辣木叶中多糖含量的测定论文

《辣木叶中多糖含量的测定论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、辣木叶中多糖含量的测定论文陈瑞娇，彭珊珊，王玉珍，梁汉球【摘要】目的测定辣木叶中多糖的含量。方法采用精制辣木叶多糖测得辣木叶多糖对葡萄糖的换算因子后，采用蒽酮-硫酸比色法测定，测定波长为620nm。结果韶关新丰引种栽培辣木中多糖含量为4.85%,供试液在4h内显色稳定,平均回收率为98.72%,RSD＝1.88%(n=4)。结论此测定方法简便可行,可作为辣木叶中多糖的含量测定方法。【关键词】辣木叶；多糖；蒽酮硫酸法Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentsofpolysaccharideinleavesofMoringaoleifera.M

2、ethodsAftertheconversioncoefficientofMoringaoleiferapolysaccharidestoglucoseinedbyanthrone-H2SO4colorimetry.oringaoleiferaplantedinShaoguanCountyofGuangdongProvincepleeasurementethodusedinthispaperissimple.ItcanbeusedfordeterminationofthepolysaccharideinleavesofMoringaoleifera.Keyethod辣木Morin

3、gaoleifera为辣木科辣木属植物，原产于印度北部喜马拉雅区域［1］，全株均可利用.freela公司）；Ultrospec2000紫外/可见分光光度计（AmershamPharmaciaBiotech公司）。2方法2.1辣木叶多糖的提取与精制称取辣木叶粉60g，分别加20，15，10倍蒸馏水(in，4℃，10min），上清液浓缩至一定体积后，Sevage法除蛋白，反复进行8次至无蛋白层，采用H2O2氧化法去色素。然后逆流水透析48h，蒸馏水透析24h，透析液浓缩，上AB-8型大孔吸附树脂柱，以蒸馏水洗脱，洗脱至洗脱液加入95%乙醇无沉淀为止。将洗脱液浓缩至小体积后加入无水乙醇

4、使含醇量达到80%，于4℃冰箱中过夜醇沉，再离心分离（4000r/min，4℃，10min），沉淀依次用无水乙醇、丙酮反复洗涤多次，50℃低温干燥至恒重，即得精制辣木叶多糖。称重，计算得率，备用。2.2标准曲线的绘制［3］2.2.1标准溶液的配制精密称取干燥至恒重的葡萄糖0.1000g，以蒸馏水定容至100ml的容量瓶中，摇匀，精密吸取该溶液10ml于100ml容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀，即得葡萄糖标准液，浓度为0.1mg/ml。分别精密吸取储备液1，2，3，4，5ml置10ml容量瓶中，以蒸馏水稀释定容摇匀，得系列对照品溶液。2.2.2蒽酮-硫酸试液的配制取0.2g蒽酮，加1

5、00ml浓硫酸，置于棕色瓶中，混合摇匀置于冰箱中（现配现用）。2.2.3标准曲线的绘制精密吸取上述系列对照品溶液1ml，置于10ml具塞试管中，冰水浴5min，加入0.2%硫酸蒽酮试液4ml摇匀，立即置于沸水浴加热10min，取出用冷水冷却至室温，室温放置10min左右，于620nm处测定吸收度，另精密吸取蒸馏水1ml，同法操作，作为空白对照。以吸光度（A）为纵坐标，葡萄糖对照品浓度（C）为横坐标，得葡萄糖标准曲线(见图1)，线性回归得回归方程A=5.8114C+0.0024，相关系数r=0.9990。图1葡萄糖标准曲线（略）2.3换算因子的测定精密称取干燥至恒重的精制辣木叶多糖

6、0.0100g,用水溶解于100ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀得精制辣木叶多糖贮备液，精密吸取精制多糖贮备液1ml,.freelg),C为精制辣木叶多糖贮备液中葡萄糖浓度（mg/ml）,D为多糖的稀释倍数。2.4样品中辣木叶多糖的含量测定2.4.1样品溶液的制备准确称取40目辣木叶粉末1.000g，置索氏提取器中，加入90%乙醇回流提取7h,药渣挥尽乙醇，连同滤纸于烧瓶中，加蒸馏水250ml,80℃水浴加热提取1.5h，趁热过滤，残渣用80℃热蒸馏水洗涤3次，洗液并入滤液中，冷却后移入500ml容量瓶定容。2.4.2样品溶液中辣木叶多糖含量测定精密吸取2.4.1所得样品溶

7、液1ml，用蒽酮-硫酸法测吸光度（A）。由回归方程计算供试液中葡萄糖浓度（C），按下式计算样品中辣木叶多糖含量。辣木叶多糖含量（%）=C×D×fg/ml),D为样品溶液的稀释倍数，f为换算因子,l，按照2.2.3项下的方法测定吸光度（A），每隔1h测定1次，连续4h考察其稳定性。2.6加样回收率测定精密吸取同批4份已知含量的辣木叶粉末（过40目筛）各1g，精密加入精制多糖样品5mg，然后按2.4.1项样品液的制备和2.2.3标准曲线项下方法测定吸收度（A），根据2.4.2项中得出