腺苷及缺血后处理对兔缺血再灌注心肌的保护作用

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1、腺苷及缺血后处理对兔缺血再灌注心肌的保护作用作者：贺晓楠李淑梅王雪梅陈宇【摘要】目的探讨腺苷对缺血再灌注后心肌的保护作用，及其与缺血后处理的关系。方法40只健康大耳白兔，随机分为对照组、拮抗剂组、缺血后处理组、腺苷治疗组4组，每组10只。制备在体兔心肌缺血再灌注模型，检测心肌收缩功能指标，测量心肌梗死范围，观察缺血再灌注即刻应用腺苷及缺血后处理对兔缺血再灌注后心肌的影响。结果腺苷治疗组和缺血后处理组与对照组和拮抗剂组相比，再灌注之后左室内压峰值、左室内压最大上升速率和左室内压最大下降速率的恢复率

2、差异有统计学意义（P＜0.05）；梗死范围均明显低于对照组和腺苷受体拮抗剂组（P<0.01）；心肌酶学LDH和CK含量较对照组和腺苷受体拮抗剂组明显降低（P<0.01）。结论腺苷/腺苷受体途径是缺血后处理的重要途径之一，能够减轻缺血再灌注损伤，保护心肌。【关键词】缺血再灌注损伤；缺血后处理；腺苷　动物试验证实腺苷在心肌缺血再灌注损伤中具有保护作用，可以缩小梗死面积，改善左室功能以及增加冠脉血流〔1，2〕。腺苷的缺血预适应作用已经比较明了，而关于腺苷在缺血后处理〔3〕中的作用国内外却鲜

3、有报道，本研究旨在探讨腺苷对缺血再灌注后心肌的保护作用及其与缺血后处理的关系。　　1材料与方法　　1.1材料　　（1）实验动物：健康白兔40只,雄性,体质量2.0～2.5kg（吉林大学动物中心提供）。（2）药物及主要试剂与仪器：25%乌拉坦（武汉博士德生物工程有限公司）；腺苷(adenosine，沈阳诺康医药有限公司)；8苯基茶碱(8phenyltheophylline,Sigma公司)；红四氮唑(triphenyltetrazoliumchloride,TTC)（上海化学试剂厂）；Evan

4、s蓝（申邦科技贸易有限公司）；乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒，肌酸激酶（CK）试剂盒(上海申能德赛诊断技术有限公司)；DH140型动物呼吸机（成都泰盟医学仪器实验厂）；RM6280多导生理记录和分析处理系统(成都仪器厂)；Olympus生物显微镜（日本）:FA2104电子天平（上海）；AP621G载波放大器（日本）；日立7060全自动生化分析仪(日本)。　　1.2研究方法　　1.2.1动物模型建立　　25%乌拉坦1g/kg(4ml/kg)经耳缘静脉注射麻醉后，背位固定。用肝素钠(1ml/kg

5、)抗凝，分离颈动脉，6F导管经颈动脉插入左心室，联接四导生理记录仪，监测左室内压，心电图导联线与兔四肢相联接入心电放大器，记录标准Ⅱ导联心电图。气管切开，连接动物呼吸机(潮气量21ml，频率50次/min)。除毛，剥离股静脉以备静脉给药。沿胸骨正中做一长约5cm的切口，切开皮肤、皮下组织，暴露胸骨。于胸骨左缘切开肌肉组织，结扎止血，靠近胸骨左缘切断3、4、5肋软骨，用4号丝线结扎肋间血管，以甲状腺拉钩拉开肋软骨，显露胸腔。轻轻提起心包膜，用解剖剪纵行剪开，暴露心脏。用止血钳将左心耳轻轻提起，找到

6、冠状动脉前降支。用持针器持心外科6.0的尼龙缝线，在冠状动脉前降支穿一线，用内径为0.5～0.8mm的硅胶管套线，束紧后在贴紧硅胶管的上端用止血钳夹紧线，造成心肌缺血。心电图出现明显的ST段抬高。每次都由同一人完成这一操作。放松止血钳，去掉硅胶管，抽出结扎线，原来结扎血管再通，缺血再灌注模型建立。　　　　1.2.2实验动物分组　　将40只白兔按体质量编号后，按随机数字表随机分为4组，每组10只。（1）对照组：缺血40min,再灌注120min。（2）拮抗剂组：:缺血前静脉滴注（静滴）非特异性腺苷

7、受体拮抗剂8苯基茶碱30ml(10mg/kg)，持续30min，余下步骤同缺血后处理组。（3）缺血后处理组：缺血40min，再灌注2min，缺血2min，再灌注3min，缺血2min，再灌注5min，缺血2min，再灌注7min，缺血2min，然后再灌注95min。（4）腺苷治疗组：缺血40min，再灌注120min，缺血再灌注即刻静滴腺苷30ml(0.3mg/min),30min内滴完。拮抗剂组缺血前静滴8苯基茶碱30ml，其余组缺血前静滴生理盐水30ml作为平衡对照；腺苷治疗组缺血再灌注

8、即刻静滴腺苷30ml，其余组缺血再灌注即刻静滴生理盐水30ml作为平衡对照。　　1.2.3指标检测　　(1)心肌收缩功能指标记录和测量：通过压力换能器在记录仪上描记心电图，左室内压(LVP)曲线以及左室内压峰值(LVSP)，将LVP电信号输入微分器描记左室dp/dt曲线和正负dp/dtmax。所有图形数据存入RM6280分析处理系统中进行处理。(2)心肌梗死范围的测量：于实验终点将左前降支重新阻塞，从左心室导管内推注2%Evans蓝3～4ml，2min后迅速剪下心脏，分离缺血区(无蓝色)和非缺血