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时间:2018-11-21
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1、砂仁不同部位及近缘种中槲皮苷含量的比较论文王祥培吴红梅万德光李良英税朝毅【摘要】目的探讨中药砂仁不同部位及近缘种中槲皮苷含量的差异。方法采用高效液相色谱法测定槲皮苷的含量。结果槲皮苷质量百分浓度线性范围为0.1226~1.226μg,线性回归方程为:Y=316.01X-29.98,r=0.9999(n=6),平均回收率为96.85%。结论砂仁不同部位及近缘种中槲皮苷的含量有明显的差异。砂仁不同部位槲皮苷含量高低顺序为:种仁果实果皮。【关键词】砂仁近缘种不同部位槲皮苷Abstract:ObjectiveTofindoutthediffere
2、nceofquercitrincontentinvariousdifferentfractionsofAmomumvillosumanditscounterfeitspecies.MethodsThequercitrincontentinedbyHPLC.ResultsThecalibrationcurveofquercitrinomumvillosumanditscounterfeitspeciesomumvillosumissignificant,.freelomumvillosum;Counterfeitspecies;Differ
3、entfractions;Quercitrin砂仁为姜科植物阳春砂AmomumvillosumLour.绿壳砂A.villosumLour.var.xanthioidesT.L.umvillosumLour.的干燥成熟果实;海南假砂仁购于四川成都,经笔者鉴定为姜科植物海南假砂仁AmomumchinenseChunexT.L.onsil.C18(5μm,250mm×4.60mm);柱温25℃;流动相:甲醇-0.2%磷酸(50∶50);流速0.8ml·min-1;检测波长350nm。在此色谱条件下,槲皮苷色谱峰对称,供试品色谱图中槲皮苷色谱峰
4、与其它成分色谱峰分离良好,见图1~2。图1槲皮苷对照品溶液HPLC图(略)图2砂仁供试品溶液HPLC图(略)2.2供试品溶液制备取砂仁细粉4g,精密称定,置索氏提取器中,加石油醚(30~60℃)60ml,加热回流4h,至提取器内液体近无色,取出,挥干石油醚,置100ml圆底烧瓶中,加入甲醇50ml,加热回流提取2h,滤过。残渣加甲醇50ml,加热回流提取1h,滤过。残渣加甲醇50ml,加热回流提取1h,滤过。合并滤液,回收溶剂,用甲醇定容到10ml,摇匀。用微孔滤膜(0.45μm)滤过,取续滤液,即得。2.3线性关系考察精密称取槲皮苷12
5、.36mg,置100ml量瓶中,加甲醇溶解,定容,即得每毫升含槲皮苷0.1236mg的溶液。按上述色谱条件,分别进样1.0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0μl,测定峰面积,以色谱峰面积为纵坐标,槲皮苷进样量为横坐标,进行线性回归分析,线性回归方程:Y=316.01X-29.98,r=0.9999。进样量在0.1226~1.226μg范围内具有良好的线性关系。2.4精密度实验吸取对照品溶液10μl,连续进样5次,记录色谱图,结果槲皮苷峰面积的RSD为0.53%。2.5稳定性实验精密称取同一供试品溶液,分别在0,4,8,12,16,
6、20h进样,记录色谱图,结果槲皮苷峰面积的RSD为2.32%。表明供试品溶液在20h内稳定。2.6重复性实验取同批药材5份,精密称定,按“2.2”项下供试品溶液制备方法制备并测定,记录色谱图,结果槲皮苷含量的RSD为2.59%。2.7回收率实验取已知含量阳春砂仁粉末5份,每份约2.00g,精密称定,分别精密加入一定量的槲皮苷对照品溶液,按“2.2”项下供试品溶液制备方法制备并测定。结果见表1。表1回收率实验测定结果(略)2.8样品含量测定取21批药材,照供试品溶液制备方法操作。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,分别进样,测定峰
7、面积积值,按外标法计算样品中槲皮苷的含量,结果见表2。表2槲皮苷的含量测定结果(略)3讨论实验中分别采用回流提取法、超声法、渗漉法等不同提取方法来考察对样品中槲皮苷的影响,并作综合分析,拟定上述供试品的制备方法。研究结果表明,阳春砂及海南假砂仁的不同部位均含有槲皮苷,但同一品种不同的部位槲皮苷的含量有明显的差异,其中以种仁的含量最高,果实的含量次之,果皮含量最低,而艳山姜果实、果皮、种仁中均不含槲皮苷。因此,规范市场药材品种来源,统一用药部位,才能保证临床用药安全、有效。本文建立了高效液相色谱法测定砂仁中槲皮苷的含量,在上述提取方法和色谱
8、条件下待测成分与相邻峰达到基线分离,重现性好,回收率高,可作为砂仁质量控制的方法。【
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