梅毒血清试验临床意义及血清固定分析

梅毒血清试验临床意义及血清固定分析

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1、梅毒血清试验的临床意义 及血清固定分析四川省人民医院皮肤病性病研究所林昭春梅毒血清试验的分类梅毒血清试验根据所用抗原不同分为两类非梅毒螺旋体抗原血清试验性病研究实验室试验(VDRL)不需加热血清反应素试验(USR)快速血浆反应环状卡片试验(RPR)及TRUST试验梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)梅毒螺旋体颗粒凝集法(TPPA)荧光密螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS)梅毒血清试验的适应症非梅毒螺旋体抗原血清试验适应于常规检查及大量人群筛选定量试验可监视疾病活动情况和观察治疗效果,是否复发与再感染鉴别早期梅毒与晚期潜伏梅毒,先天

2、梅毒与被动反应素血症脑脊液作VDRL试验,有助于神经梅毒的诊断梅毒螺旋体抗原血清试验该试验特异性强,敏感性高,一般用来作证实试验,不能作为疗效观察和随访指征梅毒血清试验的原理当机体感染TP后,经过一定潜伏期,在血清中产生一定数量的抗类脂质抗体(非特异性的反应素)和抗密螺旋体抗体(特异性免疫球蛋白),主要是IgG抗体可以用各种免疫学的方法来检测反应素或抗体,协助梅毒的诊断性病研究实验室试验 (VDRL)VDRL试验所用抗原是从牛心中提取心磷脂加上卵磷脂和胆固醇梅毒螺旋体在破坏组织的过程中,体内释放一种抗原性心磷脂它刺激机体产生反应素,这种反应素与牛心中

3、提取的心磷脂在体外有抗原-抗体反应待检血清先灭活,试验时应用已知阳性血清对照性病研究实验室试验 (VDRL)定性结果判定:"-"阴性,仅见微小颗粒,液体浑浊"+"弱阳性,肉眼见小的块状物或者用放大镜见到块状物,液体浑浊“+++”阳性,肉眼见大的或中等大的块状物VDRL玻片定量试验:将待测血清用生理盐水在小试管中作6个稀释度,原倍血清、1:2、1:4、1:8、1:16、1:32,每个稀释度与0.5ml血清加于玻片圆圈中,按定性的方法测定和判断结果。不需加热血清反应素试验 (USR)该试验用改良的VDRL抗原稀释后离心沉淀,于沉淀中加入EDTA(二胺四乙

4、酸二钠)氯化胆碱可起化学“灭活”作用,所以血清不必灭活抗原不必每天配制,在4~8℃冰箱中保存6个月定性结果判定“-”阴性,颗粒细小,分布均匀,无块状物“±”可疑,颗粒分布均匀,或细小的粗糙物“+”弱阳性,显微镜下见块状物,分布均匀“++”阳性,肉眼可见小块状物,在显微镜下见较大块状物“+++”强阳性,肉眼可见大的或较大块状物,溶液清亮定量试验同VDRL的定量法快速血浆反应环状卡片试验 (RPR)原理与USR试验基本相同其优点是RPR抗原中加入了活性碳颗粒,试验在特制的白色纸卡上进行容易判断结果,肉眼即可观察,不需显微镜,血浆也可进行检测快速血浆反应环

5、状卡片试验 (RPR)定性结果判定"-"阴性,无颗粒凝集,或仅见粗糙炭颗粒聚集中央"+"弱阳性,可见散在小的黑色凝集块“++、+++”阳性,可见中等或大的黑色凝集块,溶液清亮定量试验方法同VDRL定量法如果效价高于1:32,应测定1:64,1:128,1:256稀释度,以最高稀释度出现的阳性作为效价非梅毒螺旋体抗原血清试验的 注意事项试验应在23~29℃室温进行,气温过低或过高都影响其结果。出现弱阳性或可疑者,应重做。试剂及待检血清从冰箱取出必须在23~29℃处放置30min后,再做试验。定性试验阳性都必须做定量试验,阳性者需了解抗体效价的高低,以便

6、监视疾病活动情况和观察疗效。定量试验还可排除"前带现象"。梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA)以梅毒螺旋体为抗原的间接血球凝集试验抗原为经超声波处理Nichol梅毒螺旋体的提取物为可溶性抗原,再致敏经醛化和鞣酸处理的绵羊红细胞,称为致敏血球待检血清用吸附剂处理,可除去非特异性螺旋体抗体对照用非致敏血球及阳性血清梅毒螺旋体颗粒凝集法 (TPPA)日本富士公司取代TPHA的新产品可用于梅毒的任何阶段,检测抗梅毒螺旋体的被动颗粒凝集试验它能检测血清样品中的梅毒螺旋体抗体其特点操作简单,血清血浆均可检测,特异性强,敏感性高梅毒螺旋体颗粒凝集法 (TPPA)结

7、果判定:"-"阴性,颗粒集中在中央呈钮扣状,外缘圆而平滑,标本血清与致敏颗粒无反应。"±"可疑,颗粒聚集成致密的环状,外缘圆而平滑,标本血清与未致敏颗粒反应阴性,与致敏颗粒反应介于与阴性之间,此时,需作定量试验或用FTA-ABS法。"+"阳性,颗粒形成大的环,外缘粗糙,外周有凝集现象,或凝集颗粒均匀地覆盖孔底。荧光密螺旋体抗体吸附试验 (FTA-ABS)该试验在国外被认为是权威性的方法用间接免疫荧光技术检测血清中的抗梅毒螺旋体IgG抗体此试验敏感性高,特异性强荧光密螺旋体抗体吸附试验 (FTA-ABS)结果判定:"-"阴性,见微弱或无荧光的螺旋体。"

8、+"可疑,见较弱的荧光螺旋体。"++、+++"阳性,见强的或中等度的荧光螺旋体。梅毒螺旋体抗原血清试验的 注

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