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1、石榴叶中总黄酮含量的测定第22卷第2期(2006)河西学院学撤V0I.22No.2(2006)石榴叶中总黄酮含量的测定吴静支金虎(塔里木大学,新疆阿拉尔843300)摘要:用分光光度法对石榴叶中总黄酮含量进行了初步测定,结果表明,石榴叶中黄酮类物质含量非常高,可达3.59mg/g,这将为开发利用石榴叶资源提供依据.关键词:石榴叶;总黄酮含量;测定中图分类号:06-32文献标识码:A文章编号:1672—0520(2006)02—0049—02石榴叶是石榴科植物石榴PunicagranatunL.的叶.<图经本草》记载:"榴叶者,主咽喉燥渴,止下利漏精
2、,止血之功能."作为中药,石榴叶尚未形成商品药材.近年来,有研究表明,石榴叶水浸液可显着提高大鼠脑微循环血流量…;可显着降低血清总胆固醇和三酰甘油.升高密度脂蛋白(HDL)含量I;可清除氧自由基l2I.而黄酮类物质具有多种生物学活性H'.能对抗自由基,抑制癌细胞和对抗致癌促进因子,有效发挥抗癌防癌作用ISl;还有很强的抗氧化效果I,能防止机体脂质过氧化反.因此,对石榴叶中总黄酮含量进行了初步测定,l仪器,试剂及材料仪器:上海第三分析仪器厂生产的721型分光光度剂:上海医疗器械五厂生产的电热恒温水浴锅.试剂:上海化学试剂公司生产的生化试剂芦丁(标准品);石
3、油醚,乙醇为国产化学纯,亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠均为国产分析纯.材料;石榴叶采自新疆阿图什地区,系6月份收集,将收集后的叶片自然晾干,粉碎过60目筛,置干燥器中,恒重各用.2提取称取2譬样品置三角瓶中,加入50ml石油醚,于70℃水浴回流3h,以除去样品中脂溶性杂质,回收石油醚,用75%乙醇50ml,舯℃下回流提取两次,第一次2h,第二次O.5h,过滤,合并滤液于Io0mI棕色容量瓶中,用75%乙醇定容,摇匀,得样品液,待用.3总黄酮的含量测定3.1芦丁标准曲线的制作精密称取芦丁2.5mg,置25ml容量瓶中,以75%乙醇微热使其溶解,定容,摇匀.准确
4、吸取0.00ml,1.00ml,2.o0ml,3.00ml,4.00ml,5.00m1分别置于10ml棕色容量瓶中,以75%乙醇溶液补充至5ml,分别加入浓度为5%亚硝酸钠0.3mi,摇匀,放簧6分钟;再加10%硝酸铝溶液0.3ml,摇匀,放冠6分钟;然后加4%氢氧化钠4ml,摇匀,用75%乙醇溶液稀释刻度,摇匀,放置I2分钟.以第一管作空白,在波长510nm处测定吸光度,以吸光度为因变量(Y),浓度为自变量(x)做标准曲线,得线性回归方程为:Y=I.1657x+0.0119.r=0.9993.3.2样品中总黄酮含量的测定分别精密吸取样品液I.00ml,
5、置于10ml棕色容量瓶中,每份样品5份,第一份作空白对照,吸取样品1mI,置于10ml棕色容量瓶中,用75%乙醇定容,摇匀,其他4份步骤按3.I项操作,得到吸光度后代入划归方程,得总黄酮含量,计算平均值即为该样品的总黄酮含量.结果见表I.3.3样品回收率试验从上述已测得总黄酮含量的样品液中随意取一份,吸取样品液ImI,置于10mi棕色容量瓶中,共6份.1份不加芦丁标准溶液,其余5份分别加入上述做标准曲线的芦丁标准液ImI,其他步骤按3.I项操作,以加芦丁标准溶液的为空白对照,得到吸光度后代入回归方程,计算总黄酮含量,结果平均嘲收率为lOO.%,变异系数为
6、0.87%.4讨论与结论实验结果表明,石榴叶中黄酮类物质含量非常高.作为天然植物,我国石榴资源丰富,如能把榴叶作为茶叶或中药材大量开发利用,不但町以提高经济效益,而且对于利用,开憾保健制品具有参考价值.收稿日期:200510-14作者简介;吴静(1978一),女,江苏徐州人,助教,硕士,主要从事预防兽医学的教学与科研工作...49..昊静支金虎:石榴叶中总黄酮含量的测定表I样品中总黄酮含量测定结果参考文献:i1I李定格,荆雪梅,林清叉,等.石榴叶注射液对脑微循环血流量影响的实验研究IJI.时珍国医国药,1998,9(4):327.I2I牵定格,苏传勤,孙
7、力,等.石榴叶调节血脂和清除氧自由基作用的雾验研究I.JI.山东中医药大学.1999,23(5):380～381.I3I林启寿.中草药成分化学IMl_北京:科技出版社.1977.I4I周荣汉.药用植物化学分类学IMI.上海:上海科技出版社.l988.I5I刘侍平,陈尚猛.等.槲皮素夏其衍生物的生物化学活性研究进展…,中草药,1991,(4)_182~184.I6I陈尚猛.槲皮素在油脂中抗氧化效果研究IJI.食品研究与开发.I990.(3):7-8.DeterminationofFlavonesinPomEgranateLeafWUJingZHIJin—h
8、u(Tariumuniversity,Alar,XinJiang,China84
