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时间:2018-09-02
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1、海洛因依赖对大鼠垂体β内啡肽表达的影响作者:梁文妹,李一欣,夏白娟,潘贵书【摘要】目的:探讨海洛因依赖对大鼠垂体远侧部β内啡肽(βendrophin,βEP)表达的影响。方法:成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组;皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于模型建立的第10、17、24、31、38天取垂体组织,应用免疫组织化学SABC法、图像分析法观察大鼠垂体远侧部β内啡肽表达。结果:与正常对照组和盐水对照组比较,海洛因依赖组大鼠垂体远侧部βEP免疫反应明显减弱,平均
2、灰度值增高(P<0.05)。结论:在海洛因依赖期间,垂体远侧部βEP表达减少,提示海洛因依赖使内源性阿片样物质的产生受到抑制。【关键词】海洛因依赖;β内啡肽;垂体;免疫组织化学;大鼠,SpragueDawley [Abstract]Objective:Toinvestigatetheeffectofheroindependenceontheexpressionofβendrophin(βEP)inparsdistalishypophyseosforexploringthepossiblemechani
3、smofthechanges.Methods:FiftyfivemaleadultSDratswererandomlydividedintoanormalcontrolgroup(groupNCG),asalinecontrolgroup(groupSCG)andaheroindependencegroup(groupHDG).Heroindependentratmodelsweresetupbysubcutaneousinjectionofheroinandthehypophysiswereexcised
4、onthe10th,17th,24th,31th,and38thdaysaftermodelsweresetup.ImmunohistochemicalSABCmethod,imagineanalysis,andradioimmunoassaywereusedintheresearch.Results:ComparedwiththoseofgroupsNCG,andSCG,theimmunestainingintensityofβEPcellsingroupHGDwasweaker,andtheaverage
5、grayvaluewassignificantlyhigher(P<0.05).Conclusions:βEPpositivecellsdiminishduringheroindependence,Themorphologicalandfunctionalchangessuggestthatheroininhibittheproductionofendogenousopioid. [Keywords]heroindependence;betaendorphin;pituitarygland;immu
6、nohistochemistry;rats,Spraguedawley对海洛因及阿片类药物依赖形成机制的探索认为,持续性外源性阿片药滥用,使阿片受体细胞处于“超载”状况,通过负反馈机制导致对内源性阿片肽“废用性”减少,内啡肽水平下降是阿片药物依赖和耐受的主要机制之一,因而内啡肽与阿片依赖和耐受的关系日益受到重视[1~4]。β内啡肽(βendrophin,βEP)是上世纪70年代末发现的内源性阿片样物质,主要在下丘脑和垂体内合成和储存[3,4],目前尚未见用形态学方法对海洛因依赖期间β4EP在垂体表达的
7、研究报道。2007-2008年通过建立海洛因依赖大鼠模型,应用免疫组织化学和图像分析法对大鼠海洛因依赖期间垂体βEP阳性细胞进行了形态观察,旨在探讨海洛因依赖对垂体βEP分泌表达的影响,以期为研究毒品依赖的机制提供依据。 1材料和方法 1.1动物分组和海洛因依赖大鼠模型 成年雄性SD大鼠55只,体重180~220g,贵阳医学院实验动物中心提供。按配对原则随机分为正常对照组5只,盐水对照组25只,海洛因依赖组25只。海洛因依赖实验动物按已建立的方法制作[5]:按体重逐日递增皮下注射海洛因药液(纯度为61
8、.48%,由贵州省公安厅提供),首日剂量为3mg/kg,2次/d(上午8时,下午3时);连续9d至成瘾,第9天剂量为27mg/kg。此后每日仅上午8时皮下注射海洛因1次,剂量27mg/kg,维持至取材。盐水对照组大鼠按体重每日注射与依赖组相同剂量的生理盐水为模拟模型;正常对照组不予任何处理,常规喂养。 1.2取材和标本制备 海洛因依赖组及盐水对照组大鼠分别于模型建立的第10、17、
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