京尼平苷对帕金森病模型神经保护作用的研究

《京尼平苷对帕金森病模型神经保护作用的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、京尼平苷对帕金森病模型神经保护作用的研究摘要ＰＤＰ＇帕金森病（，ａｒｋｉｎｓｏｎｄｉｓｅａｓｅｓ）是老年人黑质致密部多巴胺能神经元中枢性进行性神经退化性疾病，其病理生理机制与黑质致密部多种神经系统的改变有关。帕金森病临床症状可出现静止性震颤、肌强直等，主要病理特征是黒质含色素的多巴胺能神经元丢失，残存的神经细胞质中出现嗜酸性包涵体路易）－－，ｌｅｉ）是路易小体的主要组成部分小体（Ｌｅｗｙａ突触核蛋白（ａｓｙｎｕｃｎ，它是一种幼稚的蛋白泛素化包括中枢神经核周体及路易蛋白，与中抠神经系统中蛋－ｌｉ白合体相似，ａｓｙｎｕｃｅｎ的三倍基因体ＳＮＣ

2、Ａ在早期帕金森病合并痴呆中被发现。帕金森病真正的病因尚不明确，但很多研宄显示凋亡引起中枢神经神经元一个重要的机制退化是其中，治疗主要是通过美多巴、多巴胺受体激动剂、胆碱酯酶抑制剂等改善临床症状，并不能阻止多巴胺能神经元细胞凋亡或提高受损的多巴胺能神经元细胞的功能一。此外，长期应用也会导致系列不良反应。因此一，当务之急是能够研究出种能够推迟、干预、甚至是阻止多巴胺神经元细胞退化，治疗帕金森的新药。Ｇｅ一ｎｉ〇ＳｉｄｅＧＰ是，取，京尼平苷（Ｐ，）种重要的环烯醚萜类化合物自中药栀子在中国传统药书中出现，用来治疗肝癌、感染、外伤、脑部疾病等。有报道显

3、示：京尼平苷在ＭＰＴＰ诱导的帕金森大鼠模型中具有中抠神经脑保护作用。它的脑保护作用在其他疾病中也有报道，比如阿尔茨海默病，可能与通过ＲＡＧＥ信号通路有关。ｉ越来越受到认可与重视ｍｉｃｒｏＲＮＡｓｍＲＮＡｓ，它能调控基因表达、调控基（）因事件的发生，选择相应靶点并参与许多病理生理反应过程，机制可能与参与－２－神经细胞凋亡有关。ｍｉＲＮＡ１（ｍｉＲ２Ｉ）可以通过靶向细胞发挥抗凋亡作用并－，ｍＲ２１可通过诱导ＦＡＳ配体来保护神经元免于死亡有报道示：ｉ能通过Ｓ１００／ＲＡＧＥ信号通路发挥其调节作用，基于ＲＡＧＥ信号通路参与了中枢神经系－ｉＲ２１统保护作

4、用，我们研究ｍ在帕金森病中的作用。帕金森病和阿尔茨海默病一一－样ｉＲ２１可作用于溶酶体相，是种中枢神经系统退化性疾病。研宄显示，ｍＩＡＭＰ２Ａ）－关膜蛋白２Ａ（Ｌ，高表达的ｍｉＲ２１可明显降低ＰＤ模型中ＬＡＭＰ２Ａ的ＬＡＭＰ２Ａ可Ａ是－表达，以导致分子伴侣介导的自嗤活动增加，ＣＭ减少ａｓｙｎｕｃｌｅｉｎ蛋白的重要信号通路，但是京尼平苷对帕金森病脑保护作用是否与通过调节ｍＲ－２１的表达有关尚不清楚。ｉ在本研宄中，通过体内体外实验研宄来探讨京尼平苷对帕金森病大鼠模型的的脑保护作用潜在的具体机制，来探讨京尼平苷在帕金森病模型中神经保护作用。

5、第一部分建立稳定的帕金森病细胞模型方法：＋１ＰＰ（ＯｍＭ、ＩｍＭ、２ｍＭ、４ｍＭ，用不同浓度Ｍ）诱导人神经母细胞瘤细适的Ｍ＋胞作用时间持续４８小时；选择合ＰＰ浓度来建立急性ＰＤ细胞模型；２ＣＣｔＫ－－ｉｔ８（ＣＣＫ８），用ｅｌｌｏｕｎｎｉ试剂盒对细胞活性进行检测ｇ；３，针对已建立的ＰＤ细胞模型，用乳酸脱氢酶（ＬａｃｔａｔｅＤｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，ＬＤＨ）试剂盒检测乳酸脱氢酶表达水平。４，用活性氧（Ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）检测试剂盒检测细胞内活性氧含量；结果＋ＭＰＰＳＨ－ＳＹ５Ｙ细胞１，用不同

6、浓度的诱导，细胞的损伤随其浓度的增加活性明显下降；＋２，用浓度ＩｍＭ的ＭＰＰ的来建立急性帕金森病细胞模型；＋３ＩＳＨ－，以浓度为ｍＭ的ＭＰＰ作用于ＳＹ５Ｙ细胞，细胞内ＲＯＳ表达含量明显增加；＋４ＩｍＭＰＰＳＨ－ＳＹ５Ｙ细胞ＬＤＨ释放含量明显增，以浓度为的Ｍ作用于，细胞内？加’＋ＭＰＰ－ＳＹ５Ｙ细胞结论采用浓度为ＩｍＭ的作用于ＳＨ，可极大地对细胞活性产生影响，促进了细胞内活性氧、乳酸脱氢酶的生成，可建立稳定的急性帕金森病细胞模型。ＩＩ？ｍ－２１第二部分探讨京尼平苷对帕金森病细胞模型中ｉＲ、ＬＡＭＰ２Ａａ－ｓｎｕｃｌｅｉｕ表达水

7、平的影响、ｙ摊＋１，ＭＰＰ诱导人神经母细胞瘤细胞建立稳定的帕金森病模型，栀子苷处理用＋５ＹＲＴ－ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂ预处理的人神胞瘤细胞系经母细ＳＨＳＹ丨ｏｔｉｎＭＰＰ，采用ｑｇ－Ｒ－２ＬＡＭＰ２Ａａｓｕｃｌｅｉｎ方法检测ｍｉ１、和ｙｎ的ｍＲＮＡ和蛋白水平。－２ｍ－ｔｏｒＨＳＹ５ＹｉＲ２１ｍｉｍｉｃｍｉＲ２１ｉｎｈｉｂｉＭＰＰ＋预处理的，分别用和转染Ｓ（ＰＤ模型－ＲＮＡ和细胞即细胞），测定ＬＡＭＰ２Ａ、ａｓｙｎｕｃｌｅｉｎ的ｍ蛋白表达