溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾常用免疫指标、虾青素含量和lvlt基因表达的影响

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1、分类号：S945.1+2密级：公开UDC：639.5学号：201050011149广东海洋大学硕士学位论文溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾常用免疫指标、虾青素含量和LvLT基因表达的影响谢警鸿指导教师：邱德全教授申请学位类别：农学硕士专业名称：水产养殖研究方向：水产动物免疫与病害控制学院名称：水产学院中国·湛江2013年6月学位论文答辩委员会组成主席：委员：导师：时间：广东海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何

2、其它个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权广东海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1、保密□，在______年解密后适用本授权书。2、不保密√

3、□。(请在以上相应方框内打“√”)作者签名：导师签名：溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾常用免疫指标、虾青素含量和LvLT基因表达的影响摘要本实验从溶藻弧菌中提取得到其多糖成分肽聚糖，并对肽聚糖的结构和化学组分进行测定，进一步证实所得到的成分为肽聚糖，并用所提取得到的肽聚糖对凡纳滨对虾进行免疫刺激，对凡纳滨对虾常用免疫指标、机体内虾青素的含量以及C-型凝集素LvLT基因的表达进行测定，同时分析所测定的免疫指标与虾青素含量、凝集素LvLT基因表达之间的相关性，具体研究结果如下：1.从溶藻弧菌中提取肽聚糖的得率为6.43%，肽聚

4、糖的含量为98.1%，在进一步对其化学成分和结构测定的研究表明：肽聚糖中蛋白质含量为38.2%，总糖的含量为34.4%，总脂的含量为2.8%；其结构从傅里叶红外光谱图可以看出在3283.32-1-1-1-1-1-1cm，2962.33cm，2929.68cm，2874.85cm，1625.46cm，1532.9cm，1171.61-1-1cm，1046.73cm出现吸收峰，具备了肽聚糖相应的特征吸收峰。2.用浓度为0.05mg/mL、0.1mg/mL和0.15mg/mL的溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾进行注射免疫刺激，并

5、对其常用免疫指标和免疫保护率进行测定，结果表明：溶藻弧菌肽聚糖对血清中血细胞数量、酚氧化酶活力(PO)、一氧化氮合成酶活力(NOS)、超氧化物歧化酶活力(SOD)有极显著性影响(P<0.01)，其中0.05mg/mL组、0.1mg/mL组和0.15mg/mL组血细胞数量分别在24h、6h和6h达到最大值，PO活力分别在72h、72h和96h达到最大值，NOS活力在12h、72h和24h达到最大值，SOD活力在48h、72h和24h达到最大值；各处理组在出现最大值之后，随着时间延长而逐渐趋于对照组的水平；免疫保护率0.

6、05mg/mL组为40.0%，0.1mg/mL组为53.33%，0.15mg/mL组为66.67%，免疫保护率随着浓度的增加而增大。3.用浓度为0.5mg/mL、1.0mg/mL和1.5mg/mL的溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾进行浸泡免疫刺激，并对其常用的免疫指标和免疫保护率进行测定，结果表明：溶藻弧菌肽聚糖对血清中血细胞数量、酚氧化酶活力(PO)、一氧化氮合成酶活力(NOS)、超氧化物歧化酶活力(SOD)有显著性(P<0.05)的差异影响；其中0.5mg/mL组、1.0mg/mL组和1.5mg/mL组血细胞数量分别在

7、48h、48h和24h出现最大值，PO活力分别在48h、24h和96h出现最大值，NOS活力分别在48h、24h和48h出现最大值，SOD活力分别在12h、24h和48h出现最大值；各处理组在出现最大值之后，也随着时间延长而逐渐趋于对照组的水平；其免疫保护率0.5mg/mL组为33.33%，1.0mg/mL组为36.67%，1.5mg/mL组为50.00%，免疫保护率随着浓度的增加而增大。4.用肽聚糖对凡纳滨对虾进行免疫刺激后，对肝胰腺中C型凝集素LvLT基因I表达的情况进行测定，其实验结果显示：注射和浸泡各个浓度处

8、理组都出现了极显著性差异影响（P﹤0.01），其中注射浓度为0.05mg/mL组、0.1mg/mL组和0.15mg/mL组基因上调出现最大值所需时间分别为24h、12h和6h，各组在出现最大值后都有逐渐下调的趋势；浸泡浓度为0.5mg/mL组、1.0mg/mL组和1.5mg/mL组基因上调出现最大值所需时间分别是12h、24h和6h，各组在出现