辣木叶中多糖含量的测定

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1、辣木叶中多糖含量的测定作者：陈瑞娇，彭珊珊，王玉珍，梁汉球【摘要】目的测定辣木叶中多糖的含量。方法采用精制辣木叶多糖测得辣木叶多糖对葡萄糖的换算因子后，采用蒽酮-硫酸比色法测定，测定波长为620nm。结果韶关新丰引种栽培辣木中多糖含量为4.85%,供试液在4h内显色稳定,平均回收率为98.72%,RSD＝1.88%(n=4)。结论此测定方法简便可行,可作为辣木叶中多糖的含量测定方法。【关键词】辣木叶；多糖；蒽酮硫酸法　　Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentsofpol

2、ysaccharideinleavesofMoringaolEifera.MethodsAftertheconversioncoefficientofMoringaolEIferapolysaccharidestoglucoseinedbyanthrone-H2SO4colorimetry.oringaoleiferaplantedinShaoguanCountyofGuangdongProvincepleeasurementethodusedinthispaperissimple.Itcanbeusedfor

3、determinationofthepolysaccharideinleavesofMoringaoleifera.　　Keyethod　　辣木Moringaoleifera为辣木科辣木属植物，原产于印度北部喜马拉雅区域［1］，全株均可利用，叶、花、豆荚富含蛋白质、维生素A、维生素B6、维生素C、维生素E、叶酸、泛酸及钙、钾、铁等营养成分，不仅是发达国家素食者的理想食物，还是贫穷地区妇女和儿童的天然营养库。印度传统医学认为，辣木叶有护肝、利尿、消炎、止痛、降压、强心、催乳等功效。常用来预防和治疗糖尿病、高血压病

4、、皮肤病、免疫力弱、贫血、坏血病、肥胖症、关节炎、消化器官肿瘤等疾病［2］。　　植物多糖是由许多相同或不同的单糖以α或β糖苷键所组成的化合物,普遍存在于自然界植物体中,大量研究表明多糖除了有调节免疫功能、抗肿瘤的生物学效应外,还具有降血糖、降血脂和降胆固醇等生理功能。近年来，辣木在我国广东、云南和海南等都有引种栽培，其活性成分研究和产品的开发成为热点。本文用精制辣木叶多糖测得辣木叶多糖对葡萄糖的换算因子，然后将经90%乙醇处理脱杂后的辣木叶用水提取多糖，蒽酮－硫酸法比色测定，该法准确性好、简便可行。为辣木的

5、合理开发和利用提供了科学依据。　　1材料　　1.1原料辣木叶采自韶关市新丰县东林农业开发有限公司种植场。50℃干燥后，粉碎，过40目筛，备用。　　1.2试剂蒽酮、浓硫酸、无水乙醇、丙酮等均为国产分析纯；葡萄糖对照品为分析纯；AB-8型大孔树脂购于天津南开大学。　　1.3仪器HH-a公司）；Ultrospec2000紫外/可见分光光度计（AmershamPharmaciaBiotech公司）。　　2方法　　2.1辣木叶多糖的提取与精制称取辣木叶粉60g，分别加20，15，10倍蒸馏水(in，4℃，10min），上

6、清液浓缩至一定体积后，Sevage法除蛋白，反复进行8次至无蛋白层，采用H2O2氧化法去色素。然后逆流水透析48h，蒸馏水透析24h，透析液浓缩，上AB-8型大孔吸附树脂柱，以蒸馏水洗脱，洗脱至洗脱液加入95%乙醇无沉淀为止。将洗脱液浓缩至小体积后加入无水乙醇使含醇量达到80%，于4℃冰箱中过夜醇沉，再离心分离（4000r/min，4℃，10min），沉淀依次用无水乙醇、丙酮反复洗涤多次，50℃低温干燥至恒重，即得精制辣木叶多糖。称重，计算得率，备用。　　2.2标准曲线的绘制［3］　　2.2.1标准溶液的配制精

7、密称取干燥至恒重的葡萄糖0.1000g，以蒸馏水定容至100ml的容量瓶中，摇匀，精密吸取该溶液10ml于100ml容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀，即得葡萄糖标准液，浓度为0.1mg/ml。分别精密吸取储备液1，2，3，4，5ml置10ml容量瓶中，以蒸馏水稀释定容摇匀，得系列对照品溶液。　　2.2.2蒽酮-硫酸试液的配制取0.2g蒽酮，加100ml浓硫酸，置于棕色瓶中，混合摇匀置于冰箱中（现配现用）。　　2.2.3标准曲线的绘制精密吸取上述系列对照品溶液1ml，置于10ml具塞试管中，冰水浴5min，加入0.2

8、%硫酸蒽酮试液4ml摇匀，立即置于沸水浴加热10min，取出用冷水冷却至室温，室温放置10min左右，于620nm处测定吸收度，另精密吸取蒸馏水1ml，同法操作，作为空白对照。以吸光度（A）为纵坐标，葡萄糖对照品浓度（C）为横坐标，得葡萄糖标准曲线(见图1)，线性回归得回归方程A=5.8114C+0.0024，相关系数r=0.9990。　　图1葡萄糖标准曲线（略）　　2.3换算因子的测