实验性脊髓空洞前状态神经元凋亡及nf论文

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1、实验性脊髓空洞前状态神经元凋亡及NF论文孙国柱，张庆俊，张更申，李建峰【关键词】性脊髓EffectofNFκB,Bcl2andBaxonneuronalapoptosisinexperimentalpresyrinxstate【Abstract】AIM:ToinvestigateneuronalapoptosisinexperimentalpresyrinxstateandtheregulatoryroleandmechanismofNFκB,Bcl2andBaxinrabbits.METHODS:Theexperimentalsyringomyeliamodelso

2、frabbitseasuredmunohistochemistryin1,3,7,14and21dafteroperationrespectively.RESULTS:paredthe1stdayafteroperation,reacheditspeakat3rdday,remainedtheretill7thday,andreturnedtoanormallevelat14thdayapproximately.TheIκBexpressionshoetimepoints.TheBcl2andBaxexpressionsincreasedfromthe1stday,r

3、eacheditspeakat7thday,.freelainedtheretill14thday,andthenbegantodrop.CONCLUSION:Inpresyrinxstateofexperimentalsyringomyelia,theincreasingexpressionofNFκBmainlyupregulatesitstargetgeneBax,thusinducingneuronalapoptosistoinvolveinnervousfunctioninjury.【Keyyelia;TUNEL;immunohistochemistry;a

4、poptosis【摘要】目的：研究实验性脊髓空洞前状态神经元凋亡及NFκB，Bcl2，Bax的调控作用.方法：选用新西兰白兔，用TUNEL法和免疫组化技术检测脊髓空洞前状态脊髓神经元凋亡情况和NFκB，IκB.freelyelia，SM）是一种发病隐匿、缓慢进展的脊髓退行性病变，发病机制尚不完全清楚.由于缺乏有效治疗方法，故预后不佳.我们先前的研究［1］证实，SM在形成前2ingen公司)；鼠抗IκBαmAb、鼠抗Bcl2mAb、鼠抗BaxmAb(SantaCruz公司).SABC免疫组化试剂盒、细胞凋亡检测试剂盒(武汉博士德公司产品).高岭土(分析纯，上海试剂四厂)

5、.HPIAS1000彩色病理图文分析系统（同济医科大千屏影像公司）.1.2方法1.2.1动物分组和模型制作将动物随机分为3组，高岭土组40只，生理盐水组和假手术组各8只.动物在氯胺酮（30mg/kg）耳缘静脉麻醉下，经皮枕大池穿刺，缓慢抽出无色透明脑脊液0.6mL后，高岭土组动物注入37℃，250g/L高岭土悬浊液0.6mL；生理盐水组动物注入37℃生理盐水0.6mL；假手术组动物仅行枕大池假穿刺.1.2.2术后神经功能判定按改良的Tarlov评分法对动物进行行为学检查评分.0分:肢体完全瘫痪；1分：有肢体运动，但不能站立；2分：可站立，但不能行走、负重；3分：可行走

6、、负重，但步态不稳；4分：正常.1.2.3标本的制作和采集生理盐水组和假手术组在术后、高岭土组在第1，3，7，14，21日各随机选取动物8只，在氯胺酮过度麻醉下，40g/L多聚甲醛经心脏灌注,经后正中切口，咬除脊突和椎弓根，取出上颈髓置入相同固定液中后固定24h，常规脱水、透明、石蜡包埋、4μm切片并裱于经10g/L多聚赖氨酸处理的清洁载玻片，用于HE染色和免疫组织化学染色观察.1.2.4免疫组化染色NFκB，IκB，Bcl2和Bax的表达按免疫组织化学常规步骤进行.细胞内有棕黄色粗颗粒分布或棕黄色细腻颗粒分布者为阳性反应细胞.采用病理图文分析系统，每张切片任取5个视

7、野，高倍镜下记数总细胞数和阳性细胞数.1.2.5TUNEL法检测细胞凋亡按试剂盒说明书操作.阳性判定：细胞核中有棕黄色颗粒者为TUNEL阳性细胞，即凋亡细胞.统计学处理：各组实验数据以x±s表示，采用SPSS11.0专用统计程序进行方差分析.检验结果以P0.05为差异有统计学意义.2结果2.1术后动物神经功能高岭土组动物于术后第7日出现神经功能障碍，包括厌食、精神萎靡、四肢无力，甚至瘫痪,并随时间的延长逐渐加重，与生理盐水组和假手术组对比有显著差异(P0.05，表1).表1各组动物的Tarlov评分及脊髓空洞前状态中上颈髓组织中(略)2.2光镜观察高