初级检验士考试(微生物学检验)讲义第二十七章病毒感染的实验诊断

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1、woed版-精品资料病毒感染的实验诊断●考点　　病毒的生物学性状　　病毒的实验室检查方法　　常见病毒的感染　　【内容讲解】第一节　概述　　一类非细胞型微生物，个体极小，可通过细菌滤器，需用电子显微镜观察。　　仅含一种核酸作为遗传物质，外被蛋白质衣壳或还有包膜。　　病毒只能在活细胞内寄生，以复制的方式进行增殖。　　在临床微生物感染中，近75%的传染病是由病毒引起的。　　一、病毒的基本性状　　（一）形态结构　　1.大小和形状：　　大小：测量单位用纳米表示，一般在20-300nm之间。　　形态大致可分为：球形或近似球形、杆状、弹形、砖形、蝌蚪形等

2、。　　2.结构　　精品资料分享woed版-精品资料　　（二）病毒的增殖　　病毒必须依赖宿主细胞，　　以特殊的自我复制方式进行增殖。　　病毒的复制周期：　　吸附、穿入、脱壳、生物合成、　　组装与成熟、释放6个阶段。　　　　异常增殖：　　顿挫感染：病毒进入细胞后的环境不利于它的复制，不能合成本身的成分或不能组装和释放有感染性的病毒颗粒。　　缺陷病毒：由于病毒基因组不完整或基因位点改变而不能进行正常增殖的病毒。　　干扰现象：当两种不同的病毒或两株性质不同的同种病毒，同时或先后感染同一细胞或机体时，可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象。　　（三）

3、噬菌体　　以细菌、真菌等为宿主，能引起细菌等裂解的病毒。　　噬菌体特异性识别细菌表面受体，可用于进行细菌的鉴定与分型。　　噬菌体感染细菌后产生两种后果：　　溶菌周期和溶源性周期。　　精品资料分享woed版-精品资料　　（四）非寻常病毒　　比病毒更小更简单的致病因子，又称为亚病毒因子，包括类病毒、卫星病毒和朊粒等。　　朊粒个体微小，不含核酸，其主要成分是一种蛋白酶抗性蛋白，对各种理化作用的抵抗力强，具有传染性，是引起传染性海绵状脑病的病原体。　　朊粒致中枢神经系统退化性病变，引起牛海绵状脑病（疯牛病）。克雅病（CJD）和Kuru病被认为与朊粒

4、感染有关。　　二、病毒的分类与命名　　科、属、种3级或科、亚科、属、种4级。　　DNA病毒、RNA病毒、DNA和RNA逆转录病毒三大类。　　按传播途径可分为呼吸道病毒、胃肠炎病毒、经性传播感染的病毒等。　　按感染部位与症状特征可分为肝炎病毒、出血性热病毒、疱疹病毒等。第二节　病毒感染的实验诊断　　病毒学实验室诊断有三个方面：　　①直接检测和分离鉴定；　　②检测病毒蛋白抗原成分和核酸；　　③检测抗体。　　一、标本采集、运送及处理　　（一）标本采集　　1.采样时机：应在病人急性期或发病初期采集标本。　　2.标本种类：　　根据不同病毒感染采集不同

5、标本，如鼻咽分泌物、脑脊液、血液、粪便等。　　（二）标本的运送及保存　　快速传递，立即处理和接种。　　采集和运送过程注意冷藏。如不能立即处理和接种，可在4℃保存数小时，长时间保存需置-70℃。　　（三）标本处理　　凝固的血液需先离心，得到的血清可以用于病毒分离。　　肝素抗凝全血、脑脊液、胸腔液、水痘液以及尿液均可直接用于病毒分离培养。　　有些标本如粪便等,常需粗提、提纯和浓缩等复杂处理过程。　　二、分离培养与鉴定　　（一）分离培养　　1.组织培养　包括器官培养、组织块培养和细胞培养。　　目前常用的方法是细胞培养；　　常用细胞：　　①原代和次

6、代细胞培养；②二倍体细胞株；③传代细胞系。　　2.鸡胚接种　一般选用9-12日龄鸡胚。鸡胚中的部位适宜病毒卵黄囊嗜神经病毒，如乙型脑炎病毒羊膜腔流感病毒尿囊腔流感病毒、腮腺炎病毒，还可制备疫苗和大量病毒抗原绒毛尿囊膜天花病毒、单纯疱疹病毒脑内狂犬病病毒精品资料分享woed版-精品资料　　3.动物接种　　实验室常用新生小鼠或乳鼠进行病毒分离。　　（二）病毒鉴定　　1.初步鉴定　根据临床症状、流行病学特点、标本来源、易感动物范围、细胞病变特征及生物学特征、理化性质可初步判断病毒的科及属。　　2.最终鉴定　在初步鉴定的基础上，选择适当的血清学方法

7、对病毒分离株进行最后鉴定，常用中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验、免疫荧光试验、酶免疫试验等。分子生物学方法也在病毒鉴定方面得到应用。　　初步鉴定（举例）：　　细胞病变效应（CPE）：细胞形态变化病毒细胞圆缩，分散，不聚集，全部细胞被破坏肠道病毒细胞肿大，颗粒增多，病变细胞聚集呈葡萄状腺病毒细胞融合成多核细胞副粘病毒，疱疹病毒空泡状，多核巨细胞麻疹病毒　　脂溶剂敏感实验：有包膜（+），无包膜（-）；　　耐酸实验：肠道病毒（R），鼻病毒（S）。　　三、病毒感染的诊断精品资料分享woed版-精品资料　　（一）显微镜检查　　1.用光学显微镜直接

8、检查病毒包涵体。可作为病毒感染的辅助诊断，不是特异性试验。　　核内包涵体：常见DNA病毒。如巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒和腺病毒等。　　胞浆内包涵体：常见RNA病