平顶山地区儿童呼吸道病毒的流行病学及病原学调查

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1、平顶山地区儿童呼吸道病毒的流行病学及病原学调查河南省平顶山市中医医院467000摘要:目的探讨和了解平顶山地区儿童呼吸道病毒感染的流行趋势及病原,达到早期诊断,指导治疗的目的。方法采用直接免疫荧光法,利用抗病毒特异性单克隆抗体快速检测3023名儿童呼吸道分泌物中的呼吸道合胞病毒(RSV),流感病毒A型(IFVA),流感病毒B型(IFVB),副流感病毒1(PIV1),副流感病毒2(PIV2),副流感病毒3(PIV3),和腺病毒(ADV)等7种呼吸道常见病毒,并进行统计学分析。结果在3023例呼吸道感染患儿中,检出病

2、毒感染1026例,检出率为33.94%,其中RSV最多,为500例,占阳性率的48.7%,流感病毒A型为179例,占阳性率的17.45%,副流感病毒3(PIV3)共184例,占阳性率的17.90%,腺病毒(ADV)108例,占阳性率的10.50%,流感病毒B型(FIVB)51例,占阳性率的5.00%。结果进一步显示RSV是最常见的的病毒,其次为流感病毒A型、副流感病毒3,腺病毒和流感病毒B型,副流感病毒2,副流感病毒1。RSV高发季节为2013年9月一2014年1月,流感病毒A型为2013年7月一2013年9月,

3、其他呼吸道病毒无明显季节性。结论直接免疫法(DFA)能够提供快而可靠的方法用于呼吸道常见病毒的诊断。关键词:直接免疫荧光法;呼吸道病毒;鼻咽分泌物;医院感染儿童最常见的感染性疾病之一一一急性呼吸道感染,是造成婴幼儿死亡的重要原因,对健康保健系统造成了巨大的经济负担[1,2]。研究资料显示,儿童期急性呼吸道感染大部分是由细菌以外的病原体引起的,尤以病毒最普遍[3]。其中,甲型流感病毒(IFA)、乙型流感病毒(IFB)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)及副流感病毒1、2、3型(PIV1、PIV2、PIV3)

4、等是最常见的病毒性病原体[4,5]。呼吸道病毒的流行因国家、地区、医院、年份、季节和年龄等存在差异,而病原学快速诊断对临床治疗具有指导意义[6]。因此,为了解平顶山地区儿童呼吸道病毒的感染状况,为预防和治疗提供科学依据,指导临床医生合理使用抗生素,提高呼吸道感染治愈率,我院于2013年11月一一2014年11月对3023名急性呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物应用直接免疫荧光技术进行7种呼吸道病毒的检测,现将结果报告如下。1资料与方法1.1一般资料2013年11月——2014年11月收治急性呼吸道感染患儿3023例,年龄

5、分成4组,其中0-6月586例;6月-1岁979例;1-3岁573例;〉3岁885例。诊断标准参照《实用儿科学》。1.2方法1.2.1标本的采集处理采用一次性无菌鼻咽拭子从患儿的鼻孔进入7-8cm到达鼻咽部,采集鼻咽部细胞,加入适量生理盐水置收集管中及吋送实验室进行直接免疫荧光检测。1.2.2直接免疫荧光法检测7项呼吸道病毒将采集到的标本打匀,800g离心5min后去除上清保留沉淀,用PBS洗涤沉淀,去除黏液等杂质。最后将沉淀溶解在0.3-0.5ml的PBS溶液中,吹打成悬液,在玻片的7个孔中加样(25μl

6、/孔),干燥后,预冷丙酮固定lOmin,再滴加FITC标记过的7种呼吸道病毒单克隆抗体(D3UltraDFA,DiagnosticHybrids),37°C孵育20min,再用洗漆液洗漆,最后封片,荧光显微镜观察。1.2.3阳性结果判断病毒抗原与其对应的抗体结合后,形成抗原抗体复合物,荧光显微镜下,呼吸道病毒抗原阳性细胞呈苹果绿荧光,阴性细胞无荧光,被伊文思蓝染成红色背景(见图1)。在200倍视野下,〉2个阳性细胞,该标本即判为阳性。1.2.4统计学方法应用SPSS16.0软件进行统计分析。计数资料采用C2检验,

7、计量资料采用t检验,P<0.05认为差异有统计学意义。图1.呼吸道合胞病毒荧光显微镜下图像2.结果2.1病毒检出结果送检标本共3023份,阳性者1026份,总阳性率33.94%,其中以呼吸道合胞病毒感染最多,见表1。2.2不同年龄组儿童呼吸道病毒的感染情况不同年龄呼吸道病毒感染率不同,0-6月龄的占39.42%(231/586),6月-1岁的占33.50%(328/979),3岁以上的占23.84%(211/885),发病高峰在1-3岁组,达44.68%(256/573)。经C2检验,除0-6月组与1-3岁组感染

8、率无显著性差异(P〉0.05),其余各组间均呈显著性差异(PC0.05)(见表2)。3.讨论急性呼吸道感染严重危害儿童健康,经世界卫生组织统计每年约200万名五岁以下的儿童死于肺炎[7,8】。0前研究表明,儿童急性呼吸道感染最主要的致病因素是病毒。由于苏感染力强、传播速度快,极易造成局部流行,甚至是爆发性流行,因此,需要各地区、国家进行重点监测[9】。然而,儿童急性呼吸道

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