β-羟丁酸的检测方法及临床应用研究

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1、B-轻丁酸的检测方法及临床应用研究B-轻丁酸的检测方法及临床应用研究中图分类号：R446.6文献标识码：A文章编号：1672-3783(2008)-9-0110-02❷【摘要】传统检查酮体均是检查尿酮体的含量，但尿酮体以乙酰乙酸为主。而酮体的主要成分为B-疑丁酸(约占酮体总量的78%^[l]),所以检测B-疑丁酸才是监测酮症酸中毒最敏感的指标。轻丁酸在酮体屮最稳定，采用目前先进的酶联反应方法，结果准确可靠。疑丁酸检测在糖尿病酮症酸中毒诊断、治疗中有重要意义，对糖尿病的早期诊断也有重耍意义。它还做为糖尿病

2、昏迷的诊断及鉴别诊断指标，用作肝移植后肝能量代谢的指标。在代谢性酸中毒过程中，除检查电解质之外，还应检查B-轻丁酸的含量。【关键词】B-径丁酸酮症酸中毒临床应用文献综述B-轻丁酸(P-Hydroxybutyricacid,B_HB)分子式：CH❷3CH0HCH❷2(C00H),结构式：,也叫D-3轻丁酸(D3-H)。它是酗体的主耍成分，约占78%^[l],是脂肪酸在肝脏进行正常分解代谢所生成的特殊中间产物。正常人血液中轻丁酸含量极少，这是人体利用脂肪氧化供能的正常现象。但在某些生理情况(饥饿、禁食)或病

3、理情况下(如糖尿病)，糖的来源或氧化供能障碍，脂动员增强，脂肪酸就成了人体的主要供能物质。脂肪酸分解代谢产生酮体(B-径丁酸含量最多，约占78%,乙酰乙酸约占20%,丙酮约占2%^[2])的量超过肝外组织利用的能力，二者之间失去平衡，血中B-径丁酸浓度就会过高，导致酮血症(acetonemia)和酮尿症(acetonuria)o乙酰乙酸和B-径丁酸都是酸性物质，因此酮体在体内大量堆积还会引起代谢性酸中毒。❷国外报道正常B-轻丁酸水平为〈0.5mmol/L,>1.0ininoL/L为高酮血症,>3.Omm

4、oL/L为酮症酸中毒^[3]。我国血0-轻丁酸正常水平还有待进一步研究，各个文献报道不一。❷1B-拜丁酸的检测方法❷传统检测酮体的方法是在碱性条件下，尿中的乙酰乙酸、内•酮与亚硝基铁氧化钠反应，纶成紫红色的复合物。这种测试方法对乙酰乙酸的敏感度为5~10n）g/dl,对内•酮的敏感度为40^70mg/dl,并且不与0-軽丁酸反应。而B-拜丁酸在酮体中所占比例最尢可以代表酮体的含量。所以美国糖尿病协会认为，现有的尿酮体检测对酮症酸中毒的诊断或监测治疗不可靠，血B-径丁酸的定量检测是取代尿酮体检测的•个可靠

5、有用的方法^[4],它对病情的准确判断及疗效观察起重要作用。❷1962年以前，检测轻丁酸的方法是将轻丁酸氧化成丙酮，再用滴定法、比重法、比色法测定所&成的丙酮，这是半定量的结果，而且丙酮生成量在很大程度上受实验条件的影响，用气相色谱（GC）法定量分析丙酮也仅能测定血清总酮浓度，无特异性〈sup〉[5]〈/sup〉。令现在武汉來福赛斯半物科技有限公司有B梵丁酸检测的酶联免疫法（ELISA法）试剂盒，但这种方法只能定性或半定量。目前大量应用的是酶偶联法检测血清B-疑丁酸，如宁波亚太纶物技术有限责任公司生产的

6、B梵丁酸检测试剂盒，原理是在B-疑丁酸在B-拜丁酸脱氢酶及NAD+的特异性氧化下，生成乙酰乙酸和NADU,NADII和氧化性的INT在黄递酶作用下,生成还原性的INT和NAD〈sup>+〈/sup>,NAD⁺再和B-%丁酸在B-耗丁酸脱氢酶作用下生成乙酰乙酸和NADH,如此循环往复，检测生成的还原性INT,在505nni波长（470〜560nm范围内）测定吸光率的变化。标木中B-拜丁酸含量与吸光率变化成止比，求得耗丁酸的值。该方法灵敏度高、特异性强、线性范围宽（0~4・0mmol/L）、准确度高（回收

7、率98%）,重复性好（cv%=2.3），不受乙酰乙酸、抗坏血酸、廿油三脂（600mg/dl）干扰等特点，适合在全/半自动生化仪上应用。❷2B-轻丁酸测定的临床应用❷2.1B-耗丁酸检测在糖尿病酮症酸中毒的诊断、治疗中的重要意义糖尿病酮症酸中毒是糖尿病最常见的严重急性并发症，是糖尿病患者的主要死亡原因。为了及时、准确判断病情，非常需要一个高灵敏度且特异性强的指标，B-超丁酸的测定满足了上述要求。检测0-轻丁酸可反映体内酮体的情况和酸中毒的真实情况^[6]o当HbAlc>8.9%,FBG14.4mmol/L

8、时,虽尿酮体阴性，有必要同时监测血B-梵丁酸，及吋发现血酮体增高。对于无尿或仅尿B-疑丁酸增高尿试纸不能测出酮体者，更有必要检测血0-梵丁酸，以利及吋诊断，早期控制酮症酸中毒，阻止代谢紊乱恶化〈sup>[7]o❷糖尿病酮症酸中毒好发于1型糖尿病，也可发生于2型糖尿病。2型糖尿病病人由于体内分