睾酮检测标准操作流程.doc

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1、概述雄性激素睾酮（17β-羟雄烯二酮）的分子量为288道尔顿。男性体内的睾酮几乎全由睾丸间质细胞合成。分泌受黄体生成素（LH）的调节，并负反馈影响垂体-下丘脑的调节机制。睾酮促进男性第二性征的形成，维持前列腺和精囊的功能。血循环中的睾酮绝大部份与载体蛋白质结合（如性激素结合球蛋白（SHBG））。女性的卵巢可产生少量睾酮。生理水平浓度的雄激素对妇女没有特殊的作用。女性雄激素水平的升高可导致男性化（取决于雄激素水平的增加程度）。检测女性体内睾酮含量有助于诊断雄激素综合征（AGS）、多囊性卵巢（Stein-Le

2、venthal综合症）以及怀疑卵巢肿瘤、肾上腺肿瘤、肾上腺发育不良或卵巢功能障碍时。检测男性体内睾酮含量可用于诊断睾酮产生不足的疾病，如性腺发育不足、雌激素治疗、染色体异常（如Klinefelter综合征）和肝硬化。1目的规范睾酮检测测试，确保检测结果准确性和重复性。2检测方法和原理2.1检测方法：竞争法2.2检测原理：ADVIACentaur睾酮检测是一种竞争性的免疫测定方法，使用直接化学发光技术。病人样品中的睾酮与标记试剂中经过吖啶酯标记的睾酮共同竟争有限量的与单克隆小鼠抗兔抗体结合的多克隆兔抗睾酮抗

3、体，前者在固相试剂中结合到顺磁性颗粒上。检测过程中，使用睾酮释放剂将样品中的结合睾酮从结合的蛋白质上释放出来。3标本采集与保护新鲜无溶血血清遵守以下推荐的血清标本处理，运行和储存步骤3.1用真空采样管采集血液标本时须遵守常规注意事项3.2离心前使标本完全自然形成凝块3.3全程保证样品管的密闭状态3.4尽快分离血清，并及时测定3.5如果标本不能在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在4℃或更低温度的环境中：3.6冷藏标本室温放置20分钟后再测定；3.7冷冻标本室温解溶后放置20分钟后再测定3.8不符合标本

4、处理3.8.1溶血和乳糜血标本在报告单的备注栏注明3.8.2标本量过少的标本，严重溶血和乳糜血标本与临床沟通并将标本退回，填写不合格标本拒接登记。4试剂和设备4.1试剂SIEMENS原装配套试剂4.1.1试剂组成标记试剂：2.5mL/盒，用吖啶酯标记的睾酮（~3.2ng/mL)，置于含防腐剂的缓冲盐水中。固相试剂：15.0mL/盒，在磷酸盐缓冲液中结合到单兑降小鼠抗兔抗体(~0.53μg/mL)的多克隆兔抗睾酮抗体（~0.03μg/mL)，前者通过共价键结合到顺磁性颗粒上，含叠氮化钠（0.1%)和防腐剂。

5、探针冲洗液：10.0mL/盒，含叠氮化钠（0.1%)和防腐剂的缓冲盐溶液。释放剂：5.0mL/盒，类固醇释放剂(~0.1μg/mL),其置于含叠氮化钠(0.1%)和防腐剂的缓冲液中。4.1.2试剂准备：手工混合所有试剂包。肉眼检查试剂底部以确保所有颗粒分散均匀并处悬浮状态，然后将混合物载入系统直接使用4.1.3试剂保存试剂2~8℃避光保存，并保持竖直向上4.2质控品SIEMENS原装配套质控品4.3校准品SIEMENS原装配套标准品。4.4警告和注意事项4.4.1只可用于体外诊断；4.4.2试剂中含有叠氮

6、钠，请小心处理，请勿吞服或与皮肤粘膜接触！叠氮钠在与铜或铅等重金属接触后会产生有毒的叠氮化物；4.4.3试剂盒的测定结果仅作为临床各种疾病的辅助诊断依据4.5仪器ADVIACentaurCP全自动化学发光免疫分析仪5操作程序5.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存5.2样本签收严格按标本接收程序签收标本5.3标本处理以3000r/min，离心6~10min，分离血清上机测定，若标本不能及时检测，将分离血清冷藏于2~8℃的冰箱内5.4标本检测5.4.1手工编排测试项目：在主界

7、面选中样本区域→选择样本架→选择样本→点击Samples区域中的样本类型选择按钮→切换至样本类型→选择样本ID编排区→没有通过扫描样本管条形码输入ID号的样本，在此处手工输入样本ID→然后在AssaySelection区域选择测试项目5.4.2样本运行确认样本装载，必要的样本信息输入完毕→确认所有耗品及试剂已装载→按START键开始运行样本。5.5检验后标本保存保存在标本冰箱内，保存期为7d6校准程序6.1校准品的准备和储存将校准品从冰箱中取出，加5ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min，待充分

8、混匀后分装。-20℃冰冻保存可保存20d，复融后2~8℃可稳定24h。6.2校准条件在室内质控失控，或使用新批号试剂，或更换仪器主要配件，或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为28d6.3校准程序参见生化组的校准操作程序7质量控制程序7.1控制品的准备和储存每瓶准确加入5.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min待充分溶解后分装，保存于-30℃冰箱，启用前取出，室温放置30min待充分融化后使用，2~8℃可稳定