子宫腺肌病患者在位与异位内膜热休克蛋白27的表达

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1、子宫腺肌病患者在位与异位内膜热休克蛋白27的表达【摘要】目的研究子宫腺肌病(AM)患者在位及异位内膜中热休克蛋白27(HSP27)的表达水平及其在AM发生发展中的意义。方法采用免疫组化SABC法检测AM患者在位及异位内膜各40例和正常子宫内膜40例中HSP27表达情况。结果AM患者在位内膜组HSP27的表达低于异位内膜组(P<0.05),两组均显著高于正常子宫内膜组(P均<0.01)。AM患者在位及异位内膜中,增生期与分泌期相比HSP27表达差异无显著性(P>0.05),正常子宫内膜增生期与分泌期相比HSP27表达差异有

2、显著性(P<0.05)。结论AM患者在位及异位内膜HSP27的表达高于正常子宫内膜,并且失去在正常子宫内膜中的周期性变化。HSP27表达水平升高在AM的发生发展中有重要意义。子宫内膜中HSP27表达水平的检测,对AM的诊断有一定参考价值。【关键词】子宫腺肌病;在位内膜;异位内膜;热休克蛋白27  子宫腺肌病(adenomyosis,AM)是子宫内膜腺体及间质异位于子宫肌层,它与子宫内膜异位症有不同的病因及发病机理,已将其划分为一种独立的子宫疾病。随着发病率的升高,AM日益受到人们重视,但其发病机理目前尚不明了,临床诊断及治疗也有一定

3、困难。本实验通过测定AM内膜中热休克蛋白27(HSP27)的表达,从一侧面探讨其发病机理,为临床诊断及治疗提供一定理论依据。  1资料与方法  1.1研究对象选取2003年2月~2004年10月遵义医学院附属医院病理科子宫内膜标本蜡块。AM在位内膜40例,其中增生期20例,分泌期20例;异位内膜40例,其中增生期20例,分泌期20例;正常子宫内膜40例,其中增生期20例,分泌期20例。所有AM患者标本均经病理检查确诊,术前3个月未用激素治疗。  1.2试剂HSP27兔抗人多克隆抗体(武汉博士得生物工程有限公司),即用型SABC免疫组化染色

4、试剂盒(武汉博士得生物工程有限公司),DAB显色试剂盒(武汉博士得生物工程有限公司)。  1.3实验方法石蜡切片脱蜡至水,高温高压法进行抗原修复,3%H2O2阻断内源性过氧化物酶,非免疫源性动物血清封闭,滴加一抗浓度1∶100,4℃冰箱过夜,分别设置阳性对照(已知HSP27阳性的乳腺癌切片)及空白(PBS代替一抗)对照,SABC法按试剂盒说明书进行操作。  1.4结果判定光镜下胞膜、胞浆内有棕黄色颗粒为阳性,阳性细胞必须结构清晰、定位好,着色明显高于背景。所有结果均由我院病理科专业人员鉴定、复核。采用15400计算机图像分析仪对切片进行图

5、像分析。每张切片随机选取10个视野,测平均光密度值。  1.5统计学方法所有数据用SPSS11.5统计学软件包处理。结果均以x±s表示,采用t或t′及单因素方差分析。  2结果   子宫内膜中HSP27阳性信号主要分布在腺上皮细胞的胞核和胞浆中,基质细胞的胞核中也有表达。异位内膜组HSP27表达最强,明显强于在位内膜组(t=2.05,P<0.05)及正常子宫内膜组(t=5.07,P<0.01),并且在位内膜组中的表达又要强于正常子宫内膜组(t=2.83,P<0.05)。HSP27在正常增生期内膜中的表达最弱,明显低于正常

6、分泌期内膜。在AM组,无论在位还是异位内膜增生期与分泌期相比,其表达差异均无显著性,见表1。  3讨论  热休克蛋白是生物体对各种物理化学物质及潜在的有害物质(如缺血、缺氧等)做出反应时产生的一种蛋白质。HSP27的合成可以提高机体适应能力,如感染、耐热、耐低温等[1]。它作为细胞“分子伴侣”参与蛋白的折叠、装配、降解、转移及修复,能促使变性损伤的蛋白恢复正常,维持细胞稳态。又可以协同免疫系统对抗原进行加工和递呈,参与免疫应答过程。另有研究表明[2]:HSP表达增多与细胞损伤有关,具有抗凋亡作用。目前已证实:细胞表面的Fas/Apro-1

7、受体与相应配体结合诱导细胞凋亡,HSP表达后可以使细胞产生一种新的物质,包裹自身及外来抗原,使得细胞凋亡发生。HSP还可能通过影响癌基因如:P53,bal-2等的表达参与对细胞凋亡调控。  表1各组光密度值比较(略)  与同组增生期相比,a:t=3.70,P<0.01,b:t=0.33,c:t=0.33,P>0.05;与正常组相比,e:t=2.83,f:t=5.07,P均<0.01;与在位组相比,g:t=2.05,P<0.05  一般情况下,HSP27分布于细胞的胞浆中,应激时大部分HSP27位于细胞核,包围核仁,

8、恢复正常状态后仍移入胞浆。这种移位现象可以增强细胞对损害的耐受,维持细胞正常代谢,提高细胞生存能力。本实验结果显示,正常子宫内膜中HSP27主要表达于腺上皮细胞的胞浆中,少量定位于细胞核。这与

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