玫瑰黄链霉菌诱导黄瓜抗线相关wrky基因的表达分析及其药效试验

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1、AGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI硕士学位（毕业）论文玫瑰黄链霉菌诱导黄瓜抗线相关WRKY基因的表达分析及其药效试验学位申请人：乔丹娜指导教师：李亚宁教授刘大群教授学科专业：植物病理学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年六月三日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均

2、已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名签字日期：学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解河北农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权河北农业大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签名：签字口期：签字曰期:学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话:通讯地址：邮编分类号：S432.4+5单位代码：10086密级：公开学号：2012

3、301玫瑰黄链霉菌诱导黄瓜抗线相关WRKY基因的表达分析及其药效试验ExpressionanalysisofWRKYgenesrelatingwithresistancetoroot-knotnematodeinducedbyStreptomycesroseoflavusanditsefficacy学位申请人：乔丹娜指导教师：李亚宁教授刘大群教授学科专业：植物病理学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年六月三日摘要根结线虫病是影响设施蔬菜产量和质量的主要病虫害之一，每年都给我国设施蔬菜的生产造成很严重的损失。虽然化学药剂的施用起到了

4、一定的作用，但其长期和不当使用给人类和环境带来了很大的安全隐患。生物防治因其绿色环保等优点越来越受到人们的关注。玫瑰黄链霉菌（Strempomycesroseoflavus）Men-myco-93-63是本实验室保存的一株拮抗链霉菌，该菌株及其水剂对多种重要的植物病原菌都具有较强的抑制作用，前期研究表明Men-myco-93-63对根结线虫也具有较好的防治作用，但其生防作用机制目前还不是很明确。本文以津优1号黄瓜苗为试验材料，利用RT-PCR扩增技术，对Men-myco-93-63处理前后，黄瓜幼苗不同时间不同组织中WRKY转录因子的表达情况进行了检测和

5、分析，并检测了Men-myco-93-63片剂对黄瓜根结线虫病的防效以及其对土壤微生物区系的影响。具体结果如下：1、采集河北省定州市西南合蔬菜棚中的黄瓜病株，分离根结线虫，提取DNA，利用ITS通用引物进行PCR扩增及测序，使用BLAST软件进行序列比对，将其鉴定为南方根结线虫（Meloidogyneincognita）。2、通过RT-PCR扩增，筛选到6个与Men-myco-93-63抗线虫相关的WRKY转录因子，对这些转录因子在Men-myco-93-63水剂处理后，在黄瓜幼苗不同组织不同时间点的表达情况进行了检测，结果表明，在黄瓜幼苗不同组织中，6

6、个WRKY基因的表达量会随处理时间的延长而发生变化。其中，WRKY24仅在黄瓜根组织中表达，其表达量较根结线虫处理稍高；WRKY17、WRKY23、WRKY48、WRKY49、WRKY55在根组织中的表达量与根结线虫处理比呈上调趋势，且WRKY17和WRKY48在24h达到表达高峰，WRKY23和WRKY49表达量变化不规律。在茎组织中，WRKY17、WRKY49、WRKY55基因的表达量较根结线虫处理高，其中，WRKY55的正调控作用在处理前期最为显著；WRKY23、WRKY48的表达量呈下调趋势。叶组织中，WRKY17、WRKY48、WRKY49、W

7、RKY55的表达量相对于根结线虫处理上调，其中，WRKY23和WRKY49的上调作用较小；WRKY23基因受Men-myco-93-63水剂调控作用微小，表达量与根结线虫处理相近。Men-myco-93-63水剂对多数WRKY转录因子在根组织中的调控作用大于茎和叶组织。推测Men-myco-93-63水剂对黄瓜幼苗根、茎、叶组织中WRKY转录因子的调控作用在黄瓜防御根结线虫的过程中发挥了一定的积极作用，但生防菌对不同组织中不同WRKY转录因子的调控作用存在差异。3、利用温室盆栽法和平板稀释法，测定Men-myco-93-63片剂对黄瓜根结线虫病的防效及其

8、对土壤中微生物区系的影响。结果发现，Men-myco-93-63片剂对黄瓜根结线