两套袖法大鼠原位肝移植模型的建立及改进

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1、两套袖法大鼠原位肝移植模型的建立及改进作者：李军，窦科峰，赵青川，张洪涛，孔亚林，张福琴【关键词】原位肝移植Establishmentandimprovementofratorthotopiclivertransplantationmodelprovethemodelofratorthotopiclivertransplantationandstudytheratesofsuccessandlongtermsurvivalofthemodel.METHODS:Onthebasisoftada,provedthetechni

2、quesofseparating,perfusingdonorliver,theshearingandanastomosisofthesuperiorandinferiorcavalvEins,thebileductanastomosis,andsoon.RESULTS:Operationhadbeenperformed80timesprovedtechniquesand92timesprovedtechniquesreducedtheaveragetimeofdonoroperationandthatofrecipien

3、tsto（24.3±3.2）minand(56.4±5.0)min（P<0.05）,elevated48hoursurvivalrateto91.3%(73/80)and1provedtechniqueshaveraisedthequalityofdonorliverandthesuccessrateofthemodel.　　【Keyodel;improvement　　【摘要】目的:改进两套袖法大鼠原位肝移植模型，研究其手术成功率和远期存活率.方法：在Kamada两套袖法基础上,着重对供肝分离、灌注、肝上下腔静脉切取

4、，肝上下腔静脉吻合，胆管吻合等手术方法作了进一步改进.结果：改进方法共施行手术80次，与以往92次传统手术法相比，供体手术时间（24.3±3.2）min和受体手术时间(56.4±5.0)min缩短（P<0.05），48h存活率91.3%(73/80)和1m,肝下下腔静脉袖套内径2.5～3.0mm，胆管插管由硬膜外麻醉管制成，长0.4～0.5mm.双极电凝器,上海手术器械厂显微外科手术器械包,乙醚麻醉筒，清洁手术.　　1.2方法　　1.2.1供体手术术前肌注阿托品0.03～0.05mg，乙醚吸入麻醉，仰卧位,背部垫1m

5、L注射器作为腰桥.取上腹部大十字切口，上至剑突，下至耻骨联合，左右至腋后线.进腹后,暂不分离肝脏.将肠管推向左下腹，暴露第一肝门及肝下下腔静脉.将尾状叶推向左侧，显露右肾上腺，电灼切断肾上腺静脉.分离右肾静脉与肝下下腔静脉.结扎切断右肾蒂，下腔静脉游离完成.游离胆管，尽量保留周围组织，以防术后缺血坏死，在肝管汇合部远端0.5cm处剪开胆总管前壁,向近端插入支撑管,丝线结扎并保留.插管前可用显微镊轻扩胆管，注意插入不要过深，以防堵塞盘状乳头叶胆管.于下腔静脉远端注射2mL肝素生理盐水(25U/mL)全身肝素化.结扎切断幽门静

6、脉，在门脉左侧结扎肝固有动脉.阻断肠系膜上静脉远端，近端插入自制灌注管，立即用0～4℃肝素生理盐水(5U/mL)经输液器匀速灌注.剪开下腔静脉远端及肝上下腔静脉胸段，使灌注液顺利流出，同时向肝脏淋撒0～4℃生理盐水降温.待肝脏变成土黄色后，剪断肝下下腔静脉、门静脉，残端尽量留长.由下向上剪断肝周韧带，直至肝上下腔静脉.靠肝脏缝扎膈肌静脉，略微分离肝上下腔静脉后方组织，轻轻下牵肝脏，“一剪法”剪下肝上下腔静脉，使其不带隔肌组织.　　1.2.2供肝修整供肝置于0～4℃生理盐水中.选取口径合适套管，管柄统一置于血管前壁用以定位，

7、将门静脉牵入套管中，血管夹固定套管和血管，夹柄部固定.外翻血管套在袖套上，丝线固定.操作中注意避免血管扭转.同法处理肝下下腔静脉.肝上下腔静脉无需修整,在其左右侧角各缝吊80缝线,备吻合时用.修整完毕后置4℃冰箱中保存.　　1.2.3受体手术术前处置同供体.取上腹部弧形切口，电灼切开肌肉.剪断肝周韧带,缝扎左膈静脉，电灼离断肝食管间血管及右肾上腺静脉,适当分离肝下下腔静脉至右肾静脉汇入处.于胆管汇合处上方切断肝管，将左肝管于汇入处斜行剪除.切断肝动脉.分离门脉至幽门静脉处.阻断肝下下腔、门静脉.于门脉左右分支处穿刺,推平衡

8、盐2mL驱血,至肝脏变为土黄色.用自制血管夹连带部分膈肌阻断肝上下腔静脉.下牵肝脏,剪断肝上下腔,保留足够长度残端.剪断门脉时保留左右分支，肝下下腔残端保留部分肝组织.取出肝脏，撤除麻醉，原位放入供肝,肝前、后放湿沙布.将肝上下腔两侧吊线与受体静脉左右两端内进外出缝合打结，然后从左至右连续外翻缝合肝上下