常见细菌种属鉴定

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1、常见细菌种属鉴定摘要：【目的】了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。分析不同细菌对不同含碳、含氮化合物的分解利用情况。研究细菌在不同培养基的不同生长现象及其代谢产物在鉴别细菌中的意义。【原理】各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。以此用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生理生化反应。关键词：微生物；细菌；种属；鉴定CommonbacterialspeciesidentificationAbstract:[Obj

2、ective]tounderstandbacterialphysiologicalandbiochemicalreactionprinciple,mastertheidentificationofbacteriacommonlyfoundinthephysiologicalandbiochemicalreactionmethod.Analysisofdifferentbacteriaondifferentcarbon,nitrogencontainingcompoundsaredecomposedusingthesituation.Stu

3、diesonbacteriaindifferentculturemediumwithdifferentgrowthphenomenonanditsmetabolitesinbacterialidentificationandsignificanceof.[principle]variousbacteriawithenzymesystemisendlessandsame,onnutritionmatrixdecompositionabilityisdifferent,sothemetabolitedifferences.Byphysiolo

4、gicalandbiochemicaltestmethodsfordetectionofbacteriaonavarietyofsubstratemetabolismanditsmetabolites,thusdifferentiatingbacterialspecies,knownasbacterialphysiologicalandbiochemicalreaction.Keywords:microbe;bacteria;speciesidentification前言在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢。代谢的过程主要是酶

5、促反应过程。具有酶功能的蛋白质多数在细胞内，称为胞内酶（endoenzymes）。许多细菌产生胞外酶（exoenzymes），这些酶从细胞中释放出来，以催化细胞外的反应。各种微生物在代谢类型上表现出很大的差异，如表现在对大分子糖类和蛋白质的分解能力以及分解代谢的最终产物的不同，反映出它们具有不同的酶系和不同的生理特性，这些特性可被用作为细菌鉴定和分类的内容。在这部分实验中，通过细菌对大分子物质的水解、糖发酵实验、鉴定肠道菌的不同生理生化反应等几个试验，来证明不同细菌生理生化功能的多样性。1.材料和方法1.1实验器材1.1.1菌种枯草芽孢杆

6、菌、大肠杆菌、普通变形杆菌；1.1.2培养基固体淀粉培养基、葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基等；1.1.3试剂和溶液甲基红，Lugol’s碘液，40%的KOH，5%的a-萘酚溶液；1.1.4仪器或其他用具无菌培养皿，无菌试管，杜氏小管，记号笔，移液管及无菌枪头，棉塞，皮筋，报纸，培养箱等。1.2试验方法1.2.1培养基的制备1)固体淀粉培养基蛋白胨 10g；NaCl 5g；牛肉膏 5g；可溶性淀粉 2g；蒸馏水 1000ml；琼脂 15-20g；121℃灭菌20min。2)糖发酵培养基蛋白胨水培养基 1000ml；1

7、.6溴加分紫乙醇溶液 1-2ml；pH 7.6；另配20%葡萄糖溶液、乳糖溶液各10ml。制作方法:①将上述含指示剂的蛋白胨水培养基（pH=7.6）分装于试管中，在每管内放一倒置的杜氏小管，使充满培养液。②将已分装好的蛋白冻水和20%的各种糖溶液分别灭菌，蛋白胨水121℃灭菌20min；糖溶液112℃灭菌30min。③灭菌后，每管以无菌操作分别加入20%的无菌糖溶液0.5ml（按每10ml培养基中加入20%的糖溶液0.5ml，则成1%的浓度）。配置用的试管必须洗干净，避免结果混乱。3)葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨 5g；葡萄糖 5g；K2H

8、PO4 2g；蒸馏水 1000ml。将上述各成分溶于1000ml水中，调pH7.0-7.2，过滤。分装试管，每管10ml，112℃灭菌30min。1.2.2淀粉水解试验1)将固体淀粉培养基溶化