大豆粕碱性蛋白酶水解肽及ACE抑制活性的研究-论文.pdf

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1、食品研究与开发2014年5月基础研究FoodResearchAndDevelopment第35卷第9期9DOI：10．3969~．issn．1005-6521．2014．09．003大豆粕碱性蛋白酶水解肽及ACE抑制活性的研究温雪琴。刘岫，黄嫂，赵嘉希。冯欣-，孙建华(1．天津市动植物抗性重点实验室，天津师范大学生命科学学院，天津300387；2．天津科技大学，天津300222)摘要：豆粕是大豆经浸提脱脂后得到的副产品，含有大量的大豆蛋白，其水解物对血管紧张素转移酶(ACE)具有明显的抑制作用和降压效果。结果表明：以食品级豆粕为原料，经碱性蛋白酶水解后得到

2、的ACE抑制肽在pH8．0，温度50℃，豆粕底物浓度40s／L的条件下，酶解3h得到的产物ACE抑制活性最高，为64．21％，对应水解度14．86％；进一步对ACE抑制肽进行高效液相色谱(HPLC)以及超高压液相色谱／四极杆一飞行时间串联质谱联用仪(LC—MS)的分析结果显示：活性物质的主要组分为三肽化合物，分子量为359，分子式为CH30N60，由异亮氨酸、精氨酸和丙氨酸构成；其HPLC检测条件为色谱柱：Zorbax3OOSB—C18，5Ixm，4．6x150ram；检测波长：228nm，流动相：5O％甲醇一超纯水，各含0．1％三氟乙酸；流速：0．7mL

3、／min；柱温：26oC；进样量：10L。关键词：豆粕；碱性蛋白酶；ACE抑制肽；高效液相色谱法HPLCACEInhibitoryActivityonHydrolyticPeptidesfromSoybeanMealHydrolyzedbyAlkalineProteaseWENXue—qin，LIUShen，HUANGTao，ZHAOJia—xi，FENGXin·，SUNJian—hua(1．TianjinKeyLaboratoryofAnimalsandPlantsResistance，CollegeofLifeSciences，TianjinNorma

4、lUniversity，Tianjin，300387，China；2．TianjinUniversityofScienceandTechnology，Tianjin300222，China)Abstract：Soybeanmeal，asabyproductofsoybeanoilmanufacture，containsmainlyofprotein．Peptidesderivedfromtheproteinhadbeenproventobeangiotensin-convertingenzyme(ACE)inhibitoryandantihypenensi

5、veeffect．Food-gradesoybeanmealwashydrolyzedbyalcalaseforthepreparationofACEinhibitorypeptides．TheoptimumenzymolyticconditionsforthepreparationwereatpH8．0，55oCfor3handasubstrateconcentrationof40g／L．TheACEinhibitoryactivityandthedegreeofhydrolysis(DH)wereseparatelyhighupto64．21％and1

6、4．86％．Subsequentdetectionofhighperformanceliquidchromatographic(HPLC)andHighpressureliquidchromatography／quadrupole—timeofflighttandemmassspectrometry(LC—MS)suggestedthattheactivefractionmightbetripeptidewithmolecularweightof359andthemolecularformulaofC15H30N604whichconstituteofIs

7、oleucine，ArginineandAlanine．ItsHPLCconditionsweredeterminedasfollows：column，ZORBAXSB—C18(4．6mmidxl50mm，5um)；detectionwavelength，228nm；mobilephase，methanol—ultra—purewater(50：50，v／v，bothcontaining0．1％(v／v)trifluoroaceticacid；flowrate，0．7mUmin；column；temperature，26℃；samplesize，10L．K

8、eywords：soybeanmeal；alcalase；ACEi