玫瑰黄链霉菌men_myco_93_63afsa基因功能的初步鉴定

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1、第３７卷第３期河北农业大学学报Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．３２０１４年５月ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＨＥＢＥＩＭａｙ．２０１４文章编号：１０００－１５７３（２０１４）０３－００６６－０５ＤＯＩ：１０．１３３２０／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊａｕｈ．２０１４．００６６玫瑰黄链霉菌Ｍｅｎ－ｍｙｃｏ－９３－６３ａｆｓＡ基因功能的初步鉴定吕向坤１，孙伟明４，郭巍２，３，赵丹３，刘大群３，徐大庆１（１．河北农业大学生命科学学院，河北保定０７１００１；２．北京农学院植物科学技术学院，北京１０２２０

2、６；３．河北农业大学植物保护学院／河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心，河北保定０７１００１；４．邢台市疾病预防控制中心，河北邢台０５４０００）摘要：Ａ－因子是灰色链霉菌次级代谢和形态分化的自调节因子，研究发现，ａｆｓＡ家族基因编码链霉菌Ａ－因子及其类似物合成过程中的一种关键酶。前期本研究将玫瑰黄链霉菌Ｍｅｎ－ｍｙｃｏ－９３－６３抗生素合成基因簇定位于其线性质粒ｐＳＲ４７上，生物信息学分析发现ｐＳＲ４７含有ａｆｓＡ家族基因。为了明确ａｆｓＡ在玫瑰黄链霉菌中的作用，本研究通过构建ａｆｓＡ基因敲除载体，应

3、用接合转移方法将其转入玫瑰黄链霉菌，筛选获得发生同源重组的ａｆｓＡ缺失突变株。试验发现缺失突变株只产生少量气生菌丝及孢子，并且丧失对指示菌的拮抗作用，这说明ａｆｓＡ基因参与控制玫瑰黄链霉菌Ｍｅｎ－ｍｙｃｏ－９３－６３的形态分化及抗生素产生。关键词：玫瑰黄链霉菌；ａｆｓＡ；功能鉴定中图分类号：Ｑ９３３文献标志码：ＡＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅａｆｓＡｆｒｏｍＳｔｒｅｍｐｔｏｍｙｃｅｓｒｏｓｅｏｆｌａｖｕＭｅｎ－ｍｙｃｏ－９３－６３１，ＳＵＮＷｅｉ－ｍｉ

4、ｎｇ４，ＧＵＯＷｅｉ２，３，ＺＨＡＯＤａｎ３，ＬＩＵＤａ－ｑｕｎ３，ＸＵＤａ－ｑｉｎｇ１ＬＸｉｎｇ－ｋｕｎ（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＨｅｂｅｉ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１００１，Ｃｈｉｎａ；２．ＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏｌｌｅｇｅ，ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０２２０６，Ｃｈｉｎａ；３．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ

5、ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＨｅｂｅｉ／ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｏｎｔｒｏｌＣｅｎｔｅｒｏｆＰｌａｎｔＤｉｓｅａｓｅｓａｎｄＰｅｓｔｓｏｆＨｅｂｅｉ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１００１，Ｃｈｉｎａ；４．ＸｉｎｇｔａｉＣｅｎｔｅｒｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｘｉｎｇｔａｉ０５４０００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ－ｆａｃｔｏｒ（ａｕｔｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ）ｉｎｄｕｃｅｓｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎｉｎＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ

6、ｇｒｉｓｅｕｓ．ＧｅｎｅｏｆａｆｓＡｆａｍｉｌｙｅｎｃｏｄｅｓａｋｉｎｄｏｆｋｅｙｅｎｚｙｍｅｄｕｒｉｎｇｔｈｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆＡ－ｆａｃｔｏｒａｎｄｉｔｓａｎａｌｏｇｓｉｎＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ．Ｉｎｏｕｒｐｒｅｖｉｏｕｓｗｏｒｋ，ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｇｅｎｅｃｌｕｓｔｅｒｈａｓｂｅｅｎｐｏｓｉｔｉｏｎｅｄｏｎｌｉｎｅａｒｐｌａｓｍｉｄｐＳＲ４７ｏｆＳ．ｒｏｓｅｏｆｌａｖｕＭｅｎ－ｍｙｃｏ－９３－６３．Ｂｉｏｉｎ－ｆｏｒｍａｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔ

7、ｐｌａｓｍｉｄｐＳＲ４７ｃｏｎｔａｉｎｓａｆｓＡｆａｍｉｌｙｇｅｎｅ．ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｃｌａｒｉｆｙｔｈｅｒｏｌｅｏｆａｆｓＡｉｎＳ．ｒｏｓｅｏｆｌａｖｕＭｅｎ－ｍｙｃｏ－９３－６３，ｋｎｏｃｋｏｕｔｖｅｃｔｏｒｕｓｅｄｆｏｒｄｅｌｅｔｉｏｎｏｆａｆｓＡｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ，ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄｉｎｔｏＳ．ｒｏｓｅｏｆｌａｖｕＭｅｎ－ｍｙｃｏ－９３－６３ｂｙｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ，ａｎｄａｆｓＡ－ｄｅｌｅ－ｔｉｏｎｍｕｔａｎｔｓｔｒａｉｎｉｎｗｈｉｃｈｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｒｅｃｏｍｂｉｎａｔ

8、ｉｏｎｈａｓｏｃｃｕｒｅｄｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄ．Ｉｔｗａｓｆｏｕｎｄ收稿日期：２０１４－０２－２０基金项目：河北省自然科学基金项目（Ｃ２０１２２０４０７１）；现代农业产业技术体系建设项目，河北省教育厅项目．作者简介：吕向坤（１９８７－），男，河北省石家庄人，在读硕士生，主要从事分子微生物学研究．通讯作者：徐大庆（１９７２－），男，河北省平泉县人，副教授，硕士生导师，主要从事分子微生物学研究．郭巍（１９７１－），女，黑龙江省绥化人，教授，博