皂角刺中黄酮提取及抗氧化性研究答辩

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1、皂角刺中黄酮提取及其抗氧化性研究2021/8/9二、皂角刺概述一、引言三、实验中所用到的仪器四、皂角刺中黄酮的测定六、结论五、皂角刺中黄酮的抗氧化性研究目录七、致谢2021/8/9一、引言皂角刺中是一种传统的中药，在临床上有着大量的应用。它含有大量的黄酮，黄酮是一种很强的抗氧化剂，可有效清除体内的氧自由基，这种阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。因此本文将对皂角刺中黄酮的含量进行了测定，并对其氧化性进行研究，以期对皂角刺药理作用的开发提供提供有用的资料。2021/8/9二、皂角刺概述皂角刺（Chinesehoneylocustspin

2、e），又称皂角针，为豆科落叶乔木植物皂荚树的棘刺。分布较广。2021/8/9皂角刺概述皂角刺化学成分皂荚皂甙黄酮氨基酸棕榈酸硬酯酸油酸酚类多元醇2021/8/9抗菌、抗炎作用31542药理作用6降血脂等治疗乳腺增生等疾病抗肿瘤作用免疫调节与抗过敏作用皂角刺药理作用抗凝血作用三、主要仪器电子天平HCR-3018高速离心机恒温水浴锅2021/8/9三、主要仪器超波清洗器循环水真空泵DJZ型粉碎机2021/8/9四、皂角刺中黄酮测定芦丁标准曲线绘制2021/8/9皂角刺中黄酮测定实验流程称取2.00g皂角刺（加入20mL60%乙醇）超声30min抽滤定容过夜离心取上清液加入药品定容测定移取1ml40

3、℃皂角刺中黄酮测定数据样品吸光度A提取率%提取率平均值%皂角刺10.0247.838.70皂角刺20.0247.83皂角刺30.03210.452021/8/9五、皂角刺中黄酮抗氧化性研究1、脂质体系中抗氧化能力测定2、Fe3+还原能力测定3、·OH清除能力测定4、DPPH·清除能力2021/8/91、脂质体系中抗氧化能力测定（抑制率）实验步骤1mLLLS+1mLFeCl3+1mLVc+1mL样品混匀避光37℃水浴1h加入TCA-TBA-HCl混合液避光沸水煮15min迅速冷却离心取上清液在532nm处测定吸光度As以1mL蒸馏水为空白测定吸光度Ac2021/8/91、脂质体系中抗氧化能力测定

4、（抑制率）黄酮浓度吸光度As吸光度Ac抑制率%142.40.3670.70347.80284.80.35549.50427.20.31655.05596.60.28559.46712.00.25066.44测定数据以及抑制率抑制率%=(Ac-As/As)×1002021/8/91、脂质体系中抗氧化能力测定（抑制率）以黄酮浓度/（ug/mL）为横轴，抑制率为纵轴作的曲线如下图随着黄酮浓度的增加脂质体系中抗氧化能力（抑制率）也增加。2021/8/92、Fe3+还原能力测定实验步骤1mL样品+2.0mLPBS缓冲液+2.0mL铁氰化钾摇匀50℃水浴20min迅速冷却加入2mLTCA混匀3000r/m

5、in离心10min取2mL上清液+0.4mLFeCl3+2.0mL蒸馏水以蒸馏水调零以Vc代替样品作为阳性对照在700nm测定吸光度2021/8/92、Fe3+还原能力测定Fe3+还原能力测定表格.doc以黄酮浓度/（ug/mL）为横轴，样品吸光度为纵轴作的曲线如下图随着皂角刺黄酮浓度的升高样品吸光度逐渐增大，即Fe3+还原能力随着黄酮浓度的增加越来越强2021/8/93、·OH清除能力测定实验步骤硫酸亚铁铵、水杨酸-乙醇溶液和样品各1mL+0.03mLH202摇匀37℃水浴30min510nm测定吸光度Ax以蒸馏水代替样品作空白对照测吸光度A0以Vc作为阳性对照样品本底吸光度用蒸馏水代替双氧

6、水测定吸光度Ax0每个浓度平行测定3次2021/8/93、·OH清除能力测定·OH清除能力测定表格.doc以黄酮浓度/（ug/mL）为横轴，清除率%为纵轴作的曲线如下图随着黄酮浓度的增加，皂角刺的·OH清除能力越来越弱。2021/8/94、DPPH·清除能力黄酮浓度（ug/mL）AeAiAjDPPH清除率%142.40.6160.1420.06086.69284.80.1390.07088.80427.20.1340.08091.23596.60.1300.09093.51712.00.1250.10095.94DPPH清除能力数据及计算DPPH清除率=（1-（Ai-Aj/Ae））×10020

7、21/8/9DPPH·清除能力以黄酮浓度/（ug/mL）为横轴，DPPH清除率%为纵轴作的曲线如下图随着黄酮浓度的增加，皂角刺的DPPH的清除率越来越强。2021/8/9六、结论根据芦丁标准曲线A=0.0379C+0.0003稀释倍数为25，黄酮含量为3.48mg/mL；算出皂角刺黄酮提取率为8.70%。1、皂角刺中黄酮的提取2021/8/9六、结论1）随着黄酮浓度的增加脂质体系中抗氧化能力（抑制