冠心舒通胶囊对细胞损伤保护作用研究

冠心舒通胶囊对细胞损伤保护作用研究

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1、学院代号10716学号010051541183专业代码100800密级陕西中医学院ShaanxiUniversityofChineseMedicine硕士学位论文冠心舒通胶囊对细胞损伤保护作用研究机制实验平作用机制机学位申请人黄壮壮专业名称中药学申请学位类型医学硕士学位(学术型)指导教师姓名刘峰论文提交日期2013年4月陕西中医学院学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果,无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作

2、品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果并由本人所承担的法律责任。学位论文作者签名_____日期:年月日关于学位论文使用授权的声明陕西中医学院有权保留使用本人学位论文,同意学院按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人授权陕西中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名_____日期:年月日论文导师签名____

3、_日期:年月日摘要冠心舒通胶囊对细胞损伤保护作用研究摘要冠心病(CHD)是最常见的心脑血管疾病之一,具有患病率高、致残率高、死亡率高等特点,已经成为危害人类健康的杀手之一。冠心病的治疗目前有药物治疗、介入治疗和冠脉搭桥,其中以药物治疗最为重要。既往结果调查显示,超过70%的冠心病患者长期使用中成药治疗。但是中药复方制剂的有效物质基础研究相对薄弱,作用机制不清楚,已经成为制约中药现代化和国际化进程的技术瓶颈,迫切需要深入研究。基于此,“冠心舒通胶囊治疗冠心病、心绞痛的作用机理研究”被列入国家“十二五重大新药创制”科技重大专项(2011ZX09401-308-6),本

4、课题研究内容为国家课题任务的一部分,以治疗心脑血管疾病的中药复方药冠心舒通胶囊及其各单味药为研究对象,采用现代分子生物学和药剂学的研究手段,获得中药复方作用机理的实验研究数据和科学证据,证实祖国传统医药学理论的科学内涵,实现中药现代化和国际化的目标。冠状动脉粥样硬化(AS)是CHD的一个最重要的病理特征。本课题应用AS的细胞增殖学说,研究了冠心舒通胶囊及其各单味药对心肌细胞及胸主动脉平滑肌细胞(ASMC)的细胞增殖的影响;基于AS的抗氧化应激理论,探讨了冠心舒通胶囊及其各单味药对心肌细胞及ASMC缺氧复氧(H/R)损伤的保护作用机制研究;根据AS的内皮损伤原理,考

5、察了冠心舒通胶囊内容物对内皮损伤的保护作用机制。选取的原代培养细胞更能较为客观准确地反映药物在细胞水平上的作用,细胞刺激因子如血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)都具有较好的靶向功能,AngⅡ能够诱导心肌细胞和ASMC增殖,TNF-α这一炎症因子可以造成内皮细胞损伤,一定程度上反映了AS的病理过程。本文主要研究内容和研究结果如下:1、冠心舒通胶囊及其各单味药对大鼠心肌细胞的保护作用研究。本研究应用酶消化的方法原代培养心肌细胞,选取MTT比色法,考察4个药物浓度(0.01,0.05,0.10,-10.20g·L)广枣提取物、丹参提取物、天竺黄水提

6、物、天竺黄醇提物、冰片和胶囊内容物6组药对AngⅡ诱导的心肌细胞增殖的影响,结果表明冠心舒通胶囊及其各单味I陕西中医学院2013届硕士学位论文药均可不同程度地抑制AngⅡ所致的心肌细胞增殖;取原代培养的乳鼠心肌细胞,建立H/R细胞损伤模型,给药24h后测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)的含量,结果表明冠心舒通胶囊及其各单味药均能提高缺氧心肌细胞SOD和NOS活性,增加NO含量,降低MDA和LDH含量。2、冠心舒通胶囊及其各单味药对平滑肌细胞的保护作用研究。本研究利用组织块贴壁的方法原

7、代培养ASMC,选取MTT比色法,考察4个药物浓度(0.01,0.05,0.10,-10.20g·L)广枣提取物、丹参提取物、天竺黄水提物、天竺黄醇提物、冰片和胶囊内容物6组药对AngⅡ诱导的ASMC增殖的影响,结果表明冠心舒通胶囊及其各单味药均可不同程度地抑制AngⅡ所致的ASMC增殖,取ASMC建立H/R细胞损伤模型,给药24h后测定细胞内SOD、MDA、LDH、NOS的含量、结果表明冠心舒通胶囊及其各单味药能提高缺氧ASMC的SOD和NOS活性,降低MDA和LDH含量。3、冠心舒通胶囊对TNF-α所致的内皮细胞损伤的保护作用研究。本研究采用MTT比色法筛选T

8、NF-α最

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