大蒜素对胃癌细胞bgc-823增殖影响的研究

《大蒜素对胃癌细胞bgc-823增殖影响的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、大蒜素对胃癌细胞BGC?823增殖影响的研究张智龙，苏丽娜,荣慧，陈琳琳，侯毅鞠【摘要】目的研究大蒜素对胃癌BGC?823细胞增殖的影响。方法通过细胞培养技术、瑞氏染色、MTT实验方法，观察大蒜素对胃癌细胞生长的影响。结果BGC?823细胞在大蒜素的作用48h后，出现体积变小、核固缩等形态学改变。大蒜素对胃癌细胞的生长曲线有明显的抑制作用，其抑制作用与大蒜素的浓度和时间呈正相关。结论大蒜素对体外培养的BGC?823细胞具有明显的增殖抑制作用。【关键词】大蒜素;胃癌;BGC?823细胞　Abstract:ObjectiveTostudytheeffectsofallic

2、inonproliferationofgastriccancerBGC?823cells.MethodsCellgroethodofcellculturetechnology,auspiciousdyeandMTTtest.ResultsBGC?823cellsshoorphologicchangesinducedbyallicinafter48h,includingcellshrinkage,Karyopyknosisandsoon.Cellgroeincreases.ConclusionAllicininhibitedthegrou;g/mL、10μg/mL

3、、15μg/mL、20μg/mL、25μg/mL、30μg/mL、40μg/mL，其中对照孔中只加入相同体积含10%小牛血清的1640完全培养液，分别于培养24h、48h、72h和96h时在倒置显微镜下观察细胞形态并照相。　　1.3瑞氏染色观察　　取对数生长期细胞,同样将细胞均匀分成7组，分别接种于灭菌处理后放有盖玻片的细胞培养皿中,加入大蒜素使终浓度分别为5μg/mL、10μg/mL、15μg/mL、20μg/mL、25μg/mL、30μg/mL、40μg/mL，培养24h、48h、72h和96

4、h。终止培养后取出盖玻片，自然干燥，滴加瑞氏染液染色1min，再滴加等量的PBS(磷酸盐缓冲液)，轻轻晃动玻片，混匀，静置5min;水洗、吸干、镜检观察并照相。　　1.4MTT法检测　　取对数生长期细胞，以106个/mL细胞接种到96孔板，每孔体积200μL。按照药物作用浓度设置7个实验组，使大蒜素终浓度为5μg/mL、10μg/mL、15μg/mL、20μg/mL、25μg/mL、30μg/mL、40μg/mL。每个浓度组分别设置5个实验复孔，并设置1个调零孔。分别于培养24h、48h、72h加20μLMTT溶液

5、,继续培养4h后加二甲基亚砜，微量振荡器振荡10min，在490nm酶联免疫检测仪检测,记录OD值，并求出生长抑制率(IR),IR(%)=(1-用药组平均OD值/对照组平均OD值)100%,以时间为横轴，IR为纵轴绘制细胞生长的抑制曲线,并计算出药物的半数抑制浓度(IC50)[4]。　　2结果　　2.1大蒜素对BGC?823细胞生长状态的影响　　倒置显微镜观察经不同浓度大蒜素作用后48h细胞的形态，与对照组对比，细胞间隙变大，细胞浆中出现颗粒样变化，细胞形态改变，体积变小、变圆，有的呈悬浮状态，见图1。对照组15mg/L大蒜素组图1BGC?823细胞生长状态(40)　

6、　2.2瑞氏染色　　瑞氏染色法染色后，经大蒜素作用48h的细胞出现退行性变，细胞体积变小、变圆，胞质浓染、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、深染等特征,见图2。对照组15mg/L大蒜素组图2BGC?823细胞生长状态(40)　　2.3MTT检测　　MTT检测结果显示：大蒜素对胃癌细胞具有明显的抑制增殖作用，并且随着药物浓度的增加和作用时间的延长，抑制作用越强、抑制率越大，并求得药物半数抑制浓度(IC50)为15mg/L。见图3。图3不同浓度大蒜素对BGC?823细胞的抑制作用　　3讨论　　胃癌是常见的消化道肿瘤，在我国发病率较高，临床上主要采用外科切除、药物化疗和放射治疗

7、等方法治疗胃癌，手术切除如不彻底,易复发，而药物化疗和放射治疗手段除了杀伤肿瘤细胞以外，对宿主的免疫系统也造成了伤害，且治疗效果不甚理想。而大蒜作为日常生活中常见的食物，不仅仅价格低廉，而且其主要成分大蒜素，含有一些特殊的具有生物活性的物质，如含硫化合物(蒜氨酸、蒜油、蒜素、阿霍烯等)、微量元素(高含量的锗、硒、磷、镁等)、超氧化物歧化酶(SOD)等，使大蒜具有广泛的药效，尤其具有良好的抗菌消炎和抗肿瘤的作用[5]，先前已有资料证明大蒜素对肝、胃、结肠、宫颈、乳房等多种肿瘤均有抗癌活性,作用广泛[6]。　　本实验观察到胃癌细胞经不同浓度的大蒜素作用后