苦瓜提取物的抑菌活性研究

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1、本科生毕业论文（二零一三届）题目:苦瓜提取物的抑菌活性研究系别：制药与食品科学学院专业：药物制剂班级：2009级7班作者姓名：金銹梅学号：200907050209指导教师：董艳辉职称：高级实验师学历：研究生论文成绩：2012年12月摘要1关键词1Abstract1Keywords刖吞1仪器与材料21.1试验材料及主要试剂21丄1试验原料21.1.2药品21.1.3供试翩申21.1.4培养基21.2试验仪器22试验方法32.1苦瓜提取物的制备32.2菌种活化及菌悬液的制备32.3滤纸片法测定抑菌活性32.4苦瓜提取物最低抑菌浓度（MIC）的

2、测定43结果与分析43.1不同苦瓜提取物的抑菌活性43.2苦瓜乙醇提取物的最低抑菌浓度（MIC）44结论5致谢5参考文献5苦瓜提取物的抑菌活性研究制药与食品科学学院药物制剂专业2009级金堺梅摘要：目的通过测定苦瓜汁、苦瓜70%乙醇提取物和苦瓜蛋白对供试菌种金黄色葡萄球菌和大肠杆菌抑菌作用的大小，确定苦瓜提取物较为有效的提取工艺，再进一步测定苦瓜提取物的最低抑菌浓度。方法通过对照法，采用滤纸片法测定抑菌作用。结果表明：苦瓜汁,乙醇提取物和苦瓜蛋白对细菌均有不同的抑制作用，其中乙醇提取物的抑菌效果较为明显,并且测定出其对金黄色葡萄球菌及大肠

3、杆菌的最低抑菌浓度（MIC）分别为12.5mg/mL、25mg/mLo关键词：苦瓜；提収物；抑菌活性：最低抑菌浓度刖B苦瓜为葫芦科苦瓜属植物苦瓜的果实，其营养价值极其丰富，并且药用价值也很高，是人们日常食用的蔬菜，种植范围广，价格低廉，食用安全。苦瓜性味苦寒，具有清热解毒、滋养强壮、降低血糖等功效，深受人们欢迎。近年来大量研究证明，苦瓜中含有多种活性成分，具有治疗糖尿病，抗病毒，抗菌，抗肿瘤,抗艾滋病，抗白血病，抗氧化，抗蠕虫，抗湿疹，抗溃疡，堕胎，通经，抗疟、牛皮癣〔宀等药理作用。因此，很多国内外学者越来越重视对苦瓜的研究开发。随着社会

4、经济的快速发展，人民的生活水平不断提高，大众对生命健康的关注以及对食品卫生的安全口趋重视，同样对防腐剂Z类的食品添加剂的要求也越来越高，不但注重其安全性，更加追求添加剂的营养化和功能化。将苦瓜的抑菌作用应用于天然防腐剂中，既可以提升苦瓜的价值，乂可以为食品工业发掘新原料。本文探究苦瓜提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性及最低抑菌浓度，旨在为苦瓜的深加工及新型安全天然食品防腐剂的开发提供依据。1仪器与材料1.1试验材料及主要试剂1.1.1原料：新鲜苦瓜：购于通化市蔬菜市场；1.1.2主要试剂：乙醇、苯甲酸钠、硼酸、固体硫酸镀均为分析纯

5、。1.1.3供试菌种：金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)＞大肠杆菌(Escherichiacoli)以上菌种均由顺勃牛物工程技术(北京)有限公司牛产；1.1.4培养基：牛肉膏蛋白月东由上海汇合生物科技有限公司，按说明书配制。1.2试验仪器：BL600A电子天平：常熟双杰测试仪器厂；SENCOw201恒温水浴锅：上海中生科技有限公司；SHB・1II台式高速离心机：湖南星科科学仪器有限公司；GZX-9070ME数显鼓风干燥箱：上海博迅实业有限公司；LX-C35L自动电热压力蒸汽灭菌器：合肥华泰医疗设备有限公司；SW-C

6、J-1F超净工作台:苏州安泰空气技术有限公司；LRH-250A生化培养箱：广东省医疗器械厂；2试验方法2.1苦瓜提取物的制备苦瓜汁的制备：新鲜苦瓜，切碎之后捣碎，四层纱布过滤，得苦瓜汁，备用。乙醇提取物的制备：新鲜苦瓜一清洗一去瓢一切片-＞50°C烘干一粉碎-＞过40目筛，得苦瓜粉。苦瓜粉按1:20的固液比，以70%乙醇溶液60°C水浴浸提2h,过滤，将滤渣用同样的方法浸提两次，合并滤液，加热浓缩得乙醇浸提物。苦瓜蛋白的制备：苦瓜籽50°C烘干，粉碎后过40目筛。取适量苦瓜籽粉，加10倍体积的50mmol/L硼酸缓冲液(PH=8.2),4

7、°C缓慢搅拌浸提12h,5000rpm离心20min,取上清液加固体硫酸镀至80%饱和度，4°C缓慢搅拌3h,离心，收集沉淀物干燥即得苦瓜蛋白，蛋白含量为72.3%o2.2菌种活化及菌悬液的制备在超净工作台上将供试菌种接入斜而培养基，将培养基置于37°C恒温培养箱屮培养24ho然后用接种环挑取上述活化好的菌种，用无菌生理盐水配制成(1()6〜IO?)cfu/mL的菌悬液，备用。2.3滤纸片法测定抑菌活性用打孔器将滤纸制成直径为6mm的小圆滤纸片，干热灭菌后备用。将配制好的牛肉膏蛋口腺培养基移入250mL三角瓶中，121°C高压蒸汽灭菌30

8、min,在超净工作台上冷却至50-60°C，向每个培养皿屮加入约15mL的培养基，凝固后用无菌移液器加入0.5mL的菌悬液，用涂布器将菌液均匀的涂在培养基上。将滤纸片放入不同样品液及无菌水和2