《细胞凋亡与肿瘤》PPT课件

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1、细胞凋亡与肿瘤ApoptosisandTumor第八章长海医院病理科何妙侠学习要求1掌握细胞凋亡的概念及与坏死的区别2掌握细胞凋亡的基因调控机制及其与肿瘤发生的关系3了解细胞凋亡的常用检测方法及其特点前言对细胞死亡的认识NatureReviews,Molecularcellbiology.2001;2:545PCD—Apoptosis1858年，Virchow开始研究细胞死亡1951年,Glucksman提出程序化细胞死亡(ProgrammedCellDeath,PCD)1972年,Kerr提出细胞凋亡（CellApoptosis）Sydn

2、eyBrennerH.RobertHorvitzJohnE.Sulston2002年英国人悉尼·布雷诺尔、美国人罗伯特·霍维茨和英国人约翰·苏尔斯顿，因在细胞凋亡研究工作中取得的杰出成就获诺贝尔生理与医学奖主讲内容细胞凋亡特点细胞凋亡检测发生调控机制细胞凋亡与肿瘤主讲内容细胞凋亡检测发生调控机制细胞凋亡与肿瘤细胞凋亡特点细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别细胞凋亡是机体生长发育、细胞分化和病理状态中细胞自主性死亡的过程(droppingoff,fallingoff)细胞凋亡特点概念意义

3、形态变化基本特征与坏死区别细胞凋亡是高度有序的基因控制的一系列活性酶参与的过程，是多细胞动物生命现象的重要属性细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别细胞凋亡与胚胎发生发展、个体形成、器官的细胞平衡稳定等有密切的关系蝌蚪尾消失发育过程手足成形过程脊椎动物神经系统发育细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别近年来研究表明，肿瘤的发生与细胞凋亡的异常密切相关；细胞凋亡受抑作为细胞增殖紊乱的对应面在肿瘤发生发展和转归方面均有重要作用。细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别该“死”的细胞不死，如自身免疫性疾病，恶性肿瘤等不该死的

4、细胞死了，可能与老年性痴呆、帕金森症等有关细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别细胞凋亡与衰老密切相关细胞凋亡对维持机体的遗传稳定性起着重要的作用老化细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别程序性死亡是功能上的概念，而细胞凋亡是形态学上的概念，不是所有的程序性死亡都表现为凋亡，即不一定存在凋亡的形态学改变细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别凋亡细胞形成多个大小不等有膜包裹的凋亡小体（apoptoticbodies）内含形态保存完好的细胞器和/或浓缩的细胞核碎片，后期被吞噬细胞清除细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特

5、征与坏死区别1受基因调控，死亡过程具有程序性，需要某些基因的启动并合成新的RNA和蛋白质细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别2形态学上表现为细胞皱缩、染色质沿核膜聚集、胞体胞核裂解包裹形成凋亡小体细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别3常单个存在于组织中4周围组织无炎症反应细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别5DNA片段化：琼脂凝胶电泳可见特殊的阶梯状由不同倍数的l80～200bp核苷酸组成DNA梯带图6合成一些大分子物质细胞凋亡特点概念意义形态变化基本特征与坏死区别细胞凋亡与细胞坏死的区别特点细胞凋亡细胞坏死发

6、生原因形态特征受累范围细胞膜细胞体积染色质细胞核细胞器凋亡小体周围组织生化特征调控DNA降解蛋白质合成对ATP要求生理性或病理性多为单个或散在细胞仍保持完整固缩变小聚集在核膜下，呈半月形先固缩后降解仍保持完整有，被临近细胞或巨噬细胞吞噬无炎症反应整个过程受基因调控主动进行有规则，电泳呈梯状DNA谱带有必需病理性多为连续大片组织细胞完整性破坏肿胀增大分散凝集，呈絮状溶解肿胀，内质网明显崩解无，后期细胞破裂溶解，残屑被巨噬细胞吞噬有炎症反应整个过程均被动进行无规则，电泳多呈弥散状无无需主讲内容细胞凋亡特点凋亡调控机制细胞凋亡与肿瘤细胞凋亡检测细

7、胞凋亡检测形态学观察细胞膜完整性DNA断裂凋亡定量检测凋亡定位检测细胞凋亡检测形态学观察细胞膜完整性DNA断裂凋亡定量检测凋亡定位检测1光学显微镜观察优点：光镜技术简单、快速，能短时间内进行大样本分析缺点：样本制备复杂、耗时形态计数常受到主观因素干扰重复性差细胞形态学的检测2电子显微镜观察优点：可显示凋亡细胞的许多形态学特点尤其是膜结构和细胞器的变化主要用于获取细胞凋亡的定性资料缺点：样本制备复杂、耗时细胞形态学的检测细胞凋亡检测形态学观察细胞膜完整性DNA断裂凋亡定量检测凋亡定位检测1台盼兰（Trypanblue）染色法台盼兰为细胞膜非通

8、透性活性染料，坏死细胞着色，而活细胞与早期凋亡细胞不着色意义：方法简单、便捷；常常用于细胞死亡的初步评估细胞膜完整性的检测2丫啶橙（acridineorange,AO）和溴化乙啶