延迟相吗啡预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

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1、延迟相吗啡预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用【摘要】目的探讨延迟相吗啡预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法30只健康新西兰雄性大白兔随机分成3组：假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、吗啡预处理延迟相组(M组),每组10只。C组仅行左冠脉套线而不阻断160min；I/R组行左冠状动脉前降支阻断40min，再灌注120min；M组静注吗啡1.0mg/kg，24h后处理同I/R组。各组分别于阻断前20min（T1）、阻断后20min（T2）、阻断后40min（T3）、再灌注1h（T4）、再灌注2h（T5）五个时点取颈内动脉血测定血清中白介素（IL）

2、-10和肿瘤坏死因子（TNF）-α含量。再灌注结束后用伊文思蓝和TTC染色法测心梗面积。结果与C组比，I/R组与M组IL-10和TNF-α含量均升高,具有显著性差异(P<0.05)，但与I/R组比，M组IL-10明显升高(P<0.05),心肌梗死面积减少(P<0.05),TNF-α明显降低(P<0.05)。结论吗啡预处理延迟相可通过调控炎性细胞因子平衡发挥心肌保护作用。【关键词】吗啡延迟相预处心肌保护缺血再灌注损伤细胞因子Abstract:OBJECTIVEToinvestigatetheprotectiveeffectsofmorphi

3、nedelayedpreconditioningonmyocardialischemiareperfusioninjuryinrabbit.METHODSThirtyNealelyassignedtocontrolgroup（Cgroup）,ischemiareperfusiongroup（I/Rgroup）andmorphinegroup（Mgroup）.Mgrouporphine1.0mg/kg,CgroupandI/Rgroupl/kgasuntreatedcontrols.Tinofcoronaryocclusionfolloplesarterialli

4、neat20minbeforeocclusion(T1),20minafterocclusion(T2),40minafterocclusion(T3),1hafterreperfusion(T4)and2hafterreperfusion(T5)fordeterminationofplasmaIL-10levelsandTNF-αlevels.Attheendofthereperfusion,infarctsize(IS)andareaatrisk(AAR)icreperfusioninjurypartlybyregulatingcytokineinrabbi

5、t.Keyiareperfusioninjury;Cytokine吗啡预处理具有类似缺血预处理早期相的心肌保护作用［1-2］已经得到肯定，而吗啡预处理是否具有延迟相心肌保护效应及其作用机制目前少见报道。白介素（IL）-10和肿瘤坏死因子（TNF）-α是心肌缺血再灌注（I/R）病理损伤中发挥重要作用的炎性细胞因子［3-4］，因此，本研究拟通过观察吗啡预处理延迟相在I/R中对IL-10和TNF-α水平的影响，探讨其对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。1材料与方法1.1动物分组健康雄性新西兰大白兔30只，体重2.0～2.5kg（中南大学湘雅医学院动物部提供），随机分成3组

6、：假手术组(C组)、缺血再灌注组（I/R组）、吗啡预处理组(M组),每组10只。C组静注NS1.0ml/kg，24h后仅行左冠脉套线而不阻断160min；I/R组静注NS1.0ml/kg，24h后行左冠状动脉前降支阻断40min，再灌注120min；M组静注吗啡1.0mg/kg，24h后处理同I/R组。所有实验动物按照“湖南省医学类实验动物饲养和管理条例”和“国际实验动物管理条例”进行喂养和处理。1.2仪器设备①DH150呼吸机（浙江医科大学医学仪器厂）；②MD100-2电子分析天平（上海天平仪器厂）；③全自动生化分析仪（美国BECKMAN公司）；④内切式匀浆机

7、（中山大学中山医学院仪器厂）；⑤5415R型高速低温台式离心机（德国Eppendorf公司）；⑥721分光光度仪（上海第三分析仪器厂）；⑦恒温水浴箱（上海仪器厂）；⑧-70℃冰箱（日本松下）；⑨压力换能器（惠普公司）；⑩450nm酶标仪（日本BIO-RADModel550型）。1.3试剂伊文思蓝、氯化硝基四氮唑兰、戊巴比妥钠（均为Sigma公司），IL-10和TNF-α的ELISA试剂盒（深圳晶美生物公司）。1.4I/R模型制备以戊巴比妥钠30mg/kg耳静脉麻醉后固定,气管切开插管,行纯氧机械通气,潮气量15ml/kg,呼吸频率35次/min。连接皮下电极监测

8、标准Ⅱ导联心电图,并在左