人肺腺癌细胞系的。DNA消减文库,得到124。DNA消减克隆经加减法杂交差异个、DNA和RNA、。DNA,筛选印迹全序列测定和生物学功能分析分离到3个在人肺腺癌细胞系分化过程中由。DNA.RA激活而特异表达的新的序列这一策略和技术路线适用于分离细胞中呈过量表达或表达抑制基cDNA,因的克隆并具有反映细胞分化过程
6、中基因表达动态变化特征和相对简便适用的特点.,分化相关基因,。DNA克隆,维甲酸,关键词消减杂交肺癌·。。癌的发生是细胞增殖失控和分化障碍的结性DNA探针钓取和筛选目的基因DNA的一果.应用各种方法分离细胞癌变或分化过程中整套方法川,分离到一个使癌细胞分化的基,,呈差异表达的基因一直是肿瘤学研究的前沿因此后我们又建立了更为成熟和有效的在课题.80年代末,本室设计了应用全反式维.“”、、a一n:reCae,国家863高科技发展计划攀登计划博士后墓金及甲酸(lltratinoiidRA)诱导食管癌worldLab.资助项目.、细胞系发生终末
7、分化消减杂交富集RA特异收稿日期:1995一09一18,:1995一12一05修回日期;...199623L4)生物化学与生物物理进展ProgBiochemBioPhys365c-、DNA文库间进行直接系统比较的。DNA(通用引物和线性载体psPORTIDNA)竹,enow[5]aqDNAcDNA消减杂交体系并从诱导分化的人肺腺二种反应体系(Kl酶和T聚,癌细胞中分离到若干个有生物学效应的。DNA合酶)组合作单链DNA回复双链效率比,.克隆现予系统报道较...:162回复双链反应及转化实验在优化选1材料和方法,择的基础上将模板/引物反应
8、液【10川消减.,11癌细胞的分化诱导杂交富集的单链DNA25ng引物(Notl/一、,人肺腺癌细胞系GLC82的培养分化诱Sall双酶切的线性载体pspORTIDNA).导和分化指标检测已另文报道[z]5
