盐霉素诱导细胞自噬抑制人胃癌细胞系bgc823增殖

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1、浙江大学硕士学位论文盐霉素诱导细胞自噬抑制人胃癌细胞系BGC823增殖姓名：范晓圆申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：潘文胜20120223浙江大学硕士学位论文中文摘要盐霉素诱导细胞自噬抑制人胃癌细胞系BGc823增殖浙江大学医学院内科学硕士研究生范晓圆导师潘文胜中文摘要研究背景与目的胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，目前无满意的针对胃癌的辅助化疗方案．在小鼠模型中发现盐霉素具有特异性抑制乳腺癌干细胞生长及转移的特性，但其抑制肿瘤细胞生长的潜在机制及对易耐药胃癌细胞的影响尚无研究．细胞自噬参与多种化疗药物对肿瘤细胞的杀伤机制，本研究旨在研究盐霉素通过

2、诱导细胞自噬抑制胃癌细胞增殖．研究方法应用MTT法检测盐霉素对人胃癌细胞系BGc823的增殖抑制作用，应用倒置显微镜和Hoechst33258染色及LC3荧光抗体在荧光显微镜下观察细胞形态及LC3表达情况，应用流式细胞仪检测盐霉素对胃癌细胞凋亡率的影响及应用3．MA抑制细胞自噬后细胞凋亡率变化情况，应用W．est锄blotting检测c唧aSe-3、cleavcdc唧髂e一3、c唧aSc-7、dea_Vedcaspase-7、caspase-9、deaVedcaSp嬲e·9，PAl冲，cleaVcd．脚、LC3的表达水平，应用透射电镜观察细胞自噬。研究结

3、果肼法结果示盐霉素对胃癌细胞BGc823的增殖抑制作用具有时间．剂量依赖性，24h、48h及72h盐霉素作用人胃癌细胞BGC823的半数抑制浓度(Ic50)分别是42．89州、19．03州、17．97州。盐霉素作用24h，倒置显微镜下观察，Ⅱ浙江大学硕士学位论文中文摘要细胞密度降低，大部分细胞变圆脱落，部分细胞固缩，碎裂。荧光显微镜下观察，随着盐霉素作用时间延长，细胞质内红色点状荧光增加．流式细胞检测结果示不同浓度盐霉素(o、7．5叫、30肛M)处理24h，细胞凋亡率逐渐增加，但无统计学差异；抑制细胞自噬后，细胞凋亡率明显降低。wIestenlblott

4、iI培检测示盐霉素30州作用12h后cleaved．脚表达明显上调，作用2h后即可见Lc3I转变为Lc3II，未检测到cleavedcaSpase一3表达、cleavedcaspase一7及cleaVedcaspase-9无明显差异．透射电镜见细胞质内自噬泡形成。研究结论盐霉素可诱导胃癌细胞BGc823发生细胞自噬，抑制自噬后细胞凋亡率明显降低，提示盐霉素主要通过细胞自噬抑制胃癌细胞增殖。盐霉素诱导的细胞凋亡不依赖casp船e途径。关键词：盐霉素胃癌细胞自噬Lc3PAJ冲IⅡ浙江大学硕士学位论文英文摘要Salinomycininhibitsthegrow

5、thofhumangastriccancercellBGC823throughinductionofautophagyMedicalCoUegeofZhejiangUniVersityInternalmedicineM．D．C锄didateⅪaoyu锄FanSupervisorWe皿shengPanAbstractBackgroundandpurposeG嬲tricc觚cerisoneofmemoStC0mmonmali印觚ttumo璐inmewodd．Atpresentthereisn0satisf．acto珂adjuVantc_h锄otllerapy

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