白藜芦醇对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤保护作用研究.pdf

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1、安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2015Aug;50(8)·1111·◇药学研究◇白藜芦醇对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤保护作用研究121113宋先兵,张宝,黄焱平,安梅,方安宁,陈晓宇摘要目的观察白藜芦醇(RES)对大鼠肾脏缺血-再灌存活的患者也会伴有不同程度的慢性肾功能损注(I/R)保护作用并初步探讨其相关机制。方法SD大鼠害[4]。脂质过氧化是I/R导致肾脏组织损伤的重随机分为4组:空白对照组、I/R模型组、白藜芦醇(RES)处要机制,因此寻找积极有效的脂质过氧化治疗

2、药物,理组、RES+IR模型组;检测各组大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮保护肾脏细胞免受过度氧化应激的损伤,对保护I/(BUN)及肾脏病理学改变,使用超氧化物歧化酶(SOD)活[5]R过程产生的肾脏损害具有重要意义。该研究观力、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)试剂盒察RES治疗后肾脏I/R的保护作用及其可能的分检测肾脏组织SOD、MDA、GSH-PX产生;Westernblot法检测子生物学机制。肾脏组织p-AKT蛋白水平。结果与空白对照组相比,I/R模型组Cr、BUN含量均有升高,与I/R模型组相比,

3、RES+I/1材料与方法R模型组Cr、BUN含量均有明显下降;病理学检测显示RES+I/R模型组肾脏损伤较I/R模型组明显减轻,肾小球结构1.1实验动物健康雄性SD大鼠40只,250~300基本正常,细胞间质有少量炎性细胞浸润,基底膜稍有增厚;g,SPF级,购自安徽省实验动物中心。与空白对照组相比,I/R模型组SOD、MDA、GSH-PX含量均1.2主要试剂与仪器RES、戊巴比妥钠(中国医有升高,与I/R模型组相比,RES+I/R模型组SOD、GSH-PX药上海化学试剂公司);超氧化物歧化酶(superoxide含量均

4、有明显下降;Westernblot检测显示,与空白对照组相dismutase,SOD)活力、丙二醛(malondialdehyde,比,I/R模型组p-AKT表达水平有所降低,但RES可提高p-MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxi-AKT表达水平,差异有统计学意义。结论RES通过氧化应dase,GSH-PX)试剂盒(南京建成生物工程研究所);激保护I/R肾脏损伤,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通兔抗大鼠p-AKT抗体(美国CST公司)。Universal路活化有关。320/320R型低

5、温高速离心机(德国Hettich公司);关键词白藜芦醇;缺血-再灌注;氧化应激;AKTμQuant酶标仪(美国Bio-Tek公司);AUW220D电中图分类号R692子分析天平(日本岛津公司)。文献标志码A文章编号1000-1492(2015)08-1111-041.3实验方法1.3.1实验动物分组将SD大鼠适应性饲养1白藜芦醇(resveratol,RES)是植物体内一种天周后,随机分为空白对照组(10只)、I/R模型组(10然的二苯乙烯类多环基酚化物质,化学名为3,4,5-[1-2]只)、RES预处理组(10只)、

6、RES+I/R模型组(10三羟基酚,研究表明,RES可对肿瘤、缺血、动脉只)。粥样硬化等多种疾病具有良好的治疗作用。其保护1.3.2大鼠I/R模型制备模型组动物以2%戊及治疗机制可能由于RES是一种抗自由基抗氧化[3]巴比妥纳(0.25ml/100g)腹腔注射麻醉,腹部正中剂,但其具体的作用机制尚不清楚。肾脏缺血-切口暴露腹腔,小心分离双侧肾蒂,以无创动脉夹关再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤是临床上导闭左侧肾动脉1h,然后开放动脉血流,同时切除右致缺血性急性肾衰竭的主要原因之一,病死率高,

7、且侧肾脏。开放血流后肾脏由暗红变为鲜红,表明再2015-04-08接收灌注成功,缝合腹腔。并于缺血24h处死动物,股基金项目:国家自然科学基金(编号:81373421)动脉取血,留取肾脏标本[6-7]。RES治疗组于建模作者单位:1安徽医学高等专科学校人体解剖与组织胚胎教研室,合[8]前1h腹腔注射RES(3mg/kg)进行预处理;空白肥230601对照组不做任何处理;RES预处理组与RES治疗组2安徽医科大学第一附属医院临床营养科,合肥230022处理相同,但不建立I/R模型。于造模24h后麻醉3安徽医科大学组胚教研

8、室,合肥230032处死各组大鼠。作者简介:宋先兵,男,讲师,硕士;陈晓宇,男,博士,教授,责任作者,E-mail:cxyayd@163.1.4病理学检测及评分各组大鼠处死后,取左侧com肾脏组织,将少量组织固定于10%甲醛中,固定48·1112·安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2

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