dha联合葫芦素b对人胃癌bgc-823细胞增殖及凋亡的影响

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1、授予单位代码10089..~学号或申请号20123086HebeiMedicalUniversity硕士学位论文专业学位DHA联合葫芦素B对人胃癌BGC-823细胞增殖及凋亡的影响研究生：周元龙导师：康建省教授专业：外科学二级学院：第二医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公幵和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学

2、，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名：导师签章二级学院领导盖章：>>/(年七月•曰河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人己经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：导师签章年今月y日目录中文摘要……………………………………………………………………1英文摘要……………………………………………………………………3研究论

3、文DHA联合葫芦素B对人胃癌BGC-823细胞增殖及凋亡的影响前言……………………………………………………………………6材料与方法……………………………………………………………7结果…………………………………………………………………14附图…………………………………………………………………16讨论…………………………………………………………………28结论…………………………………………………………………32参考文献……………………………………………………………33综述DHA应用于胃癌靶向治疗的研究与进展………………………36

4、致谢………………………………………………………………………51个人简历…………………………………………………………………52中文摘要DHA联合葫芦素B对人胃癌BGC-823细胞增殖及凋亡的影响摘要目的：研究二十二碳六烯酸(docosahexaenoicacid，DHA)联合葫芦素B（cucurbitacinB）在体外对抗人胃癌BGC-823细胞增殖及凋亡的影响作用。方法：1实验分组：RPMI1640培养基配置4组用无水乙醇溶解后的DHA,终浓度分别为10、20、30、40μg/mL，对照组加入无水乙醇（＜0.5%，V/V)；

5、用RPMI1640培养基配置5组用DMSO溶解够得葫芦素B，终浓度为0.01、0.1、1、10、100μg/mL，空白组为等体积培养基，对照组为加入DMSO（＜2%，V/V）。得出各药物的半对数抑制浓度（IC50）值，选取均小于单种药物IC50的DHA（20μg/mL）联合葫芦素B（10μg/mL）作用于人胃癌BGC-823细胞，对照组加入无水乙醇（＜0.5%，V/V)和DMSO（＜2%，V/V）；2利用NADH酶染色显微镜下观察人胃癌BGC-823细胞在分别加入DHA（20μg/mL）、葫芦素B（10μg/mL）及DHA（

6、20μg/mL）联合葫芦素B（10μg/mL）后，细胞形态学上的变化；3利用吉姆萨染色显微镜下观察人胃癌BGC-823细胞在分别加入DHA（20μg/mL）、葫芦素B（10μg/mL）及DHA（20μg/mL）联合葫芦素B（10μg/mL）后，细胞形态学上的变化；4采用四氮唑蓝比色法（MTT法），在限定时间，且不同浓度的前提下，研究DHA（10、20、30、40μg/mL）组、葫芦素B（0.01、0.1、1、10、100μg/mL）组、DHA（20μg/mL）联合葫芦素B（0.01、0.1、1、10、100μg/mL）不同浓

7、度加药组对胃癌BGC-823细胞增值的影响；5通过流式细胞检测法分别检测DHA（20μg/mL）加药组、葫芦素B（10μg/mL）加药组、DHA（20μg/mL）联合葫芦素B（10μg/mL）加药组细胞周期及凋亡的情况；1中文摘要6所有数据用mean±SD表示，采用SPSS16统计软件包行单因素方差分析，在某些实验中用双因素方差分析、Pearson相关分析，P＜0.05表示有统计学意义。结果：1NADH酶染色法在显微镜下明显可见相同时间下，随着药物浓度的增加，DHA（20μg/mL）加药组、葫芦素B（10μg/mL）加药组细

8、胞凋亡现象愈加明显，且DHA（20μg/mL）联合不同浓度葫芦素B组用药组凋亡比DHA（20μg/mL）组、葫芦素B（10μg/mL）组更为彻底。2吉姆萨染色法在显微镜下明显可见相同时间下，随着药物浓度的增加，DHA（20μg/mL）加药组、葫芦素B（10μg/mL）加药组细胞凋亡现象愈加