细胞定位表达的新城疫病毒HN蛋白对肺癌A549细胞体外生物学作用的研究

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1、细胞定位表达的新城疫病毒HN蛋白对肺癌A549细胞体外生物学作用的研究何忠杰'，王凯冰"，李乐静'，隋红'（1.大庆油田总医院肿瘤科•黑龙江大庆163000；2.哈尔滨医科大学第二临床医学院介入科；3.哈尔滨医科大学第三临床医学院内科，黑龙江哈尔淇150081）［摘要］囱的研究定位表达于细胞不同部位的新城疫病毒HN蛋白体外对肺癌A549细胞抑制作用。方以体外瞬时转染胞浆型、跨膜型、分泌型重组真核表达新城疫病毒HN蛋白质粒和空载体质粒，用M1T法和流式细胞仪检测对肺癌A549细胞抑制作用。件皋重组质粒经体

2、外转染后，对肺癌A549细胞的生长抑制率表现为时间和空间上的差异。体外转染24h后，转染跨膜型质粒组对肺癌A549的抑制率最高;体外转染48h后，转染分泌型质粒组对肺癌A549的抑制率最高，有统计学差异（P<0.05）。体外转染72h后，各种重组质粒组间对肺癌A549的生长抑制无显著性差异（P>0.05）。流式细胞仪检测经修饰后的重组质粒即跨膜型和分泌型均能提高早期凋亡（24h）和总的凋亡（72h）的比率°g重组修饰后的新城疫病毒HN蛋白即跨膜型和分泌型的同其自身定位表达于胞浆型相比，体外抗肿瘤作用提高

3、n［关键词］HN蛋白；细胞定位;抗肿瘤作用［中图分类号］R734.2；R73・362［文献标识码］A［文章编号］1000-1905（2010）04-0347-03BiologicaleffectsofnewcastlediseasevirusHNproteintargetingtodifferentsubcellularcompartmentonA549invitroHEZhong-jie,WANGKai-bing,I』Le・jing,etal(DepartmentofOncology,TheGener

4、alHospitalofDaqingOilfield、Daqing163000,China)Abstract:ObjectiveTostudythebiologicaleflectsofnewcastlediseasevirushemagglutinin-ncurainini・dase(HN)proteinsonA549invitrotargetingtodifferentsubcellularcompartment.MethodsThere・combinednewcastlediseasevirusH

5、Nproteinsplasmidtargetingtodifferentsubcellularcompartment(cytoplasmicorCy-HN,secretedorSc-HNandmembrane・dnchoredorM-HN)andemptyvectorplasmidweretransfectedonA549invitro.ThecelldeathratewasdetectedwithMTTmethodandFCM.ResultsThepercentageofcelldeathwasma

6、ximalinM・HNtransfectedcellsat24hpost-lransfectionwhile■maximalcelldeathwasfoundinSc・HNtransfectedcellsat48hpost-1ransfection(P<0.05).NostatisticallysigniGcantdiflerenceincelldeathinducedbythethreeversionsofHNwasfoundat72hpost-transfection(P>0・05).Whenk

7、ineticsofcelldeathwerechartedtSc-HNcausedmaximalcelldeathat48handthisdeclinedsigniGcantlyat96h.KineticsofcelldeathinM-HNtransfectedcellsshowedapeakbetween24~48handthenplateaued.Themodifiedandrecombinedplasmid(secretedorSc-HNandmembrane-anchoredorM-HN)cou

8、ldbothimprovetheearlyapoptosisratioandthetotalapoptosisratiodetectedbyFCM.ConclusionTheantitumoreffectofthosemodifiedandrecombinedplasmid(secre・tedorSc・HNandmembrane-anchoredorM-HN)onA549invitrocanbeincreasedcomparedwithcy