罗布麻总黄酮的提取、分离纯化及其抗氧化性能研究

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1、硕士学位论文罗布麻总黄酮的提取、分离纯化及其抗氧化性能研究作者姓名杨永涛学科专业生物质科学与工程指导教师田英姿教授所在学院轻工科学与工程学院论文提交日期2018年6月Studyonextraction,purificationandantioxidantactivityoftotalflavonoidsfromApocynumvenetumADissertationSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：YangYongtaoSupervisor：Prof.TianYing-ziSouthChinaUniversityofTechnolog

2、yGuangzhou,China分类号：TS201学校代号：10561学号：201520120401华南理工大学硕士学位论文罗布麻总黄酮的提取、分离纯化及其抗氧化性能研究作者姓名：杨永涛指导教师姓名、职称：田英姿教授申请学位级别：工学硕士学科专业名称：生物质科学与工程研究方向：植物资源的综合利用与天然产物的转化论文提交日期：2018年6月8日论文答辩日期：2018年6月4日学位授予单位：华南理工大学学位授予日期：年月日答辩委员会成员：主席：颜进华委员：田英姿杨飞刘德桃莫立焕摘要罗布麻中含有较多黄酮类物质，黄酮类化合物具有抗氧化、降血脂、抗疲劳等功效。但粗提物中黄酮类化合物纯度不

3、高，关于黄酮类化合物分离纯化的研究较少，限制了其进一步的应用研究。本课题选取新疆喀什地区的罗布麻叶，对其中的黄酮类化合物进行提取、分离纯化，并对纯化物进行结构鉴定和抗氧化活性研究，以期为罗布麻的综合利用与开发提供参考。采用正交试验对影响罗布麻总黄酮提取率的乙醇浓度、温度、提取时间、料液比、超声功率5个因素进行研究。得到最佳工艺为：乙醇浓度55%，提取温度50℃，提取时间25min，料液比为1:35（g/mL），超声功率400W。在此条件下，提取率达到2.033%。罗布麻各部位的总黄酮含量从高到低为：叶（20.33mg/g）>花（8.57mg/g）>茎（3.62mg/g）>根（0

4、.59mg/g）。采用大孔吸附树脂对罗布麻粗提液进行分离纯化，对比6种树脂（AB-8、D101、S-8、X-5、HPD-500和NKA-9）对罗布麻总黄酮的吸附率和解吸率，筛选得到效率更高的HPD-500型树脂。考察上样液浓度、pH、流速等因素对纯化效果的影响，得出HPD-500型大孔树脂柱层析纯化罗布麻总黄酮的最佳条件为：上样液浓度1.2mg/mL（总黄酮），pH5.0，流速2.0mL/min进行吸附；70%乙醇溶液，2.0mL/min洗脱速率进行动态洗脱，洗脱率达到91.35%。在此条件下，黄酮纯度由7.8%提高到57.3%，纯化效果明显。通过紫外光谱、红外光谱和液相色谱-

5、质谱联用分析了大孔树脂纯化物的结构特征。鉴定其主要含有4种黄酮类化合物：秦皮甲素、槲皮素-3-O-芸香糖苷（芦丁）、槲皮素-3-O-β-D葡萄糖苷、槲皮素-3-O-B-D-葡萄糖苷。以抗坏血酸（VC）作对照，研究了罗布麻粗提物、乙酸乙酯纯化物、大孔树脂纯化物对DPPH（二苯基苦基肼）自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、ABTS+•自由基的清除效果，研究表明：（1）当浓度为1.2mg/mL，粗提物对4种自由基的清除率分别为54.86%、78.45%、56.24%、40.24%，大孔树脂纯化物对DPPH自由基（93.87%）和ABTS+•自由基（94.52%）的清除能力显著提升，

6、对超氧阴离子自由基的清除能力（50.68%）略微下降；（2）大孔树脂纯化物对四种I自由基的清除能力（93.87%、89.27%、50.68%、94.52%）显著强于乙酸乙酯纯化物（68.29%、83.68%、43.57%、63.75%）。（3）抗氧化活性从高到低依次为：VC＞大孔树脂纯化物>乙酸乙酯纯化物>粗提物。当浓度为1.2mg/mL时，大孔树脂纯化物的抗氧化能力与VC接近，乙酸乙酯纯化物、粗提物抗氧化能力明显低于VC。关键词：罗布麻；黄酮类化合物；提取；分离纯化；抗氧化活性IIABSTRACTTherearemanyflavonoidsinApocynumvenetum,

7、andflavonoidshaveantioxidantactivity,lipid-loweringandanti-fatigueeffects.However,thepurityofflavonoidsincrudeextractsisnothigh,andtherearefewstudiesonthepurificationofflavonoids,whichlimitstheirfurtherapplication.Inthispaper,flavonoidswereextracte