动物生化课件

《动物生化课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、生物化学是研究生物分子，特别是生物大分子相互作用、相互影响已表现生命活动现象原理的科学。•电泳（1923）:生物大分子的分离、分析•超离心（1925）：蛋白质、细胞亚器官的分离；分子量的确定•同位素标记（1934）：物质代谢途径、生物大分子结构测定•层析（1944）：生物大分子的分离纯化•X■光衍射：生物大分子结构测定蛋白质是由20种L-a-氨基酸按一定的序列通过酰胺键（肽键）缩合而成的，具较稳定构象并具一定生物功能的生物大分子。蛋白质的功能1、催化作用儿乎所有的酶都是蛋白质2、生物体的结构成分膜蛋白3、运输血红蛋白在血中输送

2、氧肌红蛋白在肌肉中输送氧膜蛋白起运输作用4、运动动物的肌肉收缩、细菌的鞭毛运动。5、防御保护抗体6、激素胰岛素、胰高血糖素、生长激素、甲状腺素、肾上腺皮质激素、脑啡肽等7、接受和传递信息的受体：受体蛋白8、控制细胞生长、分化：生长因子、调节蛋白9、毒蛋白：植物、微生物、昆虫、动物所分泌10、许多蛋白在凝血作用、通透作用、营养作用、记忆活动等方面起重要作用。一、蛋白质的元素组成：C、H、O、N（16%）、S；Fe、Zn>Cu、P、Mo等。用凯氏定氮法可测定蛋白质含量：蛋白质含量（g）=蛋白质含氮量X6.25二、蛋白质基本结构单位

3、氨基酸（一）蛋白质的水解1、完全水解：用浓酸、碱或酶将蛋白质完全水解为氨基酸。酸水解：无消旋作用，产物为L■氨基酸。碱水解：多数氨基酸被破坏，有消旋现彖。酶水解：需要多种酶同时作用。2、部分水解：一般用酶或稀酸在较温和条件下，将蛋白质分子切断，产物为分子大小不等的肽段和氨基酸。蛋白酶：（内切酶、外切酶和二肽酶）胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶等。•氨基酸（aminoacid,简写aa）：蛋白质的基本组成单位，是含氨基的竣酸。•天然蛋白质多由20种常见氨基酸组成。（一）氨基酸的结构通式由通式可得出：1）组成蛋白质的aa都是—氨基酸（

4、除脯氨酸a—亚氨基酸外）；2）不同aa仅R链不同；3）除廿氨酸外，其余竝的a-碳原子均为不对称碳原子。残基：在肽链中每个氨基酸都脱去一个水分子，脱水后的残余部分叫残基（residue）,因此蛋白质肽链中的氨基酸统统是残基形式。•构型：由于分子屮共价键的改变导致的基团或原子在空间的不同排列而引起的光学活性立体结构称立体构型。•立体构型：氨基在左为L-型；氨基在右为D-型•天然pr.中的aa绝大多数为L■型；•细菌细胞壁中含D■丙氨酸和D・谷氨酸按人体是否可合成来分必需氨基酸：机体不能自身合成，必须由食物供给的氨基酸。赖、色、苏、

5、颔、甲硫、亮、异亮、苯丙半必需氨基酸：人体可合成，但幼儿期合成速度不能满足需要。组*、精*非必需氨基酸：机体可自身合成的氨基酸。（三）稀有氨基酸胱氨酸：2个半胱氨酸脱氢形成疑脯氨酸；存在胶原蛋白屮（四）非蛋白质氨基酸•L-瓜氨酸、L-鸟氨酸：参加尿素循环；•B■丙氨酸：维生素前体；•Y■氨基丁酸：神经递质；•D-谷氨酸、D■丙氨酸：细菌细胞壁的组分（五）氨基酸的重要理化性质1、一般物理性质□无色品体，熔点较高（200〜300°C）,水中溶解度差异大（取决于侧链），不溶于有机溶剂（沉淀剂）。□味感：无味、甜、苦、鲜、酸味。2、两

6、性解离与等电点（两性性质）（1）氨基酸为两性电解质两性离子：带有数量相等的正负两种电荷的离子。（2）aa解离方式収决于所处环境的pH（3）等电点（isoelectricpoint,缩写为pl）在电场中，阳离子向负极移动；阴离子向阳极移动；调整pH,使俎净电荷为零时,aa既不向阳极也不向阴极移动。概念：规定竝净电荷为零吋的pH为该aa的等电点.带有数量相等的正负两种电荷的分子叫两性离子总结a、各种aa的pl不同；b、同一pH下，各种aa所带电荷不同；pHpI：aa-用离子交换、电泳将aa分开c、处于pl时，

7、aa溶解度最小，易沉淀；可分离aa。3、紫外吸收性质：•只有含苯环氨基酸有紫外吸收能力，因其具有含共觇双键的苯环。•酪氨酸（Tyr）入max：270nm•苯丙氨酸（Phe）入max：259nm•色氨酸（Trp）入max：279nm所以，测样品280nm处的光吸收值，可知溶液中蛋白质浓度。此法快速简便。4、氨基酸的分离分析（1）分配层析法：一种溶质在两种互不相溶或几乎不相溶的溶剂中分配时，在一定温度下平衡后,溶质在两相溶剂中的浓度比值与其溶解度比值相等,此比值称分配系数。如在酚■水系统分趾时，每种aa有特定分配系数，依此可用逆流

8、分配法分离。固定相：借助一定支持物(如：纤维素、淀粉、硅胶等亲水性不溶物质)，以结合水为固定相。流动相：以与水不溶的有机溶剂(如：酚、正丁醇)为流动相。方法：流动相流过支持物，将分配系数不同的氨基酸分开，以苗三酮显色，形成色谱，扫描定量，或洗脱后比色定量。氨基酸分离纯化方法•