我国部分地区猪流行性腹泻病毒的分离与进化分析

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1、分类号tS855.3学校代码：10712UDC：636.09研究生学号：2013050707密级i公开灶衣林贵教夫学2015届全日制硕士专业学位研究生学位论文我国部分地区猪流行性腹泻病毒的分离与进化分析类型兽医硕士领域、方向动物疫病防控研究生何振洋指导教师杜恩岐副教授完成时间2015年5月中国陕西杨凌研究生学位论文的独创性声明本人声明：所呈交的全日制硕士专业学位论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果;论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，一切后杲与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别

2、加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：4”命’專时间：y’r年6月,曰导师指导研究生学位论文的承诺本人承诺：我的全日制硕士告业荦位研究生何振洋所呈交的硕士学位论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德

3、的暂行规定》，我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。导师签名：时间：年〈月丨日关于研究生学位论文使用授权的说明本学位论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库〉〉进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位论文及其相关的工作成果时，将以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，愿意按《中华人民共和国著作权法》等有关规定接受处理并承担

4、法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、爹改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）研究生签名：專时间：Z月f日导师签名：十么七^时间：年（月/日Classificationcode:S855.3Universitycode:10712UDC:636.09Postgraduatenumbers:2013050707Confidentialit

5、ylevel:PublicThesisforMaster’sDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015ISOLATIONANDPHYLOGENETICANALYSISOFPORCINEEPIDEMICDIARRHEAVIRUSFROMPARTICALREGIONOFCHINAMajor:MasterofVeterinaryResearchfield:AnimalEpidemicDiseaseControlNameofPostgraduate:HeZhen-yangAdviser:Prof.Du,En-qiDateofsubmission:May2015Ya

6、nglingShanxiChina我国部分地区猪流行性腹泻病毒的分离与进化分析摘要2013年冬及2014年春，吉林省、陕西省猪场疑似发生流行性腹泻病毒感染。为确定病原、了解其与国内外其他毒株的基因差异，分别采集腹泻粪便样品和小肠组织，进行病毒分离培养并对关键基因进行测序和分析，获得如下结果：1.利用Vero细胞连续传代后，分离到猪流行性腹泻病毒株SP株（吉林），YL9099、YL9140、YL9234株（陕西）。2.用RT-PCR方法对分离的到的4株猪流行性腹泻病毒S基因及SP株的M、ORF3基因进行进行扩增、克隆、测序，用DNAStar、MEGA6.0、NetNGlyc1.0Se

7、rver与GeneBank中登录的猪流行性腹泻病毒株S、M、ORF3序列进行序列变化、遗传进化关系、抗原位点，糖基化位点的分析。（1）本实验的4株病毒与经典毒株株CV777、DR13相比，核苷酸同源性在94.0%-99.4%之间。其推导的氨基酸与疫苗株相比有79-84处突变，其中发生在S1区的突变较多，占整体突变的70%以上，这也表明其S1区为该病毒的高变区。糖基化位点与抗原性分析，该4株病毒与疫苗株对比在已报道的抗原表位COE、2C10、S1D6均发生了几处突变，在