柠檬生物活性物质分离纯化及工艺研究硕士论文

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1、分类号密级：密级柠UDC檬密级：生物活性物质分硕士学位论文离纯化及工柠檬生物活性物质分离纯化及工艺研究艺研究作者姓名：全晓艳西学科、专业：食品科学华大学号：212010083201007学硕指导教师：李玉锋士学完成日期：2013.04位论文ClassifiedIndex:UDC:密级：XihuaUniversityMasterDegreeDissertationTheResearchofThePurificationAndTechologyoflemonBiologicallyActiveSubstances

2、Candidate:QuanXiaoyanMajor:FoodscienceStudentID:212010083201007Supervisor:Prof.LiYufengApril,2013西华大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经注明引用内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果，也不包含其他已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。

3、若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。学位论文作者签名：指导教师签名：日期：日期西华大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，在校攻读学位期间论文工作的知识产权属于西华大学，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，西华大学可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复印手段保存和汇编本学位论文。(保密的论文在解密后遵守此规定)学位论文作者签名：指导教师签名：日期：日期西华大学硕士学位论文摘要柠

4、檬（Citruslimon）中功能成分丰富，近年来随着经济发展，专家学者们越来越关注植物保健品的开发，柠檬具有降血糖、抗菌、抗氧化性等多种生物活性，奠定了其作为未来保健品的备选来源的基础，本论文对柠檬中总皂苷、柠檬苦素化合物、微量元素锌含量进行了测定，并测定了其中超氧化物歧化酶活力，对柠檬多肽进行了初步研究。本文采用大孔吸附树脂分离、纯化了柠檬中的总皂苷，建立了紫外分光光度法对其含量进行测定。结果表明10倍稀释柠檬皂苷提取液中总皂苷含量为27.1mg/L，20倍稀释柠檬皂苷提取液中总皂苷含量为27mg/L，对

5、线性试验考察显示总皂苷以人参皂苷Re2计在质量范围40~200μg内线性关系良好（R=0.9997）。平均加标回收率为102%、108.5%和111%。精密度和重复性表现良好，相对标准偏差分别为1.82%、1.5%。采用80%饱和度硫酸铵提取蛋白质的方法初步提取了柠檬中超氧化物歧化酶，并通过修改的Marklund法对其活力进行了测定，得柠檬粗酶提取液活力为25.99u/mL，2.0mg/mL酶标准液活力为332.42u/mL，重复性和精密度试验表现性良好，RSD为2.15%和2.16%。实验探讨了超临界二氧化

6、碳萃取柠檬籽中柠檬苦素化合物工艺，并将最佳工艺条件下提取的样液经高效液相色谱进行了含量测定。柠檬苦素标准品在质量浓度240mg/L-80mg/L范围内线性关系良好（R=0.9993），柠檬籽中其含量为61.03mg/L，样品在4℃20h内稳定，重复性和精密度实验RSD分别为1.04%、1.63%。为了测定柠檬中微量元素锌的含量，样品按程序消解15min后，在最佳原子吸收光谱仪工作条件下对其含量进行测定，柠檬汁中锌含量为1.13μg/g。锌浓度在20.05μg/mL-0.6μg/mL范围内线型关系良好（R=0.

7、9993）,加标回收率为91%、102.25%、105%。对测定不确定度进行了评估，其中对含量结果影响最大的主要是样品重复性测定、锌标准储备液的含量和最小二乘法拟合标准曲线计算含量，相对不确定度分别为0.59%、0.5%、0.274%，而锌标准溶液配制时使用的移液枪和容量瓶和样品消解液定容对测定结果影响较小，采用电子天平称量样品对测定结果的影响可以忽略不计。[96]采用Khanan方法初步分离柠檬中多肽，并采用超滤离心管截留得到5KD-30KD的柠檬多肽粗提物。茚三酮显色反应颜色变化为无色变为紫红色变为蓝色。

8、经SDS-PAGE结果显示在10kD-15Kd范围内有条带出现。经反相高效液相色谱洗脱柠檬多肽粗提物与重组人胰岛素标准品，结果显示在几乎相同的保留时间有吸收峰出现。对柠檬样品梯度洗脱条件进行了选择，结果表明梯度洗脱条件较好的是：流动相流速为0.8mL/min，0-1min:A液为:90%、B液为10%；1-30min：A液为40%、B液为60%。I柠檬生物活性物质分离纯化及工艺研究关键词：柠檬；总皂