实时荧光定量PCR技术在临床肿瘤检测中的应用-论文.pdf

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1、综述生命科学仪器2014第12卷／6月刊实时荧光定量PCR技术在临床肿瘤检测中的应用郑志芬，戴荣继(北京理工大学生命学院，北京100081)摘要肿瘤一直以来就是人类难以攻克的顽疾，近年来肿瘤疾病的爆发数量呈现上升趋势，如今我国肿瘤病例数约占全世界病例数的55％。实时荧光定量PCR技术(Real—TimePCR)是一种通过检测PcR产物中荧光讯号的强度从而进行定量的技术，这实现了对核酸信息量的分析比较。相对于常规的定性PCR技术，其具有检测范围宽、检测灵敏度高、精密度高、特性强、定量准确、重现性好等优点，现今已被广泛

2、应用于生物学领域及医学领域尤其是肿瘤的早期诊断、分型、分期、预后诊断等。本文概述了实时荧光定量PCR技术的基本原理及其在肿瘤检测中的应用，并探讨了该技术的发展现状和应用前景。关键词实时荧光定量PCR；肝癌；乳腺癌；卵巢癌；肺癌TheApplicationofReal—TimeQuantitativePCRTechniqueintheDetectionofClinicalOncologyZhengZhifen，DaiRongii(SchoolofLifeScience,BeifingInstituteofTechno

3、logy,Beijing100081)Abstract：Recentl~it'salwaysbeenhardtoovercometumors，andnowthenumberofcasesofcancerinChinahasbeenabout55percentofthataroundtheworld．TheaimofReal·timePCRistodetectthePCRproductsthroughmeasuringtheintensityoffluorescencesignal，whichrealizetheam

4、ountofinformationanalysisandcomparisonofnucleicacid．Real—timePCRhasawidescopeofmonitoring，highsensitivity,precision，accuracyandreproducibilityrelativetoconventionalPCRtechniques．Ithasgraduallybecomeanimportantmethodinresearchofmolecularbiology．Sincelastdecades

5、，thistechniquehasbeenwidelyusedinvariousfieldofresearch，especiallytumordiagnosis，classification，stagingandprognosisdiagnosis．Thispaperoutlinesthebasicprinciplesofreal-timePCRtechnology,anddiscussesthedevelopmentandapplicationprospectsofthetechnology．KeyWords：R

6、eal-timeFluorescentQuantitativePCR；Hepatocellularcarcinoma；Breastcancer；Ovariancancer；lungcancer肿瘤是是机体在各种致癌因素作用下，局部组织细胞是1996年美国AppliedBiosystems公司推出，它是通过在PCR在基因水平上失去对其生长的正常调控，从而导致其克隆性反应体系中加入荧光基团，然后利用荧光信号的积累强弱实异常增生而形成的异常病变。学界将其分为良性和恶性两大时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知的DN

7、A模板类。肿瘤作为全球疾病致死的重要元凶之一，如果发现和治进行定量，实现了PCR．~定性到定量的飞跃，为全面快速准疗不及时，有可能导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、确地分析样本中的各类待检物质提供了崭新的技术工具，现发热及脏器功能受损等，其后果极为严重。专家指出：在所在已被广泛应用于实验室及临床肿瘤标志物的检测。有的肿瘤中约1／3的肿瘤可以预防，约1／3的肿瘤可以治愈，约1Rea1．TimePCR技术原理1／3的肿瘤可以延长生命。目前，许多发达国家对于肿瘤的诊断与治疗多在早期，其中肿瘤标志物(如MiR．122等)

8、在肿实时荧光定量PCR是在常规PCR基础上加入荧光标记探瘤的诊断、分型、分期、预后诊断等[2-41过程中发挥着重要的针(如标记荧光素的Taqman探针)或者相应的荧光染料从作用，所以肿瘤的实验室诊断检测意义重大。实时荧光定量而达到定量的目的。荧光标记探针是一寡核苷酸，其两端分PCR技术是在PcR技术的基础上发展起来的核酸定量技术，别标记报告荧光基团和猝灭荧光