石蜡切片方法,木质材料软化方法,石蜡切片制作方法,kd202

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划石蜡切片方法,木质材料软化方法,石蜡切片制作方法,kd202　　微树芯石蜡切片前处理:固定及软化　　将取下的微树芯或者大块材料迅速放入新配置的FAA溶液中进行固定。固定时间需要加长至1周左右，固定时间不能太久，否则FAA中的乙酸和甲醛可能会破坏细胞结构。　　将固定后的微树芯或者用凿子采取的材料块切成包含3–5年木质部、形成层、韧皮部区域的小块，放入乙醇甘油(70%乙醇:甘油=1:1)中进行软化，软化时间应大于1周。通过软化，可使材料变软，浸蜡后容易切片。但甘油软化会使甘油

2、长期存在于材料中而影响染色效果，因此相应增加染色时间,在番红溶液中的染色时间增加至3h。　　微树芯石蜡切片制作　　脱水　　在低浓度乙醇溶液(30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、85%乙醇)中的脱水时间以–h为宜,而在高浓度乙醇溶液(95%乙醇、100%乙醇I、100%乙醇II)脱水时间应尽量控制在1h左右。　　透明目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　乙醇与石蜡互不相溶,用二甲苯作

3、为媒介将脱水后组织中的乙醇置换出来,称为透明。微树芯透明最适的时间为乙醇:二甲苯=1:1、二甲苯I、二甲苯II各1h。　　浸蜡　　用石蜡取代透明剂,二甲苯浸入组织在切片时起支持作用称为浸蜡。先用二甲苯:石蜡=1:1的混合液进行浸蜡,时间延长至48–72h。　　浸蜡时温度应该控制在37℃左右,温度过高可能会使组织变脆而不易切片。然后在高于石蜡熔点2℃下换成用纯石蜡浸蜡3次。浸蜡完成后即可包埋。　　切片　　将包埋好的蜡块用刀片修成规整的正方体或长方体,以少许热蜡液将其底部迅速贴附于小木块上,夹在轮转式切片机的蜡块钳内,使蜡块切面与切片刀刃平行,旋紧。调整切片厚度为8–12μm,切出10

4、–25cm蜡带后,用毛笔轻托轻放在光面纸或者玻璃板上。　　切片过程中,如果材料是长形的,若横着切,由于受力面积较大,容易变成碎片或者只有石蜡而没有组织。此时应该沿着材料竖着切,这样可以减少受力面积而收到较好的效果。有时切下来的蜡片会卷在刀片上,这可能是静电作用的原因,只需在蜡块上沾点水即可。　　粘片目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　用粘附剂(采用蛋白甘油或明胶贴片剂)将展平的蜡

5、片牢附于载玻片上,以免二者在以后的脱蜡、水化及染色等步骤中滑脱开。首先在洁净的载玻片上涂抹薄层粘片剂,直接滴两滴蒸馏水于载玻片上,再把蜡片放于水滴上,略加温使蜡片铺展,展片时温度不能过高,以免使石蜡融化。最后用滤纸吸除多余水分,将载玻片放入37℃温箱　　中干燥24h即可进行染色。　　染色-脱水-透明　　为了区分韧皮部、形成层区域、木质部区域等,采用复染的方法进行染色。由于韧皮部、形成层及伸长细胞区域细胞壁较薄,没有木质化,染液容易着色和洗脱,而木质化区域的细胞壁较厚,着色的染液不容易洗涤出来,因此,可用复染的方法来区分厚度不同的细胞壁及木质化的程度。常用的一些染料组合有亚甲基蓝-天

6、青A(细胞壁木质化区域染成蓝绿色,细胞壁非木质化区域则染成紫红色)和番红-固绿(木质化区域细胞染成红色或者紫红色,非木质化细胞壁用固绿替换,染成蓝绿色)。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　以番红固绿染色法(l%番红-水溶液,%固绿-95%乙醇溶液)为例:首先用二甲苯脱蜡12min,然后依次经无水乙醇、不同浓度的乙醇、蒸馏水进行逐级复水后放入番红溶液中染色3–5h,进而经不同浓度

7、的乙醇溶液逐级脱水至85%乙醇后,在固绿中染色30s。木质化细胞被染成紫红色,非木质化区域(伸长细胞、形成层和韧皮部)被染成蓝绿色,区别较清楚。此外,材质较硬的阔叶树红桦,油脂含量较高的油松,以及青海云杉、青杄等石蜡切片，可以看出细胞形态正常,各部分对比明显。染色后经二甲苯透明,用中性树胶或加拿大树胶进行封片,烤片后保存。　　染色时间的控制尤为重要。在用番红染色3–5h后,由于全部细胞被番红染成红色,需不同浓度的乙醇溶液洗掉薄壁细胞区域的番红,然后在固绿中进行复染。因