冠心病痰瘀证与载脂蛋白e基因多态性关系的研究论文

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1、冠心病痰瘀证与载脂蛋白E基因多态性关系的研究论文欧阳涛,宋剑南,苗阳,林谦,牛晓红,金红,陈冰【关键词】,冠心病[摘要]目的:探讨冠心病(coronaryheartdisease,CHD)不同痰瘀证候与载脂蛋白E(apolipoproteinE,ApoE)基因第4外显子多态性的关系。方法:选择符合条件的CHD痰证、瘀证、痰瘀互阻证和非痰非瘀证(其他证型)患者200例,另选100名健康志愿者作为对照。常规检测所有样品的血脂水平。提取全血DNA.freelerasechainreactionrestrictionfra

2、gmentlengthpolymorphism,PCRRFLP)技术检测ApoE基因型。采用SAS软件对基因多态性和痰瘀证候的辨证类型进行相关性分析。结果:(1)冠心病患者中ε4等位基因频率(19.5%)明显高于健康对照组(9.5%),具有统计学意义(P0.05),其中尤以E3/4基因型更为多见(P0.01)。(2)携带ε4等位基因者的总胆固醇(totalcholesterol,TC)、总甘油三酯(totaltriglycerides,TG)和低密度脂蛋白胆固醇(loorphismofapolipoproteinE

3、geneandsyndromesofphlegmandbloodstasisinpatientsorphismofapolipoproteinE(ApoE)exon4geneanddifferentsyndromesinpatientsedifferentiation,includingsyndromeofphlegm(PS),syndromeofbloodstasis(BSS),syndromeofphlegmbloodstasisblocking(PBBS)andsyndromeofnonphlegmandno

4、nbloodstasis(NPNBS).Onehundredhealthyvolunteerseasuredbyroutineexamination.TotalDNAofperipheralbloodinedbypolymerasechainreactionrestrictionfragmentlengthpolymorphism(PCRRFLP)technique.Alldataorefrequent(P0.01).(2)Thelevelsoftotalcholesterol(TC),.freelaybeoneo

5、fthemainsusceptiblegenesinCHDpatientsorphism;syndromeofphlegmandbloodstasis载脂蛋白E(apolipoproteinE,ApoE)作为脂蛋白的组成部分和功能蛋白,对血脂代谢起调节作用,编码ApoE基因的变异是影响血浆胆固醇浓度的重要遗传因素之一。已有报道证实:不同遗传背景人群的ApoE的基因多态性通过影响脂质代谢而与冠心病(coronaryheartdisease,CHD)的发病密切相关[1~3]。证候是中医认识和治疗疾病的根本,冠心病患者的

6、临床表现以血瘀证和痰瘀互阻证为多见[4]。本研究对冠心病不同证候的发生和ApoE基因多态性的相关性进行了探讨,现报道如下。1资料与方法1.1病例纳入标准选择在北京西苑医院和北京东方医院就诊的心肌梗死患者、或经冠状动脉造影及介入治疗确诊为冠心病的患者,这些患者均符合1999年美国心脏病协会AHA/I)为15.1~34.3kg/m2。另选100名健康体检者作为对照组,其中男55名,女45名;平均年龄(62.1±7.8)岁;均无冠心病症状,常规心电图及超声心动图检查正常。以上样本人群均来自北京和河北地区,汉族,无血缘关系

7、。所有病例均作标准基线问卷调查,结果记录于按临床流行病学要求设计的表格上。医师、患者和实验研究人员之间实行盲法。1.4材料1.4.1主要试剂血清总胆固醇(totalcholesterol,TC)和总甘油三酯(totaltriglycerides,TG)测定试剂盒购自法国申能公司;高密度脂蛋白胆固醇(highdensitylipoproteincholesterol,HDLC)和低密度脂蛋白胆固醇(loicDNApurificationkit)、TaqDNA聚合酶、dNTPs、DNA分子量Marker(PCRMark

8、er和pBR322HaeⅢMarker)以及限制性内切酶HhaI均购自美国Promega公司;丙烯酰胺和NN’甲叉双丙烯酰胺,均购自北京鼎国生物技术公司。1.4.2血样采集患者空腹12h后,静脉抽取2ml血样,乙二胺四乙酸抗凝,用于提取DNA。1.4.3引物根据Richard等[6]设计引物,序列为P1:5’AACAACTGACCCCGGTGGCG3’;P2

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