染料木素抑制人胃癌细胞bgc-823增殖和诱导细胞凋亡机制

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1、中南大学硕士学位论文染料木素抑制人胃癌细胞BGC-823的增殖和诱导细胞凋亡的机制姓名：苏文申请学位级别：硕士专业：细胞生物学指导教师：刘艳平20070501硕士学位论文中文摘要摘要药物诱导细胞凋亡疗法是近年来肿瘤治疗的新策略，寻找细胞凋亡的靶点又是细胞凋亡疗法的关键，由于传统中药在毒副作用上有明显的优势，又具有来源广泛等优点，使得许多学者把抗肿瘤注意力逐渐转向了中药领域，并取得了可喜的成就。以中药诱导肿瘤细胞凋亡对癌症的抑制和治疗是现在研究抗肿瘤的热点和新领域。我室筛选的中药有效成分染料木素能较好

2、的抑制人胃癌细胞BGC．823的增殖和诱导细胞凋亡，用SRB等方法筛选细胞毒性作用，染料木素对人胃癌细胞BGC．823有很好的抑制作用，用AO／EB、DAPI荧光染色发现染料木素具有诱导细胞凋亡的作用，呈现典型的细胞凋亡特征，并对凋亡相关基因cox-2、bel-2和bar进行了分析和研究。目的采用不同浓度的染料木素处理人胃癌细胞BGC-823，从细胞形态结构及抑制率来研究染料木素对人胃癌细胞BGC．823的抑制作用；进一步研究染料木素诱导胃癌细胞凋亡的分子机制。方法通过倒置光学显微镜观察拍照，SRB

3、实验，AO／EB、DAPI荧光染色并荧光显微镜拍照等技术检测染料木素对人胃癌细胞BGC-823的毒性及诱导凋亡的作用；流式细胞术检测细胞周期分布及凋亡率，RT-PCR、Westernblot检测细胞凋亡相关基因的表达。结果染料木素能显著抑制人胃癌细胞BGC．823生长，并具有时间浓度依赖性。染料木素作用24h、48h、72h的半数生长浓度(GC50)分别为294．5、111．3、83．50mol／L。370mol／L～2960mol／L染料木素作用24h后，DAPI荧光核染，人胃癌细胞BGC．823

4、核出现碎裂、片断化和周边化，呈现典型的凋亡特征；细胞被阻滞子G2／M期，随药物浓度的增加，细胞凋亡率逐渐增加，细胞内cox-2，bd-2表达在mRNA水平和蛋白质水平下调，bar表达在mRNA水平上升，蛋白质水平无明显变化。结论染料木素具有较强对胃癌细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用，并具有时间浓度依赖性；染料木素使细胞增殖受阻于细胞周期G棚期，使cox-2，bcl-2表达下调而bax表达有所上升。关键词染料木素，人胃癌细胞BGC．823，增殖抑制，细胞周期，细胞凋亡硕士学位论文英文摘要ABSTRACTT

5、heoccurrenceanddevelopmentofgastriccarcmomaiSnotonlyrelatedtotheabnormalhyperplasiaoftumorcell，butalsototheabnormalapoptosisofthetumorcells．Theunusualmechanismofcellapoptosisisveryimportantintheoccurrenceoftumorandanti-tumortreatment．Itmaybebecomeabasi

6、cstrategytotreatthegastriccarcinomabyusingtheinterveneapoptosistechnologythatthetargetistoinducethetumorcell．WefoundgenisteincaninhibitproliferationandinduceapoptosisinGastriccarcinomaBGC一823．SoSRBassayWasusedtoobservetheeffectofGemsteinafter24honproli

7、ferationofBGC·823cells．Cellcycleandapoptosiswereanalyzedbyflowcytometry(FCM)．Transcriptionandproteinlevelofcox-2,bci-2andbaxWasdetectedbyRT-PCRandW色sternb10t．Aim：StudyinginhibitoryeffectsofGenisteinonBGC一823gastriccancercellswithdifferentconcentration．

8、TostudyapoptosisofBGC．823gastriccancercellsinducedbyGenisteinandfurtherinvestigateitsmolecularmechanisms．Methods：111einhibitoryeffectsofGenisteinindifferentconcentrationofindifferentexposuretimeonBGC一823gastriccancercellswereanalyzedbyS