电针联合磁刺激治疗对脊髓损伤模型大鼠脊髓aqp--4、mcp--1表达的影响

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1、湖北中医药大学学位论文原刨性声明本人声明：所呈交的学位论文是在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖北中医药大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者鲐绅益阳甲年户月p日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解湖北中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，

2、允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部份内容，可以采用复印、缩印或其他手段保留学位论文；学校可以根据国家或湖北省有关部门的规定送交学位论文。同意《中国优秀博硕士论文全文数据库出版章程》的内容。同意授权中国科学技术信息研究所将本人学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》．(保密论文在解密后遵守此规定)论文作者签名：导师签名：聊年f月岁一日目录IlYlllllll211111511Ull6llllllllIMl3IIllllllllll2llllY2561312中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯IABSTRACT．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．II英文缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．VI前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．I剐吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1．实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．31．1主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．2主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．3实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．4造模器械⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42．实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、．42．1实验动物模型制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．42．2实验动物分组．‘⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯52．3各组具体治疗方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．62．4取组织处理⋯⋯⋯．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．62．5免疫组织化学法检测脊髓中AQP-4、MCP-I表达⋯⋯72．6统计学处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103．结果．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103．1各组大鼠脊髓AQP-4免疫组化结果比较⋯⋯⋯⋯1O3．2各组大鼠脊髓MCP一1免疫组化结果比较⋯⋯⋯⋯134．讨论⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯174．1中

5、医对脊髓损伤的认识⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．174．2针灸治疗脊髓损伤的现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯184．3本课题的选穴依据⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．214．4脊髓损伤大鼠模型的理论依据⋯⋯一⋯⋯⋯⋯234．5电针联合磁刺激调控AQP-4、MCP-1治疗脊髓损伤⋯24结语与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．26参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．27附录：⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33综述：近十年来针灸治疗脊髓损伤的实验和临床研究概况⋯33攻读学位期间发表论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯54致谢一⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．55中文摘要目的1．观察大鼠急性脊髓损伤后和给予电针联合磁刺激后对脊髓组织含水量和炎症的变化，探讨电针和磁刺激对脊髓水肿和炎症反应的影响；2．观察脊髓损伤模型大鼠脊髓中AQP-4和MCP-1分布及表达量的变化；3．进一步观察电针结合磁刺激后AQP-4和MCP-I表达水平的变化，探讨电针结合磁刺激通过调控AQP-4和MCP-I表达治疗脊髓损伤的作用机制。方法成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠50只，体重200±259，适应性喂养一周后，随机分为电针组、正常组、磁刺激组

7、、模型组和联合治疗组。造模方法：利用重物坠落打击方法制作脊髓损伤动物模型，大鼠以10％水合氯醛按4mf／kg腹腔注射麻醉成功后，将其固定于手术操作台上，背部脱毛备皮消毒，根据浮肋连接的第13椎体作为定位的骨性标志，以此为标志向上数3个胸椎来确定T8棘突的位置，以T8棘突为中心，取后正中线做一纵切口，约3cm，暴露T6-T10椎体，咬除T8棘突和两侧椎板，充分暴露硬脊膜，将109砝码从3era高处自由落体撞击停留于硬脊膜上自制的长度和直径均为2mm的探针上，大鼠双下肢及躯体回缩扑动，鼠尾出现痉挛性摆动，示

8、造模成功。正常组和模型组不给予治疗。电针组选取“关元"穴进行电针刺激，选用疏密波，频率2／15Hz，强度ImA，每次20min，每天1次，共治疗10天。磁刺激组在大鼠骶骨处皮肤(刺激$1-S4神经根)上放置直径为40ram的圆形线圈，频率0。5Hz，70％的最大输出强度，每次给予30个刺激冲动，分次完成，每两次刺激中间间隔2分钟，每天治疗1次，共治疗10天。联合治疗组采用电针结合磁刺激治疗，治疗方法、频率、时间同电针组和磁刺激组。治疗结束，