泸州山银花及其提取物高效液相色谱指纹图谱研究论文

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1、泸州山银花及其提取物高效液相色谱指纹图谱研究论文.freel，250mm×4.6mm）色谱柱，以甲醇-0.4％磷酸溶液（38∶62）为流动相，流速为0.8ml·min-1，检测波长为326nm。结果药材、提取物分别有6个和9个共有峰，共有峰的技术参数和相似度符合国家药品监督管理局颁布的《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》和国家药典委员会颁布的《中药注射剂指纹图谱实验研究技术指南（试行）》的有关规定。结论该方法准确，重复性好.freeln（10μm，250mm×4.6mm）ethanol-0.4％phosphoricac

2、idsolution(38∶62)asmobilephase．Theflol·min-1，thedetection.ResultsThemedicinalmaterialsandextractrespectivelyhad6and9monpeaks，theparameterofetentsandChineseMedicineInjectionFingerprintExperimentalTechnicalGuides．ConclusionThemethodissimpleandaccurateinationofFlosLoni

3、ceraeanditsextract.KeyacranthoidesHand.-Mazz.，红腺忍冬LonicerahypoglaucaMiq.或华南忍冬LoniceraconfuseDC.的干燥花蕾或带初开的花，具有抗菌消炎、清热解毒、凉散风热的功效，主要用于治疗痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温热发病等疾病［1］。山银花主要有效成分为绿原酸和异绿原酸。不同来源的山银花，由于受到产地、气候、采收时间及加工方法的影响，致使其有效成分的含量存在着一定的差异，从而影响其临床疗效。四川泸州山银花作为川银花的一个重要来源，其

4、指纹图谱测定尚未见报道。为全面评估本地区山银花及其提取物有效成分的变化及差异，实验采用HPLC法首次建立了泸州四县不同产区采集的山银花及其提取物的指纹图谱，为其质量控制、药材鉴别以及进一步开发利用本地区的山银花提供科学依据。1仪器与试药1.1仪器戴安高效液相色谱仪（P680A四元低压梯度泵，PDA-100二极管阵列检测器，TCC-100柱温箱，Chromeleon色谱工作站）；瑞士Precisa电子天平（XR205SM-DR）；CQX25-06超声波清洗器（上海必能信超声有限公司，功率250azz.的干燥花蕾。山银花提取物，自

5、制。表1山银花样品来源样品批号产地采收时间050701泸州市纳溪县2005-07-01050702泸州市纳溪县2005-07-02050801泸州市叙永县2005-08-01050802泸州市叙永县2005-08-02050803泸州市合江县2005-08-03050804泸州市合江县2005-08-04050805泸州市古蔺县2005-08-05050806泸州市古蔺县2005-08-06050807泸州市古蔺县2005-08-07050808泸州市古蔺县2005-08-082方法与结果2.1色谱条件色谱柱为Lichroso

6、rbC18（10μm，250mm×4.6mm），流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液（38∶62），流速0.8ml·min-1，柱温35℃，检测波长326nm。2.2参照物溶液的制备取经五氧化二磷减压干燥至恒重的绿原酸对照品2.0mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每毫升含绿原酸40μg）。2.3供试品溶液的制备2.3.1山银花供试品溶液取山银花适量，50℃烘约5h，粉碎为细粉（过四号筛）。取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理45min，放

7、冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，精密取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。2.3.2山银花提取物供试品溶液精密称取本品10mg，加50％甲醇溶液40ml，超声处理2min，滤过，用少许50％甲醇溶液洗涤，置50ml量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。2.4方法学考察2.4.1稳定性实验取山银花药材（批号050701）供试品溶液，分别于制备后0，4，8，16，24，36h检测指纹图谱。以绿原酸峰的保留时间和峰面积为参照，各共有峰的相对保留时间、峰面积比值基本一致

8、，其RSD均小于3％。表明供试品溶液在36h内稳定，符合指纹图谱的技术要求［2］。2.4.2精密度实验取山银花药材（批号050701）供试品溶液，连续进样5次，检测指纹图谱。各共有峰的相对保留时间、单峰面积占总峰面积≥10％的色谱峰峰面积比值基本一致，其RSD均小于3％。表明