复合预处理对大鼠肠缺血再灌注的保护作用

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1、复合预处理对大鼠肠缺血再灌注的保护作用【关键词】小肠　　Protectiveeffectofpoundpreconditioningonsmallintestinefromischemiareperfusioninjuryinrats　　【Abstract】AIM:Toinvestigatetheprotectiveeffectofpoundprecondition(ischemicpreconditioningunderthemildhypothermiaMHIP)onsmallintestinefromi

2、schemiareperfusion(I/R)injuryinratsanditsmechanism.METHODS:Thirtytizedinto4groups(8ineachgroup):Shamoperatedgroup(sham),ischemiareperfusion(I/R)group,ischemicpreconditioning(IP)group,mildhypothermiaischemicpreconditioning(MHIP)group.Thealondialdehyde(MDA),a

3、ndactivitiesofsuperoxidedismutase(SOD)andtotalantioxidase(TAX)inblooducosatissueayberelatedtoenhancingoxidationresistanceofintestine,inhibitinglipidperoxidation,upregulatingtheproteinexpressionofbcl2genesanddoyocyteapoptosis.　　【Keyall;reperfusion;mildhypoth

4、ermia;ischemicpreconditioning;geneexpression　　【摘要】目的：探讨复合预处理（亚低温下缺血预处理）对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用及机制.方法：将32只大鼠随机分为4组（每组8只）：假手术对照组（Sham）、缺血再灌注组（I/R）、缺血预处理组（IP）、亚低温预处理组（MHIP）.比较各组小肠组织湿干质量比、Ca2+Mg2+ATP酶含量及血清乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）活力、总抗氧化（TAX）能力的变化，并观察各组肠组织超微结构

5、及Bcl2,Bax蛋白表达.结果:肠缺血再灌注后小肠湿干质量比值增高,LDH,MDA含量明显上升（P<0.01），Ca2+Mg2+ATP酶、SOD活性及TAX能力明显下降，小肠组织Bcl2和Bax蛋白表达吸光度（A）明显增高（P<0.01）；IP组与I/R组比较及MHIP组与IP组比较小肠湿干质量比值减小，LDH，MDA含量明显下降，Ca2+Mg2+ATP酶、SOD活性及TAX能力明显上升，小肠组织Bcl2蛋白表达吸光度（A）值增高，Bax蛋白表达吸光度（A）值降低（P<0.01,P<

6、0.05），Bcl2/Bax吸光度（A）比值明显增高.结论：亚低温缺血预处理通过增加肠组织自身抗氧化能力、抑制脂质过氧化、上调Bcl2基因的蛋白表达与下调Bax基因的蛋白表达以抑制肠组织细胞凋亡的发生等机制对抗肠缺血再灌注损伤.　　【关键词】小肠；再灌注；亚低温；缺血预处理；基因表达　　0引言　　亚低温对脑和肝缺血再灌注损伤有保护作用［1,2］，但亚低温缺血预处理对小肠缺血再灌注损伤作用的研究尚未见报道.我们在缺血预处理和亚低温研究的基础上，应用大鼠小肠缺血再灌注损伤模型，观察亚低温缺血预处理对肠缺血再灌注损

7、伤的保护作用，并探讨其可能的机制.　　1材料和方法　　1．1材料　　1.1.1动物选用A）而不夹闭，共2h结束实验后取材；②缺血灌注组（Ischemiareperfusion,I/R）：夹闭SMA60min后松夹60min再取材；③缺血预处理组（Ischemicpreconditioning,IP）：夹闭SMA5min和松夹5min作为预处理，余同I/R组；④亚低温预处理组（mildhypothermiaischemicpreconditioning,MHIP）：在实施缺血预处理前在小肠周围充填碎冰造成小肠亚

8、低温（33~35℃）［3］，余同IP组.　　1.1.2药品及试剂乳酸脱氢酶（LDH）、Ca2+Mg2+ATP酶含量、总抗氧化（TAX）能力、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）活性试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，Bcl2,Bax免疫试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供，其他试剂均为国产分析纯.结果测定按试剂盒提供的说明书严格进行操作.　　1.2方法　　1.2.1模型制备100mL