吸光光度法(2)

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1、第十二章吸光光度法§12-1物质对光的选择性吸收§12-2光吸收基本定律§12-3吸光光度法的仪器应用§12-4吸光光度分析条件的选择§12-5吸光光度法的应用思考题1吸光光度法原理：吸光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法分类：比色法——是以比较有色溶液颜色的深浅（透过光）来确定其中有色物质含量的分析方法分光光度法——是通过待测溶液对特定波长光的吸收而确定物质含量的分析方法。2吸光光度法3吸光光度法主要用于微量组分的测定，其特点如下灵敏度高。测定试样中质量分数为10-2～10-5的微量组分，甚至可以测定

2、质量分数为10-6～10-8的痕量组分。准确度较高。一般比色法的相对误差为5%～10%，分光光度法为2%～5%操作简单、分析速度快。应用广泛。几乎所有的无机离子和许多有机化合物都可以4§12-1物质对光的选择性吸收一、光的基本性质光是一种电磁波，具有波粒二象性光是由光子流组成，光子的能量：E=h=hc/（Planck常数：h=6.626×10-34J×S)光的波长越短（频率越高），其能量越大表12–1电磁波谱表5可见光区：400-750nm紫外光区：近紫外区200-400nm远紫外区10-200nm（真空紫外区）近红

3、外光0.75～2.5μm中红外光2.5～5.0μm远红外光5.0～1000μm400nm750nm6红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围2.51000m,主要用于有机化合物结构鉴定。紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200400nm（近紫外区），可用于结构鉴定和定量分析。7可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400750nm，主要用于有色物质的定量分析。吸光光度法的特点：（1）灵敏度高；（2）准确度高；（3）操作简便快速；（4）应用广泛。8二、物质对光的选择性吸收1、物质的颜色是由于物质对不同

4、波长的光具有选择性吸收而产生的。物质对光产生选择性吸收的原因分子、原子或离子具有不连续的量子化能级。只有照射光中光子的能量hν与被照射物质粒子的基态和激发态能量之差△E相等的那部分色光才会被物质或其溶液所吸收。不同的物质微粒由于结构不同而具有不同的量子化能级，其能级差也各不相同，因此物质对光的吸收具有选择性。9M+hM*M+热M+荧光或磷光基态激发态E1（△E）E2E=E2-E1=h吸收光发射光102、物质的颜色与光吸收物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性吸收而产生的。白光(太阳光)：由各种单色光组成的复

5、合光单色光：单波长的光(由具有相同能量的光子组成)互补色光：如果把适当颜色的两种单色光按一定的强度比例混合，也可以得到白光，这两种单色光就叫做互补色光。如绿光和紫光互补，蓝光和黄光互补。11互补色光：如绿光和紫光互补，蓝光和黄光互补。青蓝（绿蓝）青（蓝绿）蓝橙紫黄绿红12表12-2*物质的颜色与吸收光颜色的互补关系武汉大学（四版）*13光的互补：蓝黄溶液的颜色由透射光的波长所决定。透射光与吸收光为互补色光。如CuSO4溶液因吸收了白光中的黄色光而呈现蓝色14用不同波长的单色光照射，测吸光度—吸收曲线与最大吸收波长

6、max；153、光吸收曲线用不同波长的单色光照射某一物质测定吸光度，以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制曲线，描述物质对不同波长光的吸收能力。吸收曲线1617吸收曲线的讨论：（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax（2）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似、λmax不变。（3）对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。18（4）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度A有差异，在λmax处吸光度A

7、的差异最大。在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。此特性可作为物质定量分析的依据。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。191.朗伯—比耳定律当一束平行单色光通过任何均匀、非散射的固体、液体或气体介质时，一部分被吸收，一部分透过介质，一部分被器皿的表面反射。如果入射光的强度为I0，吸收光的强度为Ia，透过光的强度为It，反射光的强度为Ir，则它们之间的关系为：§12-2光吸收的基本定律I0=Ia+It+Ir20ItIrIabcI0=Ia+It+Ir21Ir基本不变，其影响可以用同样材质和厚度的比

8、色皿相互抵消，故上式可简化为：I0=Ia+It透光率T——透过光的强度It与入射光的强度I0之比为透光率（也称透光度、透射比）22吸光度A—物质对光的吸收程度（吸收光的强度）。吸光度A与透光率T的关系为：或：T=10-A溶液的透光率越小，吸光度越大，表明溶液对光的吸收越强。23例12–1某溶液的透光率为40.2%，其