转基因和组培综述论文

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1、植物组织培养技术与转基因技术综述新乡医学院生科院2011级69班摘要:植物组织培养在过去的40多年中得到了迅速的发展,已渗透到生物学科的各个领域,成为牛物工程技术中的一个重要组成部分和基本研究手段Z-O现如今,植物组织培养技术具有保持花卉优良性状、培冇脱毒苗木、保存种质资源等优势,因而在花卉种苗繁殖生产中得到广泛应用。转基因技术是生命科学研究中最有效、最令人振奋的新技术z—,已广泛应用于牛命科学的基础研究(基因功能研究)和应用研究方血,并取得了可喜的成就。转基因动物是解决特殊牛物学问题常用的独特模世,它的研究成果标志着现有重组DNA技术与动物细胞、胚胎培养和操作技术的集成。研究和利川转基因

2、动物已成为当代生物技术研究与开发领域中的热点之一。植物纽•织培养;组织栽培,转基因技术,基因工程一、植物组织培养技术1.1植物组织培养的生理依据细胞全能性(celltotipotency):植物体的每一个细胞都携带有一•套完整的基因组,并具有发冇成为完整植株的潜在能力。植物生长调节物质对于植物细胞组织的分化和决定具有关键性作用。它包括:牛氏素类、细胞分裂素类、赤霉素、脱落酸、乙烯等。牛长素类主要用于愈伤组织的形成,体细胞胚的产牛及试管苗的牛根。常用的有2,4-D、NAA(蔡乙酸)、IBA(呵I味丁酸)、IAA(眄呀乙酸)等。其作用强弱为2,4-D>NAA>IBA>IAAo细胞分裂素类则有促

3、进细胞的分裂与分化,延迟组织的衰老,促进芽的产主等作用。常用的有Zip、KT(氯毗服)、6-BA(6-茉氨基腺卩票吟)、ZT(玉米素)等作用强弱顺序为。Zip>KT>6-BA>ZTo赤霉素则有促进已分化的芽仲长生长,打破种子休眠的作川。常用的为GA3。1.2植物组织培养的类型纽织培养按培养对象可分为组织或愈伤培养、器官培养、植株培养、细胞和原生质体培养等。1.组织或愈伤组织培养(tissue,callusculture)为狭义的组织培养,是对植物体的各部分组织进行培养,如茎尖分牛组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄壁纽织等等;或対山植物器官培养产生的愈伤组织进行培养,二者均

4、通过再分化诱导形成植株。2.器官'培养(organculture)即离体器©的培养,根据作物和需要的不同,可以包括分离茎尖、茎段、根尖、叶片、叶原基、子叶、花瓣、雄蕊、雌蕊、胚珠、胚、子房、果实等外植体的培养3.植株培养(plantculture)是对完整植株材料的培养,如幼苗及较大植株的培养。4.细胞培养(cellculture)是对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养。5.原生质体培养(protoplastculture)是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。1.3植物组织培养过程A、培养材料的采集组织培养所川的材料非常

5、广泛,可采取根、茎、叶、花、芽和种子的子叶,有时也利川花粉粒和花药,其中根尖不易灭菌,一般很少采用。对丁木本花卉來说,阔叶树可在一、二年生的枝条上采集,针叶树种多采种子内的子叶或胚轴,草本植物多采集茎尖。在快速繁殖中,瑕常用的培养材料是茎尖,通常切块在0.5厘氷左右,如果为培养无病毒苗而采用的培养材料通常仅取茎尖的分生组织部分,其长度在0.1毫米以下。B、培养材料的消毒1.先将材料用流水冲洗T净,最后一•遍用熬馄水冲洗,再用无菌纱布或吸水纸将材料上的水分吸干,并用消毒刀片切成小块。2.在无菌坏境中将材料放入70%洒精中浸泡30-60秒。3.再将材料移入漂白粉的饱和液或0.01%升汞水中消毒

6、10分钟。4.取出后用无菌水冲洗三、四次。C、制备外植体将已消毒的材料,川无菌刀、剪、辍等,在无菌的环境下,剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等,叶片则不需剥皮。然后切成0.2-0.5厘米厚的小片,这就是外植体。在操作中严禁用手触动材料。D、接种和培养1•接种在无菌坏境下,将切好的外植体立即接在培养基上,每瓶接种4一10个。2.封口接种后,瓶、管用无菌药棉或盖封口,培养皿用无菌胶带封口。3.温度培养棊大多应保持在25°C左右,但要因花卉种类及材料部位的不同而区别对待。4.增殖外植体的增殖是组培的关键阶段,在新梢等形成后为了扩人繁殖系数,需要继代培养。把材料分株或切段转入增殖培养基中,增殖培

7、养基一般在分化培养基上加以改良,以利于增殖率的提高。增殖1个月左右后,可视情况进行再增殖。5.根的诱导继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根,必须转到生根培养基上进行生根培养。1个月后即可获得键壮根系。E、组培苗的练苗移栽试管苗从无菌到光、温、湿稳定的环境进入自然环境,必须进行炼苗。一般移植前,先将培养容器打开,于室内自然光照下放3天,然后取出小苗,用向來水把根系上的营养基冲洗干净,再栽入己准备好的基质中,基质使用前最好

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