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时间:2018-11-11
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1、蒙药阿给生药及炭药中总黄酮的含量测定作者:张婉,唐丽,谢坤,崔箭【摘要】目的对蒙药阿给生药及炭药中的黄酮类成分进行初步的定性、定量分析。方法采用显色反应进行定性检识,并以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量。结果阿给生药及炭药均含有黄酮类成分,但两者所含主要黄酮类成分的类型有所差异;生药与炭药的总黄酮含量分别为4.78%,2.26%,生药总黄酮含量约为炭药的2倍。结论炮制对阿给药材中黄酮类成分类型及总黄酮含量有一定的影响。分光光度法简便灵敏,重现性良好,适用于阿给总黄酮的含量测定。【关键词】蒙药阿给;总黄酮;定性检识;含量测定 Abstrac
2、t:ObjectiveToidentifyanddeterminethetotalflavonoidsinrapleseasuredthroughUVspectroscopyusingrutinascontrol.ResultsThemainspeciesofflavonoidsinraeeffectonthespeciesandthecontentoftotalflavonoidsinAgei.Spectrophotometryethodforcontentdeterminationoftotalflavoniods. Keyination 阿给为
3、菊科蒿属植物冷蒿ArtemisiafrigidaETTLERTOLEDO公司);旋转蒸发仪(德国Heidolph公司);6202型高速粉碎机(北京环亚天元机械技术有限公司);索氏提取器(北京博美玻璃仪器厂)。 1.2材料蒙药阿给(冷蒿)购自内蒙古药材采购供应公司,内蒙古自治区中蒙医医院蒙药药房鉴定,炭药由北京普生霖药业有限公司按 2.3总黄酮的含量测定[6]以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定阿给生药及炭药中的总黄酮含量。 2.3.1芦丁标准储备液的配制精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁标准品10mg,置于100ml容量瓶中,加适量70%乙醇溶
4、解并定容至刻度,摇匀,得0.1mg·ml-1的芦丁标准储备液。 2.3.2最大吸收波长的选择分别量取2.0ml芦丁标准储备液和样品液置于3支10ml试管中,加入3ml70%乙醇,摇匀后加入5%亚硝酸钠0.3ml,摇匀,放置6min,加入10%硝酸铝溶液0.3ml,摇匀,放置6min,再加入4%氢氧化钠溶液1ml,摇匀,放置15min后,以相应的试剂做空白对照,在分光光度计上进行全波长扫描,比较标准品和样品的扫描曲线,确定以510nm为最大吸收波长来进行阿给总黄酮含量的测定。 2.3.3标准曲线的绘制精密量取芦丁标准储备液0.0,1.0,2.0,3.0
5、,4.0,5.0ml,分别置于10ml试管中,加70%乙醇补足5ml,按“2.3.1”项所述的方法进行显色,以溶剂为空白对照,在紫外可见分光光度计上于510nm波长处测定吸光度。结果见表2。 表2芦丁标准品浓度与吸光度(略) 以吸光度(A)为纵坐标,浓度(C)为横坐标绘制标准曲线,用最小二乘法做直线回归,得回归方程A=10.942C+0.0019,R2=0.9996。结果表明芦丁在0.015~0.076mg·ml-1浓度范围内具有良好的线性关系见图1。 2.3.4精密度实验取同一供试品溶液按上述方法在波长510nm处,以试剂空白为参比,重复测定5次
6、,计算得RSD=0.40%(n=5),结果表明仪器的精密度良好。 2.3.5稳定性实验对同一供试品溶液,每间隔15min测定吸光度,考察其在1h之内的稳定性,计算得RSD=2.51%。结果显示,随着显色时间的延长,所测得的总黄酮含量呈缓慢下降趋势,但在1h内基本保持稳定,可满足测定要求。 2.3.6重复性实验取同种阿给药材粗粉,按“2.2”项下方法平行制备5份样液,进行含量测定,计算得RSD=1.40%(n=5)。结果表明,本实验方法的重复性较好。 图1芦丁标准曲线(略) 2.3.7加标回收实验精密量取适量阿给提取液(生药2ml,炭药3ml)各4
7、份,分别置于10ml试管中,按下表精密加入一定体积的0.1mg·ml-1的芦丁标准储备液,再加70%乙醇补足体积5ml,照前述方法进行含量测定,代入标准曲线回归方程计算回收率,结果见表3。 2.3.8样品总黄酮含量的测定精密量取适量体积(V)的阿给提取液(生药2ml,炭药3ml)各5份,分别置于10ml试管中,按标准曲线测定方法进行含量测定,根据回归方程及回收率计算出药材中总黄酮的含量,结果见表4。 表3回收率实验结果(略) 回收率P(%)=测得量-原有量加入量×100% 表4阿给生药及炭药中的总黄酮含量(略) 3小结 本实验首次对蒙药阿给炒
8、炭前后的黄酮类成分类型及总黄酮含量进行了分析。 显色反应结果表明,阿给生药及炭
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