缺血后处理对后肢挤压伤兔全身炎症反应的抑制

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1、缺血后处理对后肢挤压伤兔全身炎症反应的抑制【关键词】挤压伤;肢体;缺血;全身炎症反应综合征　　Abstract：ObjectiveTodiscusstheinhibitionofischemicpostconditioningtosystemicinflammatoryresponsesyndrome(SIRS)inthemodelofhindlimbcrushinjuryinrabbits.MethodsB)[羊抗兔CKMB酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒;ADL,Inc.USA];由尿道无菌导尿5ml，3200rpm/min离心5分钟，取上

2、清液，检测肌红蛋白(Mb)(羊抗兔MbELISA试剂盒;ADL,Inc.USA)。实验结果显示10小时组发生有临床意义的挤压伤，遂采用10小时组方式进行后续动物实验。　　1.3缺血后处理模型(1)交替夹闭-开放挤压伤侧髂总动静脉的后处理模型：在解除兔后肢挤压之前，由腹股沟区作小切口分离右侧髂总静脉，无创血管夹夹闭髂总静脉后解除挤压，60秒后松开血管夹，60秒后再次夹闭，反复3次;(2)交替捆绑松弛挤压伤肢体近端的后处理模型：在解除兔后肢挤压之前，以止血带捆扎右后肢近端(距离挤压重物近侧约2cm，捆绑程度以解除挤压后不能触及兔后肢胫前动脉搏动为准

3、)，解除挤压，60秒后解除捆绑，60秒后再次捆绑，反复3次。　　2检测指标　　各组在挤压前、挤压后2、6、12、24小时由耳中央动脉采血3ml，等量肝素抗凝后3200rpm/min离心20分钟，取上清液，-20℃冰箱保存待测。实验结束后使用ELISA试剂盒[羊抗兔白介素6(IL6)、羊抗兔白介素10(IL10)、羊抗兔肿瘤坏死因子a(TNFα)ELISA试剂盒;ADL,Inc.USA]统一检测血浆IL6、IL10及TNFα水平。各组兔实验结束后继续普通喂养30天，观察饮食、体重及受伤肢体活动情况。　　3统计方法　　计量资料均采用

4、±s表示，采用SPSS16.0版本对血浆IL6、TNFα及IL10值进行t检验。P<0.05为差异具有统计学意义。结果　　1大体情况观察：实验兔饲养1个月，体重未见显著改变。除1只因腹泻死亡外，其余实验兔均存活。受挤压后肢有轻微活动障碍，未见坏死、感染。　　2兔后肢挤压4小时组挤压后血清CKMB及尿液Mb含量没有明显增高(P>0.05);10小时组挤压后血清CKMB及尿液Myo含量明显增高(P<0.05)(见表1)，认为发生了有临床意义的挤压伤。　　3各组血浆IL6水平在挤压解除后2小时即升高，12小时达到峰值，随后

5、开始下降，24小时后仍高于挤压前水平。IPA组与IPB组在挤压解除后2、6、12、24小时血浆IL6水平均低于对照组(P<0.05)。IPA组与IPB组血浆IL6水平在挤压解除后各时相点组间差异无显著性(P>0.05)(见表2)。　　4各组血浆IL10水平在挤压解除后2小时即降低，6小时达到最低值，随后开始上升，24小时后仍低于挤压前水平。IPA组与IPB组在挤压解除后2、6、12小时血浆IL10水平均高于对照组(P<0.05)。IPA组与IPB组血浆IL10水平在挤压解除后各时相点组间差异无显著性(P>0.05

6、)(见表3)。　　5各组血浆TNFα水平在挤压解除后2小时即升高，12小时达到峰值，随后开始下降，24小时后仍高于挤压前水平。IPA组与IPB组在挤压解除后2、6、12、24小时血浆TNFα水平均低于对照组(P<0.05)。IPA组与IPB组血浆TNFα水平在挤压解除后各时相点组间差异无显著性(P>0.05)(见表4)。表1挤压前后血浆CKMB及尿液Mb浓度(±s，ng/ml)与挤压前比较：△P>0.05，*P<0.05表2各组在挤压前后各时相点血浆IL6水平　　TNFα主要是由单核细胞、巨噬细胞和内皮细胞产生

7、的细胞因子，是炎症反应中重要的参与物，主要通过增强中性粒细胞活性，产生活性氧，血小板活化因子等，引起炎症损伤，同时促进炎性细胞因子释放，引起炎症瀑布式放大效应。在缺血再灌注损伤中，TNFα表达增加，并且可能是许多致伤因子的重要启动因子。TNFα对免疫反应、炎症反应具有重要的调节和介导作用，可刺激单核巨噬细胞和其它细胞分泌IL1、lL6等炎性因子。而lL6主要为单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞以及非淋巴细胞类细胞产生的多功能细胞因子，参与机体炎症、免疫调节、造血、代谢等过程。IL6是目前所知的导致全身急性炎症反应的主要的细胞因子[11]。I

8、L10又称细胞因子合成抑制因子(CSIF),主要生物活性是起免疫抑制作用,是一种抑制性细胞因子。IL10能够抑制T细胞、单核巨噬细胞