环磷酸腺苷高产菌落研究-毕业论文

《环磷酸腺苷高产菌落研究-毕业论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、2014届本科毕业论文论文题目：环磷酸腺苷高产菌落研究学生姓名：——所在院（系）：生物工程系所学专业：生物工程专业导师姓名：——完成时间：2014年3月15日环磷酸腺苷高产菌落研究（——学院生物工程系104班）摘要微生物发酵法合成环磷酸腺苷（cAMP）高产菌种是关键，本文采用高效液相色谱法测定不同菌落发酵液中环磷酸腺苷的含量筛选出cAMP高产菌落。通过活化不同节杆菌，挑选单菌落，分别编号1至6后移种进行发酵，发酵结束后用高效液相色谱法测定发酵液中cAMP含量,结果6号菌落发酵液中cAMP含量最高为2.8957mg/ml，其次为4号菌落，环磷酸腺苷含量为2.5057mg/

2、ml。本实验初步筛选出环磷酸腺苷高产菌落为6号菌落；同时也发现在实验中无菌操作是否规范、能否避免染菌是我们实验成败的关键。关键字：环磷酸腺苷，节杆菌，发酵，高效液相THEEFFECTOF：UsinghighperformanceliquidCyclicadenosinephosphatehigh-yieldstrainsscreened——(——School,DepartmentofBiologicalEngineering，Class104)ABSTRACTMicroorganismfermentationwassynthesizedadenosinemonophos

3、phate(cAMP)highyieldstrainisthekey,thispaperadoptshighperformanceliquidchromatography(HPLC)methodfordeterminingthecontentofcentraladenosinephosphateofdifferentcoloniesfermentedliquidscreenedcAMPhigh-yieldcolony.Throughactivationofdifferentsection,selectsinglecolony,number1to6backkindoffe

4、rment,respectivelyafterfermentationcAMPcontentinthefermentedliquidbyhighperformanceliquidchromatography(HPLC)method,theresults6coloniescAMPcontentinthefermentedliquidupto2.8957mg/ml,followedbycolony,4cyclicadenosinephosphatecontentis2.5057mg/ml.Thisexperimentpreliminaryscreeningcyclicade

5、nosinephosphatehigh-yieldcolonyfor6colonies;Alsofoundintheexperimentofsterileoperationwhetherstandard,whethertoavoiddyebacteriumiskeyofsuccessorfailureinourexperiment.Keywords:Cyclicadenosinemonophosphate,Arthrobacterium,BiologicalFermentation，HPLC目录1引言：11.1环腺苷酸的物理化学性质和生物学功能11.2环磷酸腺苷生产机制

6、22.材料与方法32.1实验材料32.2实验仪器32.3实验方法32.3.1培养基32.3.2移种与接种32.4高效液相检测环磷酸腺苷含量42.4.1色谱测定条件42.4.2样品处理42.4.3标样的配制42.4.4标样的线性关系52.4.5标准曲线绘制53.实验结果与分析53.1实验结果53.1.1摇瓶发酵各参数测定53.1.2高效液相测定发酵液中环磷酸腺苷的含量63.2结果分析及讨论124结论13参考文献14致谢:1516环磷酸腺苷高产菌落研究李成喜（新科学院生物工程系104班）1引言：环磷酸腺苷是核苷酸类药物,在临床上,主要用于治疗心功能不全、心绞痛和心肌梗死,尤

7、其适用于对洋地黄类强心药中毒或不敏感的患者[1]。同时cAMP是机体代谢的重要调节因子，其广泛参与酶活性调节、基因表达以及细胞增殖与分化等，因而备受关注。上个世纪五、六十年代起,国外就陆续有文献报道环磷酸腺苷的合成。但传统的cAMP以化学合成为主，生产成本高，而且含有致癌致畸的化学残留物，不适于临床应用[2]。现在也有从大枣中提取，原料质量要求高，处理过程繁杂且cAMP回收率较低。本研究利用节杆菌通过微生物发酵生成cAMP，具有很大发展前景[3]。环腺苷酸(CyclicAdenosineMonophosphate,cAMP)是由E.W.S