b组柯萨奇病毒对心肌细胞感染模式的研究

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1、B组柯萨奇病毒对心肌细胞感染模式的研究作者：张中海，张琦，闫长栋，钟照华【摘要】目的观察B组柯萨奇病毒(CoxsackievirusB，CVB)在原代心肌细胞中的感染特点，从而研究CVB对心肌细胞的致病机制。方法原代培养Balb/c乳鼠心肌细胞，并获得纯化的心肌细胞。使用B组柯萨奇病毒嗜心肌毒株3型(CVB3m)攻击原代心肌细胞，观察病毒感染心肌细胞后心肌细胞的细胞病变、超微结构和心肌酶的变化。结果成功原代培养了Balb/c乳鼠心肌细胞。心肌细胞在病毒感染后，细胞病变(CPE)不明显，与在HeLa等细胞中的典型CPE不同。心肌细胞在CVB3m感染后保持细胞形态和

2、博动超过2周时间。电镜显示心肌细胞结构正常，细胞器数量增加，在心肌细胞胞质中可见晶格样病毒颗粒排列。培养细胞的上清液中心肌酶升高。结论CVB在原代心肌细胞中表现为持续感染，CVB在心肌细胞中的致病机制不同于HeLa细胞。【关键词】心肌细胞;B组柯萨奇病毒;Balb/c乳鼠;原代细胞培养　　Abstract:ObjectiveToinvestigatethecharacteristicsofCoxsackievirusB(CVB)onprimarilyculturedmyocardialcellsandtoexplorethepathogenesisofcardi

3、omyocytes.MethodsCardiomyocytesfromBalb/csucklingmousewereculturedinvitro,16andpurifiedmyocardialcellswereobtained.TheculturedmyocardialcellswereattackedwithCVB3m,amyocardialtropicCoxsackievirusBstrain.Thecytopathiceffect(CPE)andultrastructureoftheCVB3m-infectedmyocardialcellswereobs

4、erved.Thevariationsofmyocardialenzymesinthesupernantoftheculturemediumweredetermined.ResultsThecardiomyocytesfromneonateBalb/cmiceweresuccessfullycultured.NoapparentCPEcouldbeobservedintheculturedmyocardialcellsfollowingtheCVB3mattack,whichwasdifferentfromthetypicalCPEintheinfections

5、ofHeLacells.Thecardiomyocytesretainedintactmorphologyandpulsationforovertwoweeksasoftheinfection.Theelectronicmicroscopyshowedthatthemyocardialcellshadnormalultrastructure,withanincreaseinthenumberoforganellesandvisiblecrystally-arrangedviralparticlesinthecytoplasm.Thelevelofmyocardi

6、alenzymesinthesupernatantoftheinfectedmyocardialcellswashigherthanthatofthecontrolgroup.ConclusionCVBcanpersistentlyinfectcardiomyocytes.ThepathogenesisofCVBonmyocardialcellsdiffersfromthatinHeLacell.　　Keywords:cardiomyocytes;CoxsackievirusB;sucking16Balb/cmouse;primarycellculture　　B

7、组柯萨奇病毒(CoxsackievirusB，CVB)是病毒性心肌炎和心肌病的主要病因，其敏感动物模型是Balb/c乳鼠，如果要离体研究CVB对心肌的致病性，必须原代培养Balb/c乳鼠心肌细胞[1]。CVB感染细胞通常表现为急性杀细胞病变，例如，宫颈癌细胞HeLa细胞是CVB致病机制研究中最常用的细胞平台，CVB感染HeLa细胞后，在24h出现明显细胞病变(CPE)，细胞变圆聚集，48h细胞死亡脱落;理论上，CVB感染心肌细胞也应该表现为杀细胞效应。但是，分子流行病学研究证明，CVB可以持续存在心肌组织中。Quigley等[2]观察23例临床和组织学表现为心肌

8、炎的患者，其中12例在平