对虾的病毒检测及ihhnv夹心elisa检测方法的建立

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1、分类号Ｓ８５２？学＾２０１３１０７０４４為京泉毒义聲硕壬学位论文对卧的病毒检测及ＩＨＨＮＶ夹心ＥＬＩＳＡ检测方法的建立李秋淚指导教师费荣梅副教授专业名称预防兽医学研究方向兽医微生物学与免疫学—答辩日期二０五年五月？‘．＂，、—＾Ｘ＇‘‘、．珠．．：味＇＼八＇—‘．；屯：ＡＶ‘＇‘，：．，．；ｒ＊＇＇’＞ＩＶＩＲＵＳＤＥＴＥＣＴＩＯＮＯＦＳＨＲＩＭＰＶＩＲＵＳＤＩＳＥＡＳＥＡＮＤＴＨＥＥＳＴＡＢＬＩＳＨＭ

2、ＥＮＴＯＦＳＡＮＤＷＩＣＨＥＬＩＳＡＦＯＲＩＨＨＮＶＢｙＬｉｉｕ互ｕａ田ＱＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｆ．ＦｅｉＲｏｎｇｍｅｉ乂ＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｔｅｄ化ＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙ化ＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｉｉｔｏｆ化ｅＲｅｑ山ｒｅｍ畑ｔｓ化ｒ化ｅＭａｓｔｅｒＤ巧ｒｅｅｏｆＡｒｏｉｉｏｉｎＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅｇｙ（）ＣｏｍｐｌｅｔｅｄｉｎＭａｙ，２０１５

3、ＣｏｍｍｅｎｃｅｍｅｎｔｉｎＭａ２０１５ｙ，原创性声明，，独立进行研本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已’均己在文中经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体。Ｗ明确方式惊明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担学位论文作者（需亲笔）签名；３批惟及｜＾年会月以日学位论义版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并。向国家有关部口或机构送交论

4、文的复印件和电子版，允许论文被査阅和借阅本人授权南京农业大学可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印。、缩巧或扫描等复制手段保存和汇编学位论文保密□。本学位论文属于不保密＾，在年解密后适用本授权书９＂＂（请在上方框内打Ｖ）．学（需亲笔：７０皆年４月日巧论文作者）签名斗祇＇导师（需亲笔）签名：衣０／算＾月乏日目录目录搞要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴ田第一篇文献综巧第一章对巧的两种病毒的研瓣展１１１简介１．１背景与分布１１．２宿主与传播途径２

5、１．３临床症状３２分子生物学特征４２．１结构特征４２．２基因组结构６２．３基因多样性６３诊断方法７３７．１组织病理学方法３．２分子生物学方法８３．３免疫学方法１０４小结１０１参考文献２第二章酶联免疫吸附试验的研離胶１７１基本原理１７２燃１７２．１直接ＥＬＩＳＡ法１８２１．２间接ＥＬＩＳＡ法９２Ｉ．３夹也ＥＬＳＡ法１９２．４竞争ＥＬＩＳＡ法２０３应用２０４小Ｓ２１ｉ对肺的病巧检巧及ｍＨＮ

6、Ｖ夹也ＥＬＩＳＡ检測方法的建立参考文献２２第二篇微研究第一章谢ＴＦ病春性疾病的流行病学巧査及生衡信息学分析巧１材料２６１．１实验样２６ｉＳｉ１．２±要试剂２６１．３城仪器２６１．４引物设计与合成２７２方法２７２．１样处理２７２．２病毒基因组的提取２８２．３病毒基因序列的扩増２８２．４目的片段的回收２８２．５回收产物的连接３０２．６连接产物的转化３０２．７基因序列的生物信息学分析３１３鄉３１３．１对虫下采样倩况统计３１

7、３．２病毒基因序列扩増结果３２３．３ＷＳＳＶＯＲＦ１４／１５基因序列分析３５３．４ＩＨＨＮＶＯＲＦ３生物信息学分析３６４讨论３８参考文献４０二－ＯＲＦ３重组载体的构建与诱导蛋白的微第章ＰＥＴ３２ａ４３１材料４３１．１菌巧４３１．２主要试剂４４１．３轉仪器４４２方法４４２．１质粒ＤＮＡ的提取４４目录２．２质粒ＤＮＡ双酶切４５２３回收产物的连接４５．２４５．４酶连产物的转化２－．５重组质粒ｐＥＴ３２ａＯＲＦ３的双酶切鉴定４６

8、ＥＴ３２ａ－ＯＲＦ３诱导表达条件的优化２４６．６重组质粒ｐ－２．７ＳＤＳＰＡＧＥ鉴定４７２－．８ｐＥＴ３２ａＯＲＦ３融合蛋白的大量诱导表达４７２４８