基于抗氧化作用研究胶原蛋白肽干预糖尿病实验动物营养代谢特性.pdf

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1、上海海洋大学硕士学位论文学校代码：10264研究生学号：M150208403上海海洋大学硕士学位论文基于抗氧化作用研究胶原蛋白肽干预糖尿病题目：实验动物营养代谢特性Collagenpeptideinterventionnutritionand英文题目：metabolismcharacteristicsindiabeticexperimentalanimalbasedonantioxygenation专业：食品科学与工程研究方向：海洋生物制药姓名：欧爱宁指导教师：吴文惠包斌二O一八年五月二十日上海海洋大学硕士学

2、位论文基于抗氧化作用研究胶原蛋白肽干预糖尿病实验动物营养代谢特性摘要机体在正常代谢过程中及在外部的刺激情况都会产生大量的自由基，而过量的自由基不能及时清除就会引起细胞损伤和凋亡和酶失活，导致机体衰老和引发各种疾病，如糖尿病。报道显示胶原蛋白肽具有抗氧化性、生物相容性强和安全性高，能增强机体免疫性和抗氧化作用被广泛应用于保健食品和生物医药，胶原蛋白多肽-铬(Ⅲ)螯合物已被证实能活化免疫细胞、改善小鼠免疫功能，促进肝糖原的合成和糖尿病小鼠体内的葡萄糖磷酸化。因此，为了更好地开发胶原蛋白肽的医用功能，论文将探索胶原

3、蛋白抗氧化特性，胶原蛋白肽溶解在不同离子环境中的抗氧化性和干预糖尿病实验动物降血糖作用的研究，为胶原蛋白肽的深入研究提供基础依据。胶原蛋白抗氧化作用评价。以WSC、C-1、C-2、SC、SKI-ASC、WCⅡ、WWSCⅡ、SCⅡ为原料，通过SDS-PAGE、氨基酸构成、还原力、•OH清除率、DPPH•清除率等指标分析胶原蛋白及其氨基酸构成与抗氧化活性的关系。SDS-PAGE分析显示，WSC、C-1、C-2、SC、SKI-ASC是Ⅰ型胶原蛋白，WCⅡ、WWSCⅡ、SCⅡ是Ⅱ型胶原蛋白。胶原蛋白的甘氨酸残基含量高

4、为317-356残基/1000残基，其次是丙氨酸残基和脯氨酸残基。WWSCII还原力EC50为2.86mg/mL、清除•OH能力EC50为9.2mg/mL，清除DPPH•能力为4.3mg/mL，顺次是SCII、WSC、SKI-ASC、SC等。胶原蛋白可有效清除•OH和DPPH•，WWSCII的还原力回归方程为Y=0.0241X+0.0275，回归决定系数在0.99以上，其他胶原蛋白也呈现类似的结果，在2-10mg/mL浓度范围内，呈现出良好的量效关系。通过测定胶原蛋白肽溶解在乙酸、乙酸钠和乙酸钙中的还原力、清

5、除•OH和DPPH•的能力，来判断离子对胶原蛋白肽抗氧化性的影响。结果显示，在H+、Na+环境中对GBB-10SP、TYPE-S的还原力降低了0.96-2.58倍，但对清除DPPH•影响效果较弱，H+环境中胶原蛋白肽无清除•OH的作用，0.1MNa+时，GBB-10SP（15mg/mL）和TYPE-S（80mg/mL）清除·OH的能力为11.94-60.56%和-4.31-15.90%呈显著性差异（p<0.05）。Ca2+对GBB-10SP、TYPE-S的还原力、•OH、DPPH•清除影响稍弱。采用小鼠糖尿病

6、模型研究GBB-10SP降血糖的作用特性。对糖尿病模型小鼠上海海洋大学硕士学位论文进行GBB-10SP灌胃处理，测定给药前后小鼠的空腹血糖值、体重、脏器指数与肝组织抗氧化能力，进行糖耐量试验。GBB-10SP处理组与模型组对比葡萄糖耐量曲线下面积降低至51.51-55.52mmol/L。肝脏指数和肾脏指数降低至40.44-41.52mg/g和16.27-16.59mg/g，脾脏指数提高至2.94-3.14mg/g，超氧化物歧化酶活力增强至90.05-103.90μ/mg，丙二醛含量降至2.94-3.03nmo

7、l/mg。与模型组相比，胶原蛋白肽处理的糖尿病模型小鼠，第28d的血糖值和第21d的AUC显著降低（p＜0.05），肝脏指数和肾脏指数下降，脾脏指数上升，肝组织抗氧化能力提高，但无降血糖效果，可以维持后期血糖值不持续升高。表明GBB-10SP可使糖尿病小鼠的肝脏抗氧化能力提高，促进糖尿病模型小鼠脏器损伤修复和提高自身免疫能力。采用小鼠糖尿病模型研究低分子量胶原蛋白肽联合苦瓜素辅助降血糖的作用特性。结果显示，胶原蛋白肽联合苦瓜素将糖尿病模型小鼠的血糖含量降低至7.5-17.8mmol/L，葡萄糖耐量曲线下面积降

8、低至32.62-38.66mmol/min·L，肝脏指数和肾脏指数降低至44.98-57.17mg/g和11.29-17.95mg/g，脾脏指数提高至2.71-3.52mg/g，超氧化物歧化酶活力增强至88.18-158.38μ/mg，丙二醛含量降至1.66-3.00nmol/mg。与模型组相比，胶原蛋白肽联合苦瓜素处理的糖尿病模型小鼠，第28d的血糖值和第21d的AUC显著降低（p＜0.05），肝